国家自然科学基金(30671974)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
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- 肿瘤坏死因子-α对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2表达的调控及机制被引量：1
- 2009年
- 目的探讨肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）对原代大鼠肾近端小管上皮细胞Toll样受体2（tolllike receptor2,TLR2）表达的调控以及核因子-κB（nuclearfactor-κB,NF-κB）在其中的作用。方法体外分离与培养原代大鼠肾近端小管上皮细胞,以TNF-α按不同时间给予刺激,Western blot检测TLR2,I-κBα,磷酸化I-κBα（pI-κBα）,GAPDH蛋白水平。分别以TNF-α、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082处理25h、Bay11-7082预处理1h后加入TNF-α刺激24h,检测TLR2表达的变化。结果TNF-α刺激6~24h,TLR2高于基线水平;Bay11-7082处理组和Bay11-7082＋TNF-α处理组的TLR2蛋白表达水平高于对照组。Bay11-7082＋TNF-α处理组与单独TNF-α处理组TLR2蛋白表达水平无差异。TNF-α刺激后5~120min,pI-κBα蛋白水平升高。结论TNF-α促进原代大鼠肾近端小管上皮细胞TLR2蛋白表达,NF-κB对TLR2的表达可能起负调节作用。
- 刘珊英李焱常建星范新兰黄琼傅玉如林燕华林天歆
- 关键词：肿瘤坏死因子-ΑTOLL样受体2核因子-ΚB
- TNF-α对肾脏近端小管上皮细胞caspase-3的调控作用及其机制被引量：4
- 2010年
- 目的:探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠原代肾小管上皮细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)激活与表达的调控以及核因子-κB(NF-κB)在其中的作用。方法:体外分离与培养大鼠肾小管上皮细胞,以TNF-α(10μg/L)按不同时间给予刺激,Western blotting检测caspase-3及其活化裂解片段cleaved caspase-3,以及I-κBα和磷酸化I-κBα(pI-κBα)蛋白水平。分别以TNF-α(10μg/L)处理24h、NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082(5μmol/L)处理25h、Bay11-7082(5μmol/L)预处理1h后加入TNF-α(10μg/L)刺激24h,检测caspase-3及cleaved caspase-3的变化。结果:TNF-α刺激6至24h,cleaved caspase-3与caspase-3的相对比值显著高于对照组;而caspase-3蛋白水平在TNF-α刺激后6h无明显增高,12h低于对照组,24h回升;Bay11-7082处理组和Bay11-7082+TNF-α处理组的caspase-3蛋白表达与活化水平显著低于TNF-α处理组和对照组。结论:TNF-α促进大鼠原代肾小管上皮细胞caspase-3的激活与表达,这一过程与NF-κB的激活有关。
- 刘珊英李焱潘秋辉魏菁范新兰苏芳林燕华林天歆
- 关键词：肿瘤坏死因子半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3NF-ΚB肾小管上皮细胞
- 甘精胰岛素和人胰岛素对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖作用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨甘精胰岛素(insulin glargine)和人胰岛素(human insulin)对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖的影响及细胞外信号调节激酶(ERK)的调节作用。方法使用不同浓度的甘精胰岛素和人胰岛素刺激人乳腺癌MDA-MB-231细胞株,检测不同时间段的细胞增殖作用,探讨抑制ERK1/2激活对细胞增殖的影响。使用cell counting kit-8(CCK-8)试剂检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布。结果甘精胰岛素和人胰岛素在1、10、100IU.L-1刺激MDA-MB-231细胞96h后均可轻度促进MDA-MB-231细胞增殖,相同条件下甘精胰岛素和人胰岛素的促增殖效应无差异。甘精胰岛素与人胰岛素以10IU.L-1分别刺激48、72、96h后两药均诱导细胞增殖,比较两种药物间增殖效应的差异无统计学意义。甘精胰岛素和人胰岛素均使S+G2/M期细胞比例增加,但两处理组间差异无显著性。ERK1/2抑制剂PD98059可抑制MDA-MB-231细胞增殖;但PD98059不影响甘精胰岛素和人胰岛素对MDA-MB-231细胞增殖的促进作用。结论甘精胰岛素和人胰岛素对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231增殖有类似的轻度促进作用,该作用不依赖于ERK的激活。
- 刘珊英李焱潘秋辉魏菁梁颖傅玉如梁蔚文林天歆
- 关键词：甘精胰岛素人胰岛素ERKPD98059人乳腺癌细胞MDA-MB-231
- 低剂量脂多糖对NIT-1β细胞凋亡、增殖和分泌功能的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察脂多糖对小鼠胰岛NIT-1β细胞株凋亡、增殖和分泌功能的影响。方法以1μg／ml脂多糖孵育NIT-1细胞0～120h，Hochest33342和膜联蛋白V／碘化丙啶染色检测细胞凋亡，CCK-8（cell counting kit-8）和5-溴脱氧尿核苷（BrdU）检测细胞增殖，放射免疫法检测细胞内胰岛素含量、胰岛素基础分泌和葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS），Western印迹检测胰岛素受体底物2（IRS-2）的酪氨酸磷酸化水平。结果脂多糖作用120h对细胞凋亡无明显影响。脂多糖作用24、48h促进细胞增殖（P〈0．05或P〈0．01）；作用72h对细胞增殖无明显影响；作用96、120h抑制细胞增殖（均P〈0．01）。脂多糖作用48h以后明显抑制细胞的基础胰岛素分泌（均P〈0．01），对细胞内胰岛素含量和GSIS无明显影响。脂多糖作用120h，IRS-2的酪氨酸磷酸化水平明显下降（0．45±0．08对0．22±0．06，P〈0．05）。脂多糖作用60min后，NF—κB抑制物（IKBa）磷酸化水平开始明显升高；IκBα磷酸化抑制剂Bay11-7082预处理1h后，脂多糖刺激的IκBα磷酸化和细胞增殖均受抑制（均P〈0．01）。结论低剂量脂多糖参与调节NIT-1细胞的增殖和胰岛素基础分泌，其机制可能与其激活NF—κB和抑制IRS-2酪氨酸磷酸化有关。
- 梁绮君李焱刘珊英梁颖严励傅祖植
- 关键词：脂多糖增殖
- 低剂量LPS激活NF-κB促进胰岛β细胞株NIT-1增殖被引量：3
- 2009年
- 目的探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对小鼠胰岛β细胞增殖的影响及NF-κB信号途径的调节作用。方法不同剂量LPS按不同时间刺激小鼠胰岛β细胞株NIT-1细胞,并使用NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082(5μmol·L-1)进行干预。使用cell counting kit-8(CCK-8)试剂检测细胞增殖,Western blot检测NIT-1细胞磷酸化I-κBα(pI-κBα)和总I-κBα蛋白水平。结果LPS在0.1、0.5、1.0、5.0mg·L-1刺激72h对NIT-1细胞增殖有促进作用,在5.0mg·L-1浓度时促进作用减弱,在10.0mg·L-1浓度时对NIT-1细胞增殖无明显影响;NF-κB特异性抑制剂Bay11-7082可阻断LPS对NIT-1细胞增殖的促进作用;LPS刺激后60～120min,NIT-1细胞磷酸化I-κBα相对于总I-κBα蛋白水平增高;Bay11-7082阻断LPS诱导的NIT-1细胞I-κBα蛋白磷酸化。结论低剂量LPS促进NIT-1细胞增殖,NF-κB激活可能参与其过程。
- 刘珊英李焱梁绮君甘小玲梁颖梁蔚文林燕华林天歆
- 关键词：脂多糖核因子-ΚB胰岛Β细胞NIT-1
- Lipopolysaccharide-enhanced early proliferation of insulin secreting NIT-1 cell is associated with nuclear factor-kappaB- mediated inhibition of caspase 3 cleavage被引量：4
- 2011年
- 血浆 lipopolysaccharide ( LPS )的增加的层次在肥胖和糖尿病 patients.This 学习被发现了的背景是在胰腺的贝它房间生存能力和 caspase 的参与上调查 LPS 的效果 3 在显示的时间与 LPS 在 NIT-1 房间 line.Methods 老鼠 insulinoma NIT-1 房间被对待， dose.Cell 生存能力被测量由数 kit-8 象reagent.Toll一样受体 4 的房间( TLR4 )， caspase 3 并且劈开的 caspase 3 被西方的 blotting.Insulin
- LIU Shan-ying LIANG Qi-jun LIN Tian-xin FAN Xin-lan LIANG Ying Uwe Heemann LI Yan
- 关键词：CASPASE胰腺Β细胞NIT
- 抑制miR-375降低NIT-1胰岛β细胞脂性凋亡被引量：1
- 2010年
- 目的探讨抑制内源性微小RNA-375（miR-375）是否影响NIT-1胰岛β细胞的脂性凋亡。方法将NIT-1细胞分为4组：空白组（无脂质体）、空转组（脂质体）、阴性对照miRNA组（脂质体＋阴性对照miRNA）、2＇-O-me-375组（脂质体＋2＇-O-me-375，抑制内源性miR-375的作用）。转染72h后，各组细胞分别以500μmol／L棕榈酸孵育48h。以Hochest 33342染色和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，以Western印迹法检测miR-375靶基因肌营养素（myotrophin，V1）的表达。结果与其他3组比较，2’-O-me-375RNA组NIT-1脂性凋亡率最低（P〈0．01），同时V1表达水平最高（P〈0．01）。结论抑制内源性miR-375可降低胰岛β细胞的脂性凋亡。
- 许雪娟李焱刘珊英梁颖严励傅祖植
- 关键词：RNA干扰Β细胞凋亡
