国家自然科学基金(30371509)
- 作品数：4 被引量：24H指数：3
- 相关作者：赵家良张华张文宝卞爱琳程刚炜更多>>
- 相关机构：北京协和医院首都医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用滤过性手术在大鼠眼上建立结膜滤过泡瘢痕化模型的研究被引量：8
- 2006年
- 目的探讨应用滤过性手术在大鼠眼上建立结膜滤过泡瘢痕化模型的可行性。方法选用35只健康成年SD大鼠作为实验动物,在全身麻醉下行单侧眼球滤过性手术,术后观察结膜滤过泡的形成情况,并观察眼前节反应;手术后1、3d,1、2、4周共5个时间点各处死3只大鼠,摘除其眼球,常规10%福马林固定,切片,HE染色,观察其病理改变,并以对侧眼作为正常对照。结果所有大鼠在手术后7d均有结膜滤过泡形成;手术后8d,结膜滤过泡消失,最长的结膜滤过泡能够维持21d。组织病理学观察显示,术后1d,结膜下组织疏松水肿,血管扩张、充血明显,有较多中性粒细胞浸润;术后3d,结膜下组织血管扩张、充血,除有中性粒细胞浸润外,还可见单核巨噬细胞浸润,结缔组织疏松、水肿较前减轻;术后7d,血管扩张充血程度较术后3d时减轻,有较多的纤维母细胞增生,纤维母细胞的细胞核呈椭圆形、胞质丰富,在纤维母细胞周围,可见少量疏松的胶原纤维形成;术后2周,纤维母细胞数量较术后1周时有所减少,细胞变细长,细胞核两端变尖,周围胶原纤维较术后1周时致密;术后4周时,结膜下组织血管多数闭合,细胞成分明显减少,纤维母细胞演变为纤维细胞,细胞核变细长,周围伴大量胶原纤维沉积,呈现瘢痕样改变。结论应用滤过性手术在大鼠眼上建立结膜滤过泡瘢痕化模型具有可行性,其病理改变是一个创伤修复的过程,该模型的建立不仅为青光眼手术后结膜滤过泡瘢痕化的防治,同时也为防治其他原因导致的结膜瘢痕化提供了新的研究方法。(中华眼科杂志,2006,42980-984)
- 马建民赵家良张文宝程刚炜张华睢瑞芳
- 关键词：结膜瘢痕滤过外科手术
- 大鼠Tenon’s囊成纤维细胞体外培养及生长特性的研究
- 2006年
- 目的 探讨建立体外大鼠Tenon’s囊成纤维细胞的培养方法，并对体外培养的Tenon’s囊成纤维细胞的生长特性进行观察。方法 选用健康年幼的SD大鼠40只，采用断颈法将其处死，摘除眼球，无菌条件下，分离剪下Tenon’s囊组织，采用植块法对Tenon’s囊成纤维细胞进行体外培养；通过细胞形态学观察和细胞免疫组化染色技术对其细胞性质进行鉴定；通过细胞记数和MTT法对其生长特性进行研究。结果 原代培养的大鼠Tenon’s囊组织块接种后，约48h即可见细胞由组织块中爬出，培养8～10d，细胞汇合程度大约可达70％左右；培养14～16d，细胞完全汇合；在细胞汇合程度达到70％-80％时，可以进行细胞传代，传代细胞接种后4—5h大部分细胞贴壁，10-12d左右传代细胞完全汇合。光镜下观察，可见Tenon’s囊成纤维细胞，在汇合程度低时细胞呈细长梭形外观，汇合程度高时细胞可呈多边形改变。免疫组化染色可见Tenon’s囊成纤维细胞角蛋白染色阴性，波蛋白染色阳性。细胞生长曲线显示，在2—8d细胞处于对数生长期。结论 体外成功地培养了大鼠Tenon’S囊成纤维细胞，这不仅为青光眼滤过泡瘢痕化防治的基础研究提供了一种新的细胞来源，同时为抗结膜瘢痕化药物的研究和开发提供了一种新的简便实用的细胞来源途径。
- 马建民赵家良陈钢炜卞爱琳张华
- 关键词：细胞培养细胞生长曲线
- 大鼠结膜囊成纤维细胞TGFβ_2特异性siRNA的筛选及其载体构建的研究被引量：6
- 2006年
- 目的筛选结膜囊成纤维细胞转化生长因子β2(TGFβ2)特异性siRNAs,并构建其载体。方法采用体外转录法合成4个TGFβ2siRNAs(L1、L2、L3、L4),分别转染体外培养的大鼠Tenon’s囊成纤维细胞,以未转染细胞作为对照,转染后48h采用RT-PCR技术检测所合成的siRNAs对TGFβ2mRNA表达的干扰作用;在此基础上,再构建有干扰作用siRNA的载体。结果与对照组相比,转染48h后,仅L4能够使大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2的mRNA表达水平明显下调,其余3条TGFβ2siRNAs未产生明显的干扰效果。经过测序检测证明成功构建了有干扰效果TGFβ2siRNA的载体。结论不同的TGFβ2siRNA对大鼠Tenon’s囊成纤维细胞TGFβ2mRNA表达具有不同的干扰效能;能够构建出有干扰效能的TGFβsiRNA特异性载体。
- 马建民赵家良卞爱琳程钢炜张文宝张华
- 转化生长因子β及其在青光眼术后滤过泡瘢痕化中作用的研究进展被引量：10
- 2004年
- 转化生长因子β(Transforming growth factor β,TGFβ)在青光眼滤过泡瘢痕化形成的病理过程中具有重要作用。本文就目前有关TGFβ的生物学特性、TGFβ在青光眼滤过泡瘢痕形成中的作用、可能的作用机理以及TGFβ拮抗剂在防治青光眼滤过泡瘢痕化中应用等方面的研究作一介绍。
- 马建民赵家良
- 关键词：滤过泡瘢痕青光眼TGFΒ转化生长因子Β术后病理过程
