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感染甘蔗黄叶病毒后甘蔗叶组织超微结构的病变被引量：4: 2010年; 利用电镜技术对感染甘蔗黄叶病毒蔗叶组织超微结构进行观察表明,韧皮部伴胞及叶肉细胞内的线粒体、叶绿体等细胞器及细胞核都发生了明显的病理变化.线粒体形态异常,有的肿大、内嵴模糊,严重者内嵴消失,空泡化,仅剩未被消解的残骸;叶绿体被膜破裂,严重者被膜完全消解,基粒类囊体和基质片层消失,基质外流.维管束鞘细胞中的叶绿体被膜和基质片层也遭到破坏,淀粉粒增多、膨大;细胞核形态变为不规则,局部核膜破裂,核内染色质分布不均匀,呈降解状.; 高三基陈平华洪健陈如凯; 关键词：甘蔗黄叶病毒叶片细胞超微结构

甘蔗黄叶病毒外壳蛋白基因克隆及其实时荧光RT-PCR检测被引量：4: 2011年; 甘蔗黄叶病毒(Sugarcane yellow leaf virus,SCYLV)引起的甘蔗黄叶病是一种新的全球性病毒病害。本文以YLSCPF1和YLSCPR591为引物,采用RT-PCR方法克隆了甘蔗黄叶病毒福建分离物(CHN-FJ1)外壳蛋白(CP)基因,编码196个氨基酸。分析不同地理来源的SCYLV病毒分离物cp基因核苷酸及其推导编码的氨基酸序列,同源性达95%以上。根据cp基因的保守序列,设计1对特异性引物和TaqMan探针,建立了SCYLV的TaqMan实时荧光RT-PCR方法。结果表明,检测下限为初始质粒模板DNA 1 000拷贝/μL(约3.61 fg/μL),比常规PCR方法的灵敏度提高100倍。检测甘蔗花叶病毒、宿根矮化病菌和黑穗病菌,没有典型的扩增曲线和无Ct值。应用实时荧光RT-PCR、常规RT-PCR和组织印迹免疫杂交(TBIA)对田间甘蔗叶片样品进行检测,阳性检出率分别为100%、61.5%和69.2%,表明该方法比常规RT-PCR和TBIA具有更高的灵敏度,适合于对SCYLV的检测。; 高三基杨帆陈平华王恒波徐景升陈如凯; 关键词：甘蔗黄叶病毒外壳蛋白实时荧光RT-PCR

我国甘蔗主要杂交亲本黄叶病病原鉴定及田间发病率被引量：5: 2011年; 甘蔗黄叶病是一种发生普遍、危害严重的病毒病害,选育抗病品种是控制该病发生与蔓延的有效措施。利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、组织印迹杂交免疫测定(TB IA)和抗原直接包被酶联免疫吸附(DAC-ELISA)方法对我国43份甘蔗主要杂交亲本黄叶病病原(Sugarcane yellowleafvirus,SCYLV)进行鉴定,并调查SCYLV田间自然侵染条件下甘蔗黄叶病发病率。已明确36份亲本材料感染或未感染SCYLV,其中32份鉴定结果为阳性,品种(系)感病率达88.9%。甘蔗植株田间自然发病率可分为无发病、发病率低、中等和高4个等级,方差分析表明,各等级间的植株发病率差异达极显著水平(P<0.01)。从美国引进的多数CP和HoCP系列亲本发病率较高,而多数崖城和新台糖系列亲本材料的发病率较低,可作为甘蔗抗黄叶病杂交亲本。; 高三基林彦铨邓祖湖徐良年陈如凯; 关键词：甘蔗黄叶病毒病原鉴定血清学反应

抗原直接包被间接ELISA检测甘蔗黄叶病毒被引量：1: 2010年; 利用正交设计L9(34)方法优化甘蔗黄叶病毒(SCYLV)抗原直接包被间接ELISA实验条件,统计结果表明,甘蔗蔗汁和蔗叶SCYLV粗提液包被抗原合适体积为150μL,最佳的抗体浓度SCYLV-IgG多克隆抗体(一抗)稀释1500倍,碱性磷酸酶羊抗兔IgG(二抗)稀释20000～30000倍,最佳反应时间为1～2h。应用这一优化体系,分析甘蔗不同部位的蔗茎和不同叶位的叶片SCYLV滴度的差异,结果表明,上部甘蔗蔗茎SCYLV病毒含量显著高于中下部蔗茎组织,最高可见肥厚带叶(+1叶)及其上一叶(-1叶)的嫩叶组织SCYLV病毒含量显著高于最高可见肥厚带叶以下第2叶(+3叶)和第4叶(+5叶)的老叶组织。甘蔗幼嫩组织部位SCYLV滴度较高,更适合于病毒检测。; 高三基Pan Yong-bao陈如凯; 关键词：甘蔗甘蔗黄叶病毒酶联免疫吸附试验

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福建省自然科学基金(2008J0048)