天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目(05YFJZJC00901)
- 作品数：10 被引量：17H指数：4
- 相关作者：陈宁怀丽华周昌平杨文博寇广会更多>>
- 相关机构：天津科技大学南开大学天津商学院更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划重点项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的酶促反应条件研究被引量：4
- 2006年
- 目的:考察酶源保存方式、酶促反应时间、底物pH值、底物浓度、酶浓度、金属离子等因素对酶活力的影响。方法:以假单胞菌(Pseudomonassp.)TS1138为供试菌株,采用酸式茚三酮法测定L-半胱氨酸含量,研究了酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的酶促反应条件。结果:TS1138菌株中L-半胱氨酸脱巯基酶具有较高的活性,而且Mg2+、Mn2+、Fe2+、Zn2+、Cu2+等5种金属离子对DL-ATC水解酶酶系有不同程度的抑制,其中Cu2+对该酶系的抑制作用很大。结论:确定了TS1138菌株酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸的最适酶促反应条件,为酶促反应动力学的研究奠定了基础。
- 周昌平怀丽华白钢杨文博陈宁
- 关键词：假单胞菌酶促反应L-半胱氨酸
- 微生物酶法生产L-半胱氨酸的产酶条件优化被引量：1
- 2006年
- 以假单胞菌(Pseudom onas sp.)TS1138为供试菌株,对微生物酶法生产L-半胱氨酸的条件进行了初步研究。通过对产酶培养基中的碳氮源进行研究,得到了TS1138菌株产酶的最佳碳氮源分别为葡萄糖和尿素,DL-ATC的最适添加量为5 g/L;通过对产酶培养基的产酶条件进行研究,得出了最适的种子接种量为10%,产酶培养基的最适初始pH为8.0,500 mL三角瓶的最适装液量为40 mL。
- 寇广会怀丽华白钢杨文博
- 关键词：假单胞菌酶法合成L-半胱氨酸
- L-半胱氨酸产生菌TS1138的补料分批发酵动力学研究被引量：3
- 2007年
- 以DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸(DL-2-amino-Δ-2-thiazoline-4-carboxylic acid,DL-ATC)为底物,采用来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138的L-半胱氨酸合成酶系对DL-ATC进行生物转化合成L-半胱氨酸.以5 L发酵罐补料分批发酵试验数据为依据,对TS1138菌株的补料分批发酵动力学进行了研究,建立了菌体生长、产物形成和基质消耗的动力学模型,并应用MATALAB软件进行模型拟合,拟合模型较好地反映了L-半胱氨酸产生菌TS1138的补料分批发酵过程.
- 怀丽华周昌平陈宁杨文博白钢
- 关键词：L-半胱氨酸动力学模型假单胞菌
- 假单胞菌TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的代谢控制分析(英文)被引量：2
- 2008年
- 建立了假单胞菌 TS1138菌株L-半胱氨酸酶法合成途径的动力学模型。在L-半胱氨酸合成途径中有L-半胱氨酸合成酶和L- 半胱氨酸脱巯基酶两种酶参与作用,它们的动力学模型是基于米氏动力学建立的,L- 半胱氨酸对L- 半胱氨酸合成酶有非竞争性抑制作用。通过测定L- 半胱氨酸酶法合成过程中的中间产物和终产物的浓度,利用动力学模型进行了L- 半胱氨酸合成途径的代谢控制分析。弹性系数首先可以从动力学方程中求出,根据代谢控制分析理论,流量控制系数由弹性系数求出。研究发现,在 L- 半胱氨酸酶法合成过程中,L- 半胱氨酸合成酶和L- 半胱氨酸脱巯基酶的流量控制系数存在一个交叉点。
- 怀丽华陈宁杨文博白钢
- 关键词：L-半胱氨酸动力学模型酶法合成
- 响应面法优化假单胞菌TS1138的产酶条件(英文)被引量：4
- 2007年
- 以假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138为供试菌株,运用响应面法对酶法合成L-半胱氨酸所用酶的生产条件进行优化。首先利用Plackett-Burman设计从影响TS1138菌株产酶的众多因素中筛选出影响较大的四个因素:DL-ATC 、玉米浆、转速和装液量。在此基础上再利用二次响应面分析法进行优化,得出了最佳的实验条件。最佳产酶培养基配方为(g/L):葡萄糖 30、DL-ATC·3H2O 3.0、玉米浆 3.1、尿素 3、MnSO4·H2O 1、K2HPO4·3H2O 3、FeSO4·7H2O 0.01、MgSO4·7H2O 0.5、NaCl 3;最佳产酶培养条件为:摇床转速 190r/min、500ml摇瓶装液量 42ml、接种量 10%、产酶培养基初始 pH7.5、培养温度 29℃。在优化条件下进行产酶培养,细胞酶活力达 2255U/ml,比未优化前的 2053U/ml 提高了 9.8%。
- 怀丽华陈宁白刚杨文博李梅
- 关键词：L-半胱氨酸酶法合成响应面法假单胞菌
- DL-ATC对TS1138菌株酶法生产L-半胱氨酸的影响被引量：1
- 2008年
- 以假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138菌株为供试菌株,研究了在转化DL-ATC生产L-半胱氨酸过程中,DL-ATC对产酶和转化的影响.结果表明:DL-ATC对TS1138菌株产酶具有诱导作用,产酶培养中必须适量添加.从L-半胱氨酸的产量和DL-ATC转化率两个方面综合考虑,酶法生产L-半胱氨酸的最适DL-ATC为9 g.L-1,采用间歇流加DL-ATC方式可使L-半胱氨酸的产量提高56.25%.
- 李梅黄磊怀利华陈宁
- 关键词：DL-ATC酶活力L-半胱氨酸
- 酶催化合成L-半胱氨酸产酶培养基及产酶条件的研究
- 2006年
- 假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138经DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)的诱导,在菌体内能产生催化该诱导物生成L-半胱氨酸的酶系.对产酶培养基及产酶条件进行了研究,得出DL-ATC的最适添加量为0.5%,最适碳源为葡萄糖,最适氮源为尿素,最适培养温度为27～29℃,最适摇瓶装液量为40mL.根据摇瓶优化结果,进行了7 L罐试验,酶活力最高达1 780 U/mL.
- 寇广会周昌平刘淑云陈宁
- 关键词：假单胞菌DL-ATCL-半胱氨酸
- 微生物转化法合成L-半胱氨酸的研究被引量：7
- 2006年
- 以DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)为转化底物,采用来自假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138的L-半胱氨酸合成酶系对DL-ATC进行生物转化合成L-半胱氨酸.对转化条件进行了研究,得出TS1138菌株合成L-半胱氨酸的最适转化条件;反应温度为42～44℃,转化时间为2.5 h,底物质量浓度为6g/L,酶源细胞浓缩倍数为5倍.动力学研究表明,TS1138菌株L-半胱氨酸合成酶系的米氏常数(Km)为7.1 997 mmol/L,最大初反应速度Vmax=41.6629 mmol/(L·min).
- 周昌平寇广会徐庆阳陈宁
- 关键词：DL-ATCL-半胱氨酸微生物转化法假单胞菌
- 溶氧对假单胞菌TS1138生产L-半胱氨酸合成酶系的影响被引量：1
- 2010年
- 假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138在含有DL-2-氨基-Δ2-噻唑啉-4-羧酸(DL-2-amino-Δ2-thiazoline-4-car-boxylic acid,DL-ATC)的环境中能够转化DL-ATC生成L-半胱氨酸的酶系。通过固定不同溶氧浓度,探索溶氧对假单胞菌TS1138发酵产酶的影响。摇瓶实验结果表明:溶氧浓度过低,菌体生长缓慢,细胞产酶能力较低;溶氧浓度过高,菌体生长速度快,但不利于细胞产酶。7L罐发酵实验结果表明:在产酶中后期,应根据溶氧浓度变化来调节搅拌转速或空气流量,使溶氧浓度控制在30%以上。
- 怀丽华陈宁
- 关键词：L-半胱氨酸溶氧假单胞菌
- 碳氮源对酶法合成L-半胱氨酸的影响被引量：6
- 2006年
- 以假单胞菌(Pseudomonassp.)TS1138为供试菌株,研究了在酶法转化DL-ATC合成L-半胱氨酸中碳氮源对酶源细胞酶活力的影响,确定了在产酶培养基中最适的碳源是葡萄糖,最适加入量为4.0%;最适的氮源是酵母粉、蛋白胨和尿素的组合,最适加入量分别是蛋白胨1.0%,酵母粉1.5%,尿素0.3%,酶源细胞的酶活力达到2679U?mL-1。
- 怀丽华寇广会周昌平陈宁
- 关键词：L-半胱氨酸酶法合成酶活力
