国家自然科学基金(30971275)
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
- 相关作者：贾培敏童建华许桂平潘晓蓉楼叶江更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院同济大学附属同济医院南昌大学第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自分泌干扰素α在全反式维甲酸诱导RIG-G基因表达中的作用被引量：5
- 2012年
- 目的 深入研究维甲酸诱导基因G（RIG-G）表达中干扰素α（IFN-α）和全反式维甲酸（ATRA）两条信号途径间的相互关系.方法 运用急性早幼粒细胞白血病细胞系NB4细胞和信号转导子与转录激活子（STAT）1缺失的人纤维肉瘤细胞系U3A细胞,检测ATRA作用于NB4细胞后,细胞内STAT2的磷酸化水平,并测定NB4细胞培养液上清及转染了干扰素调节因子1（IRF-1）的U3A细胞培养液上清中的IFN-α水平,以及培养液上清对STAT2的磷酸化和RIG-G基因表达的诱导作用.结果 ATRA处理72 h后,NB4细胞内的STAT2磷酸化水平和细胞培养液上清中的IFN-α浓度均明显升高[ IFN-α：（ 7.6±0.3）pg/ml比（1.5±0.5）pg/ml,P＜0.05].该培养液上清能够诱导STAT2发生磷酸化,并上调RIG-G的蛋白水平.U3A细胞转染IRF-1后,培养液上清中的IFN-α浓度也明显提高[（8.8±1.4） pg/ml比（3.4±0.4）pg/ml,P＜0.05].结论 RIG-G基因的表达与ATRA和IFN-α这两条信号途径的协同作用密切相关,ATRA可以通过上调IRF-1的蛋白水平促进细胞分泌IFN-α,所分泌的IFN-α能诱导STAT2发生磷酸化,并进一步增强细胞内RIG-G基因的表达.
- 楼叶江潘晓蓉许桂平庄立琨贾培敏童建华
- 关键词：早幼粒细胞维甲酸干扰素Α
- 中药提取物诱导血液肿瘤细胞凋亡的初步研究
- 2012年
- 目的:观察中药提取物(CHP)对急性髓系白血病细胞Kasumi-1和滤泡状淋巴瘤细胞Su-DHL-4的诱导凋亡效应。方法:将浓度为50μg/mL的CHP分别作用于Kasumi-1和Su-DHL-4细胞,观察细胞的生长状况与形态变化;应用流式细胞术检测磷脂酰丝氨酸的外翻、线粒体跨膜电位及凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达变化情况。结果:Kasumi-1和Su-DHL-4细胞经50μg/mL CHP处理后,生长均受到抑制,48 h时的生长抑制率分别为(69.45±7.21)%和(82.44±5.86)%,并可观察到典型的凋亡细胞。与对照组相比,CHP处理24 h后,2种细胞的AnnexinⅤ阳性率分别从(10.58±1.22)%和(4.30±0.52)%上升到(53.53.±6.07)%和(59.87±5.56)%,差异均有统计学意义(P<0.01);线粒体跨膜电位下降的细胞百分率从(6.67±0.64)%和(7.20±2.33)%上升到(31.13±1.80)%和(55.97±7.33)%,差异亦有统计学意义(P<0.01);此外,Su-DHL-4细胞中Bcl-2蛋白水平也有明显下降。结论:CHP能诱导急性髓系白血病细胞Kasumi-1和滤泡性淋巴瘤细胞Su-DHL-4发生凋亡。
- 夏迪贾培敏马瑜珊童建华
- 关键词：细胞凋亡中药提取物流式细胞术
- 硼替佐米联合阿糖胞苷协同诱导U937细胞凋亡机制的深入研究被引量：1
- 2012年
- 本研究旨在探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米联合低浓度阿糖胞苷协同诱导U937细胞凋亡的机制。通过细胞计数检测细胞增殖,用流式细胞仪分析细胞周期和活性氧(ROS)水平,Western blot检测凋亡信号通路相关蛋白的表达。结果表明,10 nmol/L硼替佐米联合50 nmol/L阿糖胞苷对U937细胞有明显增殖抑制作用。两药联合协同诱导细胞凋亡。两药联合较单药处理能明显协同增加U937细胞ROS的水平,并能明显上调U937细胞中p-P38,p-JNK表达,下调p-ERK的表达。结论:硼替佐米联合阿糖胞苷协同诱导U937细胞凋亡,其机制可能与ROS的损伤导致JNK、P38通路的激活和ERK的下调,从而影响细胞线粒体途径有关。
- 何丛杜欣杜圣红贾培敏童建华周励
- 关键词：硼替佐米阿糖胞苷U937细胞凋亡
- 干扰素刺激反应元件Ⅰ/Ⅱ在维甲酸诱导基因G表达调控中的作用被引量：1
- 2010年
- 目的 深入研究维甲酸诱导基因G（retinoic acid-induced gene G,RIG-G）启动子上所含的干扰素刺激反应元件（interferon-stimulated response elements,ISRE）对RIG-G基因表达的调控作用.方法 根据RIG-G基因启动子所包含的ISRE序列,利用定点突变技术分别构建野生型和位点突变型的报告基因质粒,然后采用报告基因转染实验检测RIG-G基因启动子中ISRE序列的功能活性.结果 研究发现单独突变RIG-G基因启动子上的ISRE Ⅱ元件不影响报告基因的表达,而单独突变ISRE Ⅰ则会对报告基因的表达产生明显的抑制作用;同时突变ISRE Ⅰ和ISRE Ⅱ元件则会使报告基因完全失去对转录因子的反应性.结论 RIG-G基因启动子所包含的ISRE Ⅰ和ISRE Ⅱ元件是诱导该基因表达的转录因子复合物的作用位点,是该基因表达的分子基础,且ISRE Ⅰ元件的作用要优先于ISRE Ⅱ.
- 楼叶江潘晓蓉贾培敏张长林许桂平李冬童建华
- 关键词：基因表达调控顺式作用元件
- 硼替佐米联合低浓度阿糖胞苷诱导U937细胞凋亡的研究被引量：1
- 2012年
- 本研究探讨蛋白酶体抑制剂硼替佐米联合低浓度阿糖胞苷(Ara-C)对U937细胞株的作用及机制。通过细胞计数,细胞形态学检查,流式细胞术和Western blot方法检测硼替佐米(10 nmol/L)和(或)Ara-C(50 nmol/L)处理前后U937细胞的增殖抑制和凋亡及其机制。结果显示,硼替佐米和Ara-C单药均能抑制U937细胞增殖,两药联合的抑制作用更加明显,细胞增殖抑制率在24和48 h分别达(55.00±2.81)%和(70.02±3.33)%;硼替佐米联合低浓度Ara-C能协同诱导U937细胞凋亡,促使线粒体跨膜电位下降,阳性细胞率达(38.70±1.54)%。两药联合应用还能协同诱导caspase-9,-8,-3的活化。结论:硼替佐米联合低浓度Ara-C主要通过线粒体途径、可能还通过死亡受体途径诱导U937细胞凋亡。
- 杜欣贾培敏何丛杜圣红童建华周励
- 关键词：硼替佐米阿糖胞苷U937细胞细胞凋亡
- 基因ifi56在全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化中的表达及其真核表达质粒的构建
- 2010年
- 本研究探讨ifi56基因在全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化中的表达,构建人ifi56真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位情况。用RT-PCR技术检测APL细胞NB4经维甲酸处理不同时间后ifi56的表达,并从白血病细胞NB4中扩增ifi56全长编码序列,将其亚克隆到真核表达载体pEGFP-C1中,转染到293T细胞中,提取细胞蛋白,用Western blot方法检测蛋白表达情况,荧光显微镜检测IFI56的定位。结果表明,ifi56在未经处理的NB4细胞中几乎检测不到,当用维甲酸处理72小时后明显升高,并成功将ifi56插入到质粒pEGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为83 kD。IFI56重组蛋白在293T细胞内主要定位于细胞胞浆中。结论:ifi56表达随着APL细胞分化明显升高,成功构建ifi56基因真核表达载体,IFI56蛋白主要定位于细胞浆。
- 张长林许桂平肖澍李冬贾培敏童建华
- 关键词：全反式维甲酸
