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TGF-β1/Smads信号通路与eNOS在内皮细胞稳态及动脉粥样硬化发生中的作用被引量：9: 2013年; TGF-β1/Smads信号转导途径在动脉粥样硬化中的作用是当前心血管病研究的活跃领域。内皮细胞的病变是动脉粥样硬化发生发展的始动因素,内皮细胞有表达eNOS的体系。TGF-β1与内皮细胞表达eNOS关系密切,eNOS维持内皮细胞稳态。本综述旨在探讨TGF-β1/Smads信号通路对内皮细胞表达eNOS的调节机制,为内皮细胞稳态的维持和动脉粥样硬化的预防提供新的科学依据。; 赵瑛罗玉玉张文成; 关键词：动脉粥样硬化内皮细胞 SMADS ENOS

锌指蛋白ZFP580在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块中的表达: 2012年; 【目的】通过观察由低血流剪切应力诱导的小鼠颈总动脉粥样硬化斑块中锌指蛋白ZFP580的表达,探讨其在动脉粥样硬化病变中的作用。【方法】建立颈总动脉局部狭窄动物模型,HE染色观察局部狭窄血管远心端的形态学改变,RT-PCR方法检测动脉组织中ZFP580 mRNA的表达,免疫组织化学染色观察锌指蛋白ZFP580在病变处的表达。【结果】小鼠左颈总动脉局部狭窄2周后,远心端血管内膜增厚(P<0.05),且随处理时间的延长内膜增厚愈加明显(P<0.01),处理3周后,可见明显的动脉粥样硬化斑块。RT-PCR及免疫组织化学染色发现病变动脉中ZFP580的表达较未处理侧明显升高(P<0.01),且ZFP580阳性细胞多集中在内膜层。【结论】ZFP580可能在低剪切应力诱导的动脉粥样硬化斑块的形成及发展中发挥重要的调控作用。; 孟祥艳张岭刘亚敏何瑞波张文成; 关键词：剪切应力动脉粥样硬化转录因子

酵母双杂交筛选与转录因子ZNF580相互作用的蛋白被引量：1: 2012年; 目的:寻找可能与锌指转录因子ZNF580存在相互作用的蛋白。方法:以ZNF580基因开放阅读框作为模版,PCR扩增后连接入酵母表达质粒pGB。诱饵质粒pGB-ZNF580经测序验证后转化酵母菌株Y190,人胎脑cDNA文库亦转化到能稳定表达诱饵蛋白的Y190酵母菌株中,并铺到含有营养缺陷型培养基(SD/-Trp/-His/-Leu)的培养皿上进行初步筛选。所得阳性克隆再进行β-半乳糖苷酶克隆转移滤纸实验进一步去除假阳性。随机挑取部分阳性克隆,逐一转化入含有诱饵质粒的Y190酵母菌进行一对一验证。分离阳性克隆质粒测序,并应用生物信息学方法分析阳性克隆cDNA编码的蛋白。结果:确定了14种与ZNF580可能存在相互作用的蛋白。结论:初步探讨了ZNF580的功能及其可能参与的信号转导通路,为进一步研究转录因子ZNF580参与动脉粥样硬化的机制奠定了实验基础。; 罗玉玉杨蓉孔麟麟任党丽张文成; 关键词：转录因子酵母双杂交蛋白相互作用

大鼠心肌缺血-再灌注损伤中转录因子ZFP580表达的变化被引量：3: 2011年; 目的:研究核转录因子锌指蛋白580(ZFP580)在大鼠心肌缺血-再灌注(I-R)损伤中表达的变化,探讨其可能的作用。方法:48只SD大鼠分为:(1)假手术组;(2)I-R组,结扎冠状动脉左前降支30 min后恢复血液灌注;(3)L-精氨酸(L-Arg)预处理+I-R组,于缺血前给予L-Arg 300 mg/kg,重复I-R组操作;(4)L-Arg预处理+sham组。(2)、(3)组于I-R后1 h或4 h处死动物。各组大鼠取心肌标本HE染色,光镜下计数心肌组织中中性粒细胞数。检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度,半定量RT-PCR或免疫组化染色分析ZFP580及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在心肌细胞的表达。结果:I-R后,缺血区心肌细胞肿胀,周围大量中性粒细胞浸润,血清LDH、CK活性及TNF-α浓度升高,心肌ZFP580和eNOS表达下调(P<0.05)。应用L-Arg预处理+I-R后,血清LDH、CK活性及TNF-α浓度降低,心肌ZFP580和eNOS的表达回升。结论:心肌I-R损伤引起ZFP580表达下调。ZFP580及eNOS的表达上调可能是L-Arg预处理拮抗心肌I-R损伤的机制之一。; 孟祥艳宋立新罗玉玉董化江郭敏梁彦军张文成; 关键词：缺血-再灌注精氨酸

带有Flag标签的ZNF580真核表达载体的构建及扩增: 2013年; 目的构建并扩增带有Flag标签的ZNF580真核表达载体,用于免疫共沉淀实验。方法 pGB-ZNF580质粒进行SfiI酶切,琼脂糖电泳,切胶并纯化回收ZNF580片段,与同样酶切的真核表达载体pCDEF-Flag连接构建重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580。重组质粒转化细菌感受态,铺于氨苄抗性LB平板,37℃培养箱过夜,挑取转化了重组质粒的单克隆接种于液体LB培养基中摇床培养4～8 h。从大肠杆菌中提取质粒酶切鉴定及送Takara公司测序鉴定。结果成功构建重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580并转化细菌感受态,于大肠杆菌中扩增得到足够用于细胞转染和免疫共沉淀实验的重组质粒,Takara测序结果显示重组质粒序列完全正确。结论成功构建和扩增了重组质粒pCDEF-Flag-ZNF580,为后续进行真核细胞的转染及免疫共沉淀实验奠定了基础。; 罗玉玉赵瑛孔麟麟张文成; 关键词：转录因子真核表达载体

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