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抑制性寡脱氧核苷酸对肝损伤小鼠pSTAT4、pSTAT6和T-bet表达的影响及其意义被引量：2: 2010年; 目的探讨抑制性寡脱氧核苷酸(suppressive oligodeoxynucleotide,Sup ODN)对刀豆蛋白A(ConA)诱导肝损伤小鼠兔抗鼠磷酸化信号转导和转录激动子4抗体(pSTAT4)、pSTAT6和T-bet表达的影响及其意义。方法 Balb/C小鼠40只被随机分为4组,分别为生理盐水(NS,空白对照)组、环孢菌素A(CsA)组(阳性对照)、Con ODN组(对照ODN)、Sup ODN组(实验组)。ConA(20mg/kg)尾静脉注射Balb/C小鼠造模,造模同时分别给予Sup ODN、Con ODN、CsA或NS 0.3 mL腹腔注射,分别于干预后8 h和24 h摘取小鼠脾脏,提取蛋白检测pSTAT4、pSTAT6和T-bet的表达。结果无论是干预后8 h还是24 h,Sup ODN组pSTAT4及T-bet蛋白的表达水平与NS、Con ODN及CsA组相比,均显著下降(均P<0.01);而pSTAT6蛋白表达水平,Sup ODN组与NS、Con ODN及CsA组差异均无显著性(均P>0.05)。结论 Sup ODN可能通过抑制细胞内转录因子pSTAT4和T-bet的表达,抑制小鼠Th1型免疫应答,最终实现其对肝损伤的保护作用。; 全俊刘悦晖范学工李宁; 关键词：刀豆蛋白A BET 肝损伤

抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4+T细胞T-bet、STAT4及STAT6表达的影响: 2011年; 目的探讨体外实验中,抑制性寡脱氧核苷酸(Sup ODN)对小鼠脾脏CD4+T细胞转录因子T细胞表达的T盒(T-bet)、信号转导子和转录激动子(STAT)4及STAT6表达的影响。方法分离小鼠脾脏淋巴细胞,免疫磁珠阳选法纯化CD4+T细胞,流式细胞仪分析分选纯度,在抗CD3ε抗体、抗-CD28抗体、白细胞介素(IL)12作用下,加入Sup ODN或对照寡脱氧核苷酸(ConODN)培养72 h后,常规提取核蛋白。Western-blot测定核蛋白中磷酸化的STAT(pSTAT)4、pSTAT6和T-bet蛋白表达。结果与ConODN组和PBS组比较,Sup ODN组中T-bet和pSTAT4的表达水平明显降低(P<0.05),而pSTAT6表达水平明显升高(P<0.05)。结论 SupODN可能通过下调pSTAT4和T-bet的表达,体外抑制小鼠CD4+T细胞向Th1细胞的功能性分化,上调pSTAT6的表达,促进Th2细胞的分化。; 向瑛范学工李沙陵李宁章保新; 关键词：CD4阳性T淋巴细胞辅助T细胞 T-BET STAT4 STAT6

抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠CD4^+ Th1细胞功能性分化的影响被引量：2: 2008年; 目的:观察抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠脾脏CD4+T细胞Th1分化的影响。方法:分离小鼠脾脏淋巴细胞,以免疫磁珠阳性选择法纯化CD4+T细胞,以荧光活化细胞分拣术分析其分选纯度,在抗-CD3ε抗体、抗-CD28抗体和IL-12作用下,加入抑制性寡脱氧核苷酸或对照寡脱氧核苷酸培养72 h后,用ELISA检测上清IFN-γ和IL-4的分泌,用RT-PCR检测细胞T-bet mRNA的表达。结果:抑制性寡脱氧核苷酸能明显抑制CD4+T细胞IFN-γ的分泌,促进IL-4的分泌,同时还抑制T-bet mRNA的表达。结论:在促Th1细胞因子刺激下,抑制性寡脱氧核苷酸对小鼠体外CD4+T细胞的功能性分化有作用,既促进Th2分化,又抑制Th1分化。; 李沙陵戴霞红范学工李宁刘洪波代洪周蓉蓉; 关键词：TH1 淋巴细胞 T-BET

刀豆球蛋白A所致实验性肝损伤模型的构建被引量：11: 2008年; 目的建立刀豆球蛋白A(ConA)诱导小鼠实验性肝损伤的模型。方法Balb/C小鼠40只,分别尾静脉注射ConA,根据注射剂量,小鼠被随机分为4组(每组10只):A组10mg/kg;B组20mg/kg;C组30mg/kg;另设D组作为实验对照组,尾静脉仅注射生理盐水。给药后8h观察小鼠血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性、死亡率和肝组织的病理改变。选择最佳ConA剂量,观察此剂量下不同时间点ALT活性、死亡率和肝组织的病理改变特点。结果经ConA处理后8h,A组与D组无小鼠死亡,B组死亡3只,C组小鼠全部死亡;各组血清ALT值:A组为(215.55±70.19)IU/L,B组为(2516.14±764.69)IU/L,均显著高于对照组D组的(57.30±12.21)IU/L(分别t=-8.466、t=-10.143,均P=0.000)。光镜下,A组可见肝细胞变性;B组和C组可见肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死,以C组为甚。20mg/kgConA尾静脉注射,小鼠死亡率、ALT活性、肝组织炎症细胞浸润和肝细胞变性、坏死在一定时间范围内(24h)随时间增加而加剧。结论ConA小鼠实验性肝损伤模型建立,ConA剂量以20mg/kg、观察时间以8h为宜。; 刘悦晖范学工李宁刘洪波付春燕刘征波黄燕; 关键词：刀豆球蛋白A 实验性肝损伤小鼠模型

抑制性寡脱氧核苷酸对实验性肝损伤细胞因子的影响被引量：1: 2008年; 探讨抑制性寡脱氧核苷酸(suppressive oligonucleotides,Sup ODN)对刀豆蛋白A(Con A))诱导的小鼠实验性肝损伤的保护作用.实验采用Balb/C小鼠40只,随机分4组,分别为生理盐水(NS)组、对照寡脱氧核苷酸(control oligonucleotides,Con ODN)组、环孢菌素A(cyclosporin A,CsA)组、Sup ODN组.Con A(20mg/kg)尾静脉注射Balb/C小鼠,2h时腹腔给药,给药8h时观察小鼠的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性、死亡率;检测血清TNF-α、IFN-γ、TIL-4水平;RT-PCR检测肝组织TNF-α、IFN-γ mRNA的表达;并观察肝组织的病理改变.发现Sup ODN组与NS组、Con ODN组相比,ALT活性明显降低(P<0.01);与NS组、Con ODN组和CsA组比较,IFN-γ明显降低(P<0.01),IL-4明显升高(P<0.01),TIFN-γ mRNA表达亦显著减少;而且Sup ODN可明显减轻肝脏炎性细胞浸润和肝细胞坏死(P<0.05).实验表明Sup ODN对Con A小鼠实验性肝损伤有明显保护作用.; 刘悦晖范学工李宁刘洪波付春燕刘征波黄燕; 关键词：刀豆蛋白A 炎症因子

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国家自然科学基金(30671845)