国家教育部博士点基金(20101106120007)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：徐瑞霞叶珏张燕婉孟宪敏宋莉更多>>
- 相关机构：中国医学科学院阜外心血管医院中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- ELISA方法在基础医学研究中的应用及注意事项被引量：8
- 2011年
- 1971年瑞典斯德哥尔摩大学的Engvall和Perlmann首次建立了酶联免疫吸附测定（Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay,ELISA）方法,用于定量检测家兔血液中的IgG。
- 徐瑞霞时那宋莉张燕婉叶珏孟宪敏
- 关键词：酶联免疫吸附测定基础医学研究
- 心肌特异激酶TNNI3K与心血管疾病的关系被引量：1
- 2016年
- 肌钙蛋白I相关激酶(cardiac troponin I-interacting kinase,TNNI3K)是一种具有丝裂原蛋白激酶活性的新激酶,因与肌钙蛋白亚基I(cardiac troponin I,cT nI)相互作用而得名。近十几年来研究发现,一方面TNNI3K在减少缺血性心室重构,增强心肌功能,诱导心肌细胞分化以及增加心肌细胞数量等方面发挥心脏保护作用。另一方面,TNNI3K也可能参与了心脏向心性肥厚、PR间期延长及加速扩张性心肌病的进展等病理过程,从而成为研究的热点。本文就TNNI3K结构、生物学功能及其与心血管疾病关系作一综述。
- 王银徐瑞霞
- 关键词：肌钙蛋白I心血管疾病分化
- 小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层制备被引量：3
- 2013年
- 目的建立小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)饲养层,用于胚胎干细胞的培养。方法取孕13～15d的昆明种小鼠,分离原代成纤维细胞,在37℃时,用0.25%胰蛋白酶(含0.04%EDTA)消化组织块5min,重复消化多次,24h首次换液,培养3d后传代。采用10μg/mL丝裂霉素C处理胚胎成纤维细胞3h,制备出的饲养层细胞能有效地抑制胚胎干细胞的分裂,且不影响其活力。结果胎鼠分离原代成纤维细胞经10μg/mL丝裂霉素C处理后,细胞仍保持分泌多种生长因子的能力,在10d内既不增殖,也不死亡,能够很好的维持胚胎干细胞克隆的生长。结论该方法制备的饲养细胞层适用于胚胎干细胞的培养。
- 叶珏张燕婉时娜杨子鹤宋莉孟宪敏徐瑞霞
- 关键词：小鼠胚胎成纤维细胞丝裂霉素C饲养层胚胎干细胞
- TNNI3K基因过表达诱导小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2016年
- 目的研究肌钙蛋白Ⅰ相关激酶(TNNI3K)对小鼠胚胎干细胞(m ESC)向心肌细胞分化的影响。方法从形态和细胞免疫荧光、碱性磷酸酶试验以及HE染色鉴定m ESC的多能性。采用悬滴法培养m ESC形成拟胚体(EB),自分化为跳动的心肌细胞,通过细胞免疫荧光和透射电镜(TEM)方法鉴定。慢病毒分别携带h TNNI3K基因和siRNA感染m ESC,并分别自分化为心肌细胞,通过流式细胞术(FCM)、细胞免疫荧光、Western blot等分析心肌特异性蛋白表达水平的差异。结果 m ESC表面蛋白分子SSEA-1和Oct-4表达呈阳性(绿色),ALP试验呈蓝紫色,核质比>>1。正常自分化的细胞免疫荧光显示cTnⅠ、cTnT、MLC2以及α-actinin阳性(绿色),肌节清晰可见。TEM显示心肌细胞独有的肌纤维亚细胞结构。过表达组cTnT+阳性细胞率高于对照组,Western blot显示心肌特异性蛋白cTnT、cTnⅠ、MLC2、α-actinin等显著高于对照组,且细胞免疫荧光结果显示MHC6蛋白提前表达。干扰组不仅cTnT+阳性细胞率显著低于对照组,而且心肌特异蛋白也显著低于对照组,MHC6蛋白表达延后。结论TNNI3K基因能增强心肌细胞的生成,促进m ESC向心肌细胞的分化。
- 王银徐瑞霞马春艳姚雨宏叶珏李建军
- 关键词：小鼠胚胎干细胞
