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Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂P0蛋白质: 2008年; 目的用Trizol法提取大鼠耳蜗髓磷脂P0蛋白质(myelin protein P0,P0蛋白),与传统的蛋白裂解液裂解法比较蛋白提取效果,分析Trizol法的优势。方法Trizol法和传统的蛋白裂解液裂解法分别提取200g～250g Wistar大鼠(雌雄不限)耳蜗P0蛋白,用WesternBlot法及考马斯亮兰(Bradford)法比较两种方法提取P0蛋白含量及效果。结果Trizol法提取的大鼠耳蜗P0蛋白与传统的蛋白裂解液裂解法提取的含量相当,效果肯定。结论Trizol法与传统的蛋白裂解液裂解法提取的蛋白效果相当,但Trizol法简化了操作步骤,节省了单独提取蛋白质所需的蛋白酶抑制剂,节约样本,节省时间,提高工作效率,减少了蛋白和核酸降解的机会,有着更好的前景。; 汤黎郑明秀雷雳齐若梅; 关键词：耳蜗

不同培养方法对螺旋神经元体外生长的影响被引量：5: 2007年; 目的观察不同培养条件下螺旋神经元体外生长情况,获得高纯度螺旋神经元培养物。方法利用酶消化法、剪切分离结合酶消化法对出生后3～5天的大鼠螺旋神经节进行分离,分别在血清培养基和神经元专用培养基内培养,观察神经元形态及生长情况,并进行免疫组化鉴定。结果神经元专用培养基比含血清培养基能够得到纯度更高的神经元,且细胞形态良好,轴突再生能力强。结论酶消化结合剪切分离螺旋神经节,经神经元专用培养基培养,能获得高纯度的螺旋神经元。; 史金凤夏寅雷雳王鸿范尔钟; 关键词：螺旋神经节神经元细胞培养

双重消减纯化体外培养许旺细胞(英文): 2007年; 背景: 许旺细胞培养技术和纯化方法虽不断改良, 得到的培养物纯度仍然有限, 双重消减法是否可以培养高纯度许旺细胞。目的: 采用双重消减法对许旺细胞进行培养, 观察其生长情况并测定培养纯度。设计:对照动物实验。单位:首都医科大学附属北京同仁医院耳鼻咽喉头颈外科,北京市耳鼻咽喉科研究所。材料:实验于2006-03/07在北京市耳鼻咽喉科研究所免疫室和病理室完成。选用20只3天龄Wistar大鼠,雌雄不限,由中国医学科学院实验动物中心提供。方法:分离大鼠坐骨神经,以0.2%胶原酶消化后培养。①分组干预:细胞分为实验组及对照1,2,3组,每组5只。实验组应用双30min差速贴壁法和Ara-c纯化,对照组1,2分别用双30min差速贴壁法和Ara-c纯化处理,对照组3不进行纯化。②实验评估:倒置显微镜下观察许旺细胞生长情况;采用MTT法测量实验组和对照组3生长曲线,观察细胞增殖能力;采用免疫细胞化学染色对许旺细胞进行鉴定;计算许旺细胞培养纯度(每个视野S100阳性细胞占所有细胞的比例)。主要观察指标:①各组许旺细胞生长情况。②免疫细胞化学染色结果。③细胞生长曲线。④许旺细胞培养纯度。结果:①许旺细胞生长情况:培养5d时实验组许旺细胞形态及增殖能力良好,偶见成纤维细胞。对照组1、2在培养第5天时可见较多成纤维细胞,许旺细胞形态好,但较少呈漩涡状排列的生长区域。对照组3从培养第2天开始成纤维细胞迅速增殖,所占比例逐渐增大,许旺细胞生长受到影响,突起较短,少见漩涡状生长区域。②许旺细胞生长曲线:实验组许旺细胞于第3天进入对数增殖期,至第6天达平台期。对照组3较实验组提前1d进入对数增殖期。③免疫细胞化学鉴定结果:实验组经抗S100抗体染色,阳性的许旺细胞胞体及突起呈棕褐色,梭形或三角形,双极突起,漩涡状排列。成纤维细胞�; 史金凤雷雳夏寅; 关键词：许旺细胞纯化

遗传性耳聋相关基因研究现状被引量：2: 2005年; 在过去的十年中,遗传性耳聋相关基因的研究发展很快,不少耳聋相关基因密码被破译。本文就已定位克隆耳聋基因结构和功能作综述性回顾,以加深我们对遗传性耳聋基因研究现状的了解。; 雷雳韩德民; 关键词：遗传学基因相关基因研究遗传性耳聋基因密码基因结构定位克隆

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国家自然科学基金(30471869)

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