国家自然科学基金(30671923)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：梅兴国张竞龚伟阎浩林曾瑞红更多>>
- 相关机构：军事医学科学院沈阳药科大学河北医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- HSPs对呼吸道合胞病毒重组蛋白抗原免疫应答的调节作用被引量：3
- 2012年
- 目的考察热休克蛋白HSP70对呼吸道合胞病毒(RSV)重组蛋白抗原G1F/M2免疫应答的调节作用。方法构建并表达了Javelin-G1F/M2重组蛋白,在G1F/M2的N端引入Javelin序列,通过该序列可以实现重组蛋白与HSP70蛋白高亲和力结合。以HSP70:Javelin-G1F/M2复合物等免疫Balb/c小鼠,用乳酸脱氢酶释放法测定CTL活性,ELISA法测定IgG及其亚型IgG1和IgG2a抗体滴度,空斑抑制实验测定血清中和抗体。结果经表达和纯化获得了纯度达90%以上的融合蛋白;皮下免疫HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可诱导高滴度的IgG抗体和强的CTL应答,其抗体滴度和CTL应答强度均优于Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫。HSP70:Javelin-G1F/M2复合物在诱导中和抗体方面与Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫基本相当。HSP70:Javelin-G1F/M2复合物可以诱导更强的IgG2a应答,IgG的亚型IgG1/IgG2a的比值明显低于Javelin-G1F/M2加铝佐剂腹腔免疫组和单独Javelin-G1F/M2皮下免疫组。结论 HSP70可能通过增强CTL应答进一步纠正Th2型优势应答,使得Th1/Th2应答更加平衡。
- 龚伟张竞梅兴国曾瑞红
- 关键词：呼吸道合胞病毒热休克蛋白CTL应答IGG1IGG2A
- 蛋白转导结构域在抗原交叉提呈中的应用进展
- 2008年
- 大量实验证明,蛋白转导结构域可高效携带多种类型的物质穿越细胞膜进入细胞质。因此,将蛋白转导结构域与外源抗原连接(融合)可以促进外源抗原的交叉提呈,递送外源抗原进入MHC-Ⅰ型途径进行加工提呈,从而诱导CTL应答。本文综述了蛋白转导结构域在抗原交叉提呈中的应用进展。
- 龚伟张竞梅兴国
- 关键词：蛋白转导结构域抗原CTL应答
- 呼吸道合胞病毒(RSV)与Th1／Th2细胞因子的关系研究进展被引量：3
- 2008年
- 目的对感染呼吸道合胞病毒产生的Th1、Th2型细胞因子种类及其对Th1/Th2型反应平衡的影响进行综述。方法在查阅国内外文献的基础上,介绍各种细胞因子在呼吸道合胞病毒(RSV)感染中的作用、地位。结果与结论虽然到目前为止各种细胞因子在各实验中得出的结果,甚者是对于RSV感染更倾向于发生Th1型还是Th2型反应仍有争论,但Th1/Th2反应平衡在RSV治疗和开发防治药物方面仍具有重要意义。
- 张竞阎浩林梅兴国
- 关键词：呼吸道合胞病毒TH1/TH2型细胞因子TH1/TH2平衡
- 穿膜肽HIV-TAT与呼吸道合胞病毒G蛋白片段G1及CTL表位融合蛋白的表达及纯化
- 2008年
- 目的在大肠杆菌中表达含穿膜肽HIV-TAT与呼吸道合胞病毒(RSV)G蛋白片段G1及CTL表位的融合蛋白,并进行纯化。方法以质粒pET-G1F/M2为模板,扩增含TAT、RSVG蛋白片段G1和CTL表位F/M2的融合基因片段,与原核表达质粒pET-His连接,构建融合表达质粒pET-TAT-G1F/M2,转化E.coli BL21(DE3)plysS进行诱导表达,采用Ni2+螯合亲和层析法纯化经尿素变性的包涵体,梯度透析复性纯化的目的蛋白,并进行Westernblot鉴定。结果在E.coli中可高效表达重组蛋白TAT-G1F/M2,表达量占菌体总蛋白的30%以上,目的蛋白主要存在于包涵体中。经变性、纯化、复性可获得高纯度(>95%)特异性的TAT-G1F/M2蛋白。结论已在大肠杆菌中成功表达了融合蛋白TAT-G1F/M2,为进一步进行RSV体内体外免疫学研究奠定了基础。
- 张竞龚伟梅兴国阎浩林
- 关键词：呼吸道合胞病毒G蛋白CTL表位穿膜肽融合蛋白
