国家科技支撑计划(2006BAI06A11-10) 作品数:16 被引量:256 H指数:10 相关作者: 何涛 淳泽 李敏 刘静 申浩 更多>> 相关机构: 中国科学院成都生物研究所 四川农业大学 成都中医药大学 更多>> 发文基金: 国家科技支撑计划 四川省“十一五”农作物及畜禽育种攻关项目 四川省科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
药用石斛的叶绿体matK基因序列分析及鉴别 被引量:46 2009年 比较22份(包括待检材料4份)共计12种药用石斛及密花石豆兰(1份)的叶绿体DNA matK基因序列差异,从分子水平对药用石斛进行鉴定。采用改良的CTAB法提取石斛基因组DNA,PCR扩增,克隆测序法对叶绿体DNA matK基因全序列进行测定,运用BioEdit、MEGA4.0等软件分析序列,构建分子系统树。测得石斛属12种植物的叶绿体matK基因长1410bp,变异位点51个,信息位点11个。除了存在碱基替换的遗传变异外,还存在碱基的插入和缺失。石斛种间以及种内不同居群(品种)间均能在NJ树中明显分化开来,种间平均遗传距离为0.008,种间最大遗传距离为0.014,最小遗传距离为0.003,碱基相差8~20个。种内不同居群(品种)遗传距离为0.001,相差1~5个碱基。并成功地对4种待检种进行了鉴定。利用12种石斛的matK基因全序列数据库及遗传分析软件,通过对待检种的matK基因全序列进行测定,可以在分子水平对石斛不同种及种内不同居群(品种)进行鉴别,为石斛的分子鉴定提供依据。 刘静 何涛 淳泽关键词:石斛 分子鉴定 不同贮藏方式对川半夏种茎出苗及其生理指标影响研究 被引量:4 2010年 目的:研究川半夏种茎的最佳贮藏方法。方法:采用9种不同贮藏方式对川半夏种茎进行越冬贮藏处理;次年播种后观察其发芽情况,统计不同贮藏条件下种茎的发芽率、发芽势和发芽指数;成苗后取样测定其种苗发根数、根长、根系活力、叶绿素含量和过氧化氢酶活力等生理指标。结果:川半夏在不同贮藏条件下,除叶绿素含量差异未达显著水平外,发芽率、发芽势、发芽指数、发根数、根长、根系活力、过氧化氢酶活力的差异均达显著水平(P<0.05)。结论:川半夏种茎收获后,建议采用室内湿沙(土)贮藏或4℃冰箱贮藏。在此条件下,种茎的萌发和生长活力表现最好。 申浩 吴卫 唐六华 潘红梅 李敏关键词:贮藏方式 出苗 种茎 生理指标 基于ITS序列的中国药用石斛及其混伪品的分子鉴定 被引量:25 2009年 目的:通过测定17种药用石斛的rDNA ITS全序列,构建分子系统树,在分子水平对待检种进行鉴别,为石斛的分子鉴定提供依据。方法:采用改良的CTAB法提取石斛叶片DNA,PCR扩增rDNAITS区全序列,产物回收纯化后直接测序,运用Bioedit,MEGA4.0等软件分析石斛属植物的rDNA ITS序列的特征。结果:建立了17种药用石斛rDNA ITS区碱基全序列数据库,其中,ITS1的长度为228-234 bp,GC量为45.7%-53.0%,变异位点167个,占总位点67.34%,信息位点106个,占总位点42.74%;ITS2长度为241-247 bp,GC量为44.8%-55.7%,变异位点165个,占总位点66.27%,信息位点115个,占总位点46.18%。属间的遗传距离为0.295,石斛种间的平均遗传距离为0.142,种内各居群间的平均遗传距离为0.002。结论:利用17种石斛的全序列数据库及遗传分析软件,通过对待检种rDNA ITS区进行序列测定,可以在分子水平对石斛不同种质进行鉴别,为石斛的分子鉴定提供依据。 刘静 何涛 淳泽关键词:石斛属 ITS序列 分子鉴定 全国不同产地半夏种质评价初步研究 被引量:10 2008年 目的:通过全国不同产地半夏尤其是四川片区半夏种茎的质量评价,为半夏深入研究和可持续利用提供参考。方法:收集川产半夏与其他产区的野生和栽培半夏,以半夏总生物碱成分为检测指标,采用紫外分光光度法对其进行含量测定。结果:不同产地半夏种茎总生物含量差异较大,并且川产半夏的总生物碱含量普遍较省外半夏高。结论:急需建立半夏的种子种苗质量标准,提供半夏高产优质种子,从源头上控制半夏的质量。 李敏 李婷 王兵 黄先鸣 贾君君 田蜜关键词:半夏 种质 不同施肥水平对川半夏产量和有效成分的影响研究 被引量:28 2011年 目的:在大田条件下,研究不同施肥水平对川半夏产量和主要有效成分的影响,为川半夏标准化栽培提供依据。方法:选取来自川半夏主产区的野生半夏居群作为试验材料,采用3因素5水平L25(56)正交表设计田间试验,3次重复。生长期间定期考察各小区出苗,抽薹和开花情况;采收后计算其单株增重率和单株增殖率,并取样测定其生物碱,β-谷甾醇的含量。结果:不同施肥水平下川半夏出苗、珠芽产生和抽薹等生长节律基本一致。但生长期间平均出苗数间差异达显著水平(P<0.05),而平均抽薹数、平均珠芽产生数、单株增重率、单株增殖率、β-谷甾醇以及生物碱含量间差异则达极显著水平(P<0.01)。各施肥因子及因子间互作对β-谷甾醇含量无显著影响,但对其他指标均有影响。结论:川半夏生产栽培中最佳施肥组合为每公顷施N,P2O5,K2O为315,225,270 kg,建议在生产上采用。 申浩 吴卫 侯凯 潘红梅 李敏 官玲亮关键词:施肥 影响半夏产量因素分析 被引量:10 2009年 目的:探讨影响半夏产量的因素和寻求解决该问题的关键技术。方法:四川是半夏的道地产区,通过四川阆中半夏基地多年生产、实验结果并兼顾周边其它区域的生产情况,对半夏生产过程中,影响其产量的各个因素进行比较分析。结果:发现品种品质、播种期、密度、肥料、采收期、产地生态环境等是影响半夏产量的重要因素。结论:半夏栽培中有诸多因素影响其产量,因此要根据半夏的生物学特性,结合种植区域地理环境特点,合理种植,科学管理,才能实现其稳定高产。 贾君君 李婷 李敏 王兵关键词:半夏 超声波辅助热回流技术提取马鞭石斛多糖的工艺研究 被引量:9 2009年 目的优选超声波辅助热回流法提取马鞭石斛多糖工艺。方法以多糖的提取率作为指标,通过单因素及正交实验对提取工艺进行优化,主要考察因素为提取时间、温度和次数。结果超声波辅助热回流提取马鞭石斛多糖的最优工艺条件:温度95℃,时间16 m in,提取4次,采用此工艺提取的马鞭石斛多糖提取率为(18.64±0.396)%,显著高于传统热回流法的提取率。结论该工艺具有良好的精密度和稳定性,重复性好,适用于马鞭石斛多糖的提取。 罗傲雪 何兴金 范益军 何涛 刘静 淳泽关键词:超声波辅助提取 多糖 川半夏种茎大小对产量和质量的影响 被引量:4 2011年 目的在大田条件下,研究不同大小川半夏种茎对产量和质量的影响,为川半夏规范化栽培提供理论依据。方法选取川半夏主产区3份不同来源地的材料,分别按种茎直径(d)大(d>1.5 cm)、中(1.0 cm 申浩 吴卫 侯凯 潘红梅 李敏关键词:种茎 栽培 川半夏资源可溶蛋白图谱遗传多样性分析 被引量:2 2011年 目的为阐明川半夏资源间亲缘关系,准确鉴定半夏药材提供更多证据。方法采用SDS-PAGE技术分析对以川半夏资源为主的23份半夏材料以及2份掌叶半夏材料的叶片和块茎可溶性蛋白进行分析;采用NTSYS软件计算材料间相似系数,并用UPGMA法构建了系统树。结果叶片共分离出19条迁移率不同的谱带,3条带纹为所有材料共有,每份材料可分离出11~18条比较清晰的带,平均14.5条。块茎共分离出12条迁移率不同的带纹,3条带纹为所有材料共有,每份材料可分离出4~12条比较清晰的带,平均9.4条。与块茎可溶蛋白图谱相比较,叶片可溶蛋白图谱能更好的鉴定半夏与掌叶半夏;无论是块茎还是叶片,其可溶蛋白在GS值为0.817水平上所有材料都可以聚为五大类,染色体数目相同或相近的材料有聚在一起的趋势。结论川半夏资源具有较丰富的可溶蛋白遗传多样性;叶片可溶蛋白图谱可用于鉴别半夏与掌叶半夏,但块茎可溶蛋白图谱难以区分二者。 潘红梅 吴卫 申浩 官玲亮关键词:SDS-PAGE 聚类分析 迭鞘石斛抗肿瘤作用研究 被引量:41 2007年 体外培养SMMC-7721和HL-7702细胞,以不同浓度的迭鞘石斛多糖、醇提物、水提物作为药物组,并设生理盐水组作为阴性对照,5-Fu组作为阳性对照,MTT法分别测定处理24h、48h、72h后的吸光度值,计算药物对细胞生长的抑制率.荷瘤小鼠分别腹腔注射迭鞘石斛3种提取物,连续注射10d,d11眼眶静脉取血,测定血清中MDA含量及SOD活力变化.体外实验发现浓度为160μg/mL的迭鞘石斛多糖作用48h,对SMMC-7721细胞的生长抑制作用最强,且对HL-7702细胞的毒害作用较小.体内实验发现,迭鞘石斛多糖能显著增强荷瘤小鼠血清中SOD活力(P<0.01),降低MDA含量(P<0.01).研究表明,迭鞘石斛多糖是一种具有潜力的抗肿瘤天然药物. 罗傲雪 宋关斌 淳泽 秦建 罗傲霜 范益军 何涛关键词:迭鞘石斛 多糖 抗肿瘤作用 SMMC-7721 S180