国家自然科学基金(30330480) 作品数:22 被引量:132 H指数:8 相关作者: 刘筠 刘少军 张纯 陶敏 孙远东 更多>> 相关机构: 湖南师范大学 教育部 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 国家教育部博士点基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 自然科学总论 更多>>
异源四倍体鲫鲤及其原始亲本遗传变异的微卫星标记分析 被引量:10 2005年 采用从鲤中分离出来的32对微卫星DNA标记,对异源四倍体鲫鲤、红鲫和野鲤的基因组DNA进行了研究.在筛选出的15对微卫星引物中,随引物不同,各等位基因数为1~8个,大小在100~420 bp之间.从3个不同群体内部的遗传相似系数来看,异源四倍体鲫鲤个体之间的遗传相似系数最大,说明异源四倍体鲫鲤群体内部的遗传变异程度最低,已经形成了一个遗传性状稳定的群体.从3个不同群体之间的遗传相似系数来看,异源四倍体鲫鲤和红鲫遗传相似系数为0.5625,和野鲤的遗传相似系数为0.5125,说明异源四倍体鲫鲤接受原始母本的遗传物质比原始父本野鲤要多一些.微卫星标记与以前报道的RAPD标记的检测结果是相似的,然而由微卫星标记获得的种群内和种群间的遗传距离均大于RAPD,说明微卫星标记比RAPD标记显示出更高的个体多态性. 李建中 刘少军 张轩杰 鲁双庆 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 红鲫 野鲤 微卫星 用团头鲂精子诱导金鱼雌核发育研究 被引量:11 2009年 用紫外灭活的团头鲂(Megalobrama amblycephala)精子激活金鱼(Carassius auratus Goldfish)卵子,用0—4℃冷水冷休克处理卵子使其染色体加倍,得到成活的雌核发育金鱼。使用与金鱼不同亚科的团头鲂精子作为激活源能极大提高雌核发育后代的鉴定效率,只需依据外形特征、染色体数目和性腺发育程度,就能容易地将雌核发育金鱼和与团头鲂杂交后代区分开。雌核发育金鱼有两种体色不同的后代,但都为双尾,体形似金鱼,染色体数目为2n=100,全雌,性腺发育正常;而杂交后代为单尾,体形似鲫鱼,染色体数目为3n=124,性腺发育滞后。本实验为证明金鱼的性别决定方式为XX/XY型提供了细胞遗传学证据。得到两种体色皆不同于母本体色的后代,可能是基因座位纯化导致后代性状分化,也可能是异精效应导致。 肖俊 彭德姣 段巍 刘少军 孙远东 龙昱 申佳珉 张纯 陶敏 刘筠关键词:金鱼 团头鲂 人工雌核发育 性别决定 不同倍性鱼垂体细胞和超微结构比较 被引量:8 2006年 对繁殖季节和繁殖季节后的二倍体红鲫(Carassius auratus red vat.)、三倍体湘云鲫以及四倍体鲫鲤脑垂体细胞的显微和超微结构以及组织化学特性进行了比较研究.结果表明,3种鱼脑垂体中都存在6种不同类型分泌细胞,但是不同倍性鱼的垂体细胞大小存在明显差异,就同一类细胞体积而言,四倍体鱼垂体细胞大于三倍体垂体细胞,三倍体垂体细胞大于二倍体垂体细胞.在繁殖季节,四倍体鲫鲤中腺垂体的GTH细胞所占比例最大,其次是二倍体红鲫,最少的是三倍体湘云鲫,该现象与四倍体鲫鲤的性腺发育提前、三倍体湘云鲫不育有关联;另一方面,三倍体湘云鲫中腺垂体中STH细胞所占比例最高,其次是二倍体,最少的是四倍体鲫鲤,这与三倍体湘云鲫生长速度最快、四倍体鲫鲤生长速度相对缓慢有关.另外,三倍体湘云鲫中腺垂体GTH细胞中的分泌颗粒和分泌小球在繁殖季节没有大量排出,而四倍体鲫鲤和二倍体红鲫明显有大量排出,说明三倍体湘云鲫的不育性与GTH中的激素不排出有关.以上结果说明,不同倍性鱼类在垂体结构方面表现出的差异与它们的生长速度、性腺发育等方面具有关联性. 龙昱 刘少军 黄卫人 张剑 孙远东 张纯 陈松 刘锦辉 刘筠关键词:二倍体 三倍体 四倍体 脑垂体 多倍体鲫鲤 被引量:28 2003年 经过十多年的研究 ,在世界上首次研制出雌雄两性能育、遗传性状稳定的异源四倍体鲫鲤群体。两性可育四倍体鱼群体连续繁殖了 11代 (F3- F1 3) ,形成了一个染色体数目为 2 0 0的新鱼种。用四倍体鲫鲤群体为父本与二倍体鱼母本交配大规模生产了具有生长速度快、不育等优点的三倍体鱼。本文介绍四倍体、三倍体鱼的生物学特性、生物学意义和产生的影响。 刘筠 刘少军 孙远东 张纯 冯浩 刘季芳 郭新红 周工健 张轩杰关键词:遗传性状 染色体数目 生物学特性 三倍体湘云鲫线粒体DNA序列变异性分析(英文) 被引量:1 2007年 对26尾三倍体湘云鲫的线粒体tRNA-Thr基因、tRNA-Pro基因和部分控制区的核苷酸序列进行了测定,获得26条长度为837—839 bp的同源基因序列,共发现65个多态性核苷酸变异位点,多态位点比例为0.077,定义了8种单元型。在湘云鲫8种单元型中确认了DNA复制终止相关的序列TAS、中央保守区序列(CSB-F、CSB-E和CSB-D)和保守序列CSB1,8种单元型含有3—5个TAS序列。在65个变异位点中,大部分序列变异为转换,8种单元型之间的序列差异在0.1%—6.3%之间。该研究为三倍体湘云鲫的繁殖和遗传改良提供了一些有价值的信息。 郭新红 刘少军 向兵 刘筠关键词:三倍体湘云鲫 线粒体DNA 控制区 异源四倍体鲫鲤雌核发育后代及其亲本RAPD分析 被引量:4 2007年 颜金鹏 刘少军 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 雌核发育 不同倍性鲫鲤鱼Dmc1基因cDNA的克隆及其表达分析 被引量:5 2007年 酵母菌Dmc1(disrupted meioticc DNA)基因是一个在减数分裂前期Ⅰ表达的特异基因,其产物是减数分裂同源染色体配对所必需的.根据酵母菌、小鼠以及人的DMC1中保守氨基酸序列合成简并引物,分别克隆了二倍体红鲫(Carassius auratus red var.)、湘江野鲤(Cyprinus carpioL.)、日本白鲫(Carassius cuvieri)、三倍体湘云鲫和异源四倍体鲫鲤Dmc1基因部分cDNA序列.通过cDNA末端快速分离法(RACE)进一步获得了以上5种鱼Dmc1的cDNA全长,其中红鲫Dmc1、湘江野鲤Dmc1和日本白鲫Dmc1全长均为1375bp,三倍体湘云鲫Dmc1全长1383bp,异源四倍体鲫鲤Dmc1全长1379bp,这5种鱼各自都编码342个氨基酸.结果表明,红鲫、湘江野鲤和日本白鲫的DMC1蛋白的氨基酸同源性高达97.3%,说明DMC1蛋白在这3种鱼里具有高度保守性;而三者与已知序列的人、小鼠和斑马鱼(Danio rerio)DMC1蛋白的氨基酸同源性分别为86%,86%和95%.以分离得到的不同倍性鱼Dmc1基因编码区中完全相同的序列设计特异引物进行表达分析.RT-PCR结果表明,Dmc1只在性腺中表达,在其他组织中不表达;通过实时荧光定量PCR(real-time PCR),对Dmc1基因在繁殖季节的二倍体红鲫,三倍体湘云鲫,四倍体鲫鲤性腺中的表达进行分析,发现Dmc1在不同倍性鱼的性腺表达有差异,在卵巢和精巢均表现为:三倍体表达最高,二倍体次之,四倍体的表达最弱,特别是在三倍体卵巢的表达远高于在二倍体和四倍体的表达.同时,对这3种鱼的性腺进行组织切片分析,发现二倍体和四倍体鱼的性腺发育良好,且四倍体成熟度高于二倍体,而三倍体鱼性腺发育缓慢未达到性成熟,特别是卵巢的发育相当不好.由此可见,在不同倍性鲫鲤鱼中Dmc1基因也是减数分裂特异的基因,其表达与倍性无显著的相关性,而与性成熟相关;并且在三倍体卵巢中的过量表达可能与其减数分裂异常及其不育有关. 陶敏 刘少军 龙昱 曾琛 刘季芳 刘良国 张纯 段巍 刘筠关键词:二倍体 三倍体 四倍体 性腺发育 异源四倍体鲫鲤群体遗传多样性的RAPD分析 被引量:15 2005年 李建中 刘少军 张轩杰 刘筠关键词:异源四倍体鲫鲤 RAPD 种质资源 异源四倍体鲫鲤及其原始亲本Sox9基因HMG保守区内含子遗传变异性分析 被引量:2 2007年 参照不同物种中Sox基因HMG保守区序列设计简并引物,扩增了异源四倍体鲫鲤及其原始亲本红鲫(Carassius carassiusred var.)和鲤鱼(Cyprinus carpioL.)的Sox基因.对不同片段大小的Sox基因测序,结果表明,四倍体鱼中存在两个Sox9基因(Atsox9a和Atsox9b),红鲫和鲤鱼中只发现一个Sox9基因(Rcsox9a和Ccsox9b).这4个Sox9基因在HMG盒中均含有内含子,大小分别为413bp,703bp,401bp和714bp,其插入位点遵守GT-AG法则.其中Atsox9a与Rcsox9a,Atsox9b与Ccsox9b的内含子序列都具有很高的一致性,分别为94.4%和97.8%,这表明内含子序列变异率较低.有趣的是,根据它们的外显子所推导的氨基酸序列一致性均为100%.因此,四倍体鱼及其原始亲本Sox9基因HMG基序内含子不仅具有长度多态性,而且内含子之间存在遗传变异性,这为进一步探讨异源四倍体鲫鲤的起源和进化提供了重要的分子生物学证据,同时也为正确掌握内含子的位置信息,功能和进化起源有着十分重要的作用. 刘季芳 刘少军 陶敏 李伟 刘筠关键词:SOX9 内含子 系统发育 新型高背型鲫鱼的形成及其生物学特征研究 被引量:8 2008年 利用鱼类远缘杂交技术和雌核发育方法获得了新型四倍体鲫鲤(G1×AT).在G1×AT中发现2%的高背型个体,其自交后代性状发生分离并形成3种两性可育的二倍体鱼:高背型红鲫、高背型双尾金鱼和青灰色鲤鱼.其中高背型红鲫自交,后代性状继续发生分离,形成高背型红鲫、花鲫和青鲫.本文主要对这3种高背型鲫鱼及其自交后代的外形特征、染色体数目、性腺显微和超微结构以及繁殖力等方面进行了研究.结果表明:(ⅰ)这3种高背型鲫鱼在外形上都具有体背高、尾柄短、头部小的优良特性.高背型红鲫、花鲫和青鲫的体高/体长值分别为0.54,0.51和0.54,三者明显高于普通红鲫的体高/体长值0.41(P<0.01);(ⅱ)3种高背型鲫鱼染色体数目与普通红鲫染色体数目一致,都为2n=100;(ⅲ)这3种高背型鲫鱼都具有正常的卵巢和精巢,它们分别能产生成熟的卵子和精子,为二倍体高背型鲫鱼品系的形成奠定了基础;(ⅳ)与普通红鲫相比,3种高背型鲫鱼具有产卵(产精)量大、繁殖期长、受精率和孵化率高等优点.它们通过自交培育出了具有高背特征的二倍体鲫鱼群体;(ⅴ)3种高背型鲫鱼既具有较高的观赏和食用价值,也可以作为优良的二倍体亲本与四倍体鱼交配来制备高背型三倍体鲫鱼.这3种高背型鲫鱼的形成在生物进化研究和鱼类遗传育种研究方面都具有重要意义. 王静 覃钦博 陈松 刘少军 段巍 刘锦辉 张纯 罗凯坤 肖俊 刘筠关键词:染色体