国家自然科学基金(30800904)
- 作品数：6 被引量：37H指数：4
- 相关作者：孟革赵建丁日高张宪成黄春倩更多>>
- 相关机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠肺微血管内皮细胞原代培养方法的改进被引量：10
- 2009年
- 目的:改进大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)原代培养方法,以获取纯化的大鼠肺微血管内皮细胞。方法:应用Wistar大鼠,采用改进的组织块贴壁法分离、培养肺微血管内皮细胞;光镜观察细胞形态;Ⅷ因子相关抗原免疫细胞化学法及植物凝集素BSI结合实验鉴定培养的PMVECs。结果:体外培养的原代PMVECs在光镜下呈短梭形或多角形,形成单层后呈铺路石样排列,但随着传代或培养条件的改变,细胞形态发生变化;Ⅷ因子相关抗原染色阴性,异植物凝集素BSI结合实验阳性。结论:通过改进的PMVECs分离、培养方法获得的细胞生长状态良好,纯度高,且能够稳定地传代培养。细胞形态观察结合免疫细胞化学法是目前较为理想的PMVECs鉴定方法。
- 孟革赵建吕新怀丁日高
- 关键词：肺微血管内皮细胞
- 中性粒细胞在急性肺损伤中的作用机制研究进展被引量：14
- 2009年
- 急性肺损伤(ALI)的本质是多种炎性介质及效应细胞共同参与的肺内过度性、失控性炎症反应。中性粒细胞(PMN)在其中发挥了重要的作用,本文主要从整合素、Ca2+-钙调蛋白的信号通路及PMN凋亡延迟等方面综述PMN在ALI中的作用机制。β2整合素在PMN向肺内募集和激活的过程中发挥重要作用;Ca2+在ALI形成过程中有复杂的信号转导通路,1-磷酸鞘氨醇、神经垂体腺苷酸环化酶激活蛋白、钙调蛋白都在Ca2+介导的信号通路中发挥了重要作用;抗IL-8:IL-8免疫复合物、PMN跨越内皮-上皮屏障、髓过氧化物酶、NF-κB激活可能都参与了PMN凋亡延迟。
- 夏长江孟革赵建丁日高
- 关键词：急性肺损伤中性粒细胞整合素细胞凋亡
- 肺血气屏障在全氟异丁烯吸入性肺损伤发病过程中的作用研究
- 目的:阐明肺血气屏障在全氟异丁烯(perfluoroisobutylene,PFIB)吸入性肺损伤发病过程中的作用及地位,为研究更为有效和针对性的防治措施提供坚实的理论根据。方法:基于大鼠口鼻式暴露(PFIB 140 m...
- 赵建孟革丁日高孙晓红黄春倩张宪成
- 关键词：全氟异丁烯血气屏障细胞骨架肌球蛋白轻链激酶
- 文献传递
- 全氟异丁烯单次暴露诱发小鼠急性肺损伤的长期效应(英文)被引量：4
- 2011年
- 目的探讨全氟异丁烯(PFIB)单次暴露诱发急性肺损伤的长期效应。方法 70只雄性小鼠暴露于全氟异丁烯130 mg.m-3 5 min。10只小鼠于暴露后24 h评价肺水肿程度。其余小鼠分别在PFIB暴露后2,4,6,8,12和16周,应用HE染色和天狼星红染色分别观察肺组织的病理变化和胶原沉积,测定肺及血浆中羟脯氨酸含量。结果 PFIB暴露后24 h诱发了严重肺水肿。染毒后2周肺组织仍然观察到肺泡腔内炎性细胞浸润、蛋白质渗出、肺泡隔增厚、肺间质和肺泡水肿。血管壁和支气管壁Ⅰ和Ⅲ型胶原损伤严重,但肺泡壁Ⅲ型胶原大量沉积。与正常对照组相比,肺组织羟脯氨酸含量明显下降(P<0.01),但血浆中羟脯氨酸含量比明显上升(P<0.01),这种变化趋势一直持续到第6周,从第8周逐渐恢复正常,到第16周染毒组与正常组相比无显著性差异。从第4周开始,肺组织损伤和血管壁和支气管壁胶原损伤逐渐恢复,肺泡壁Ⅲ型胶原逐渐吸收。16周后,肺组织病理损伤及胶原变化几乎恢复正常。结论 PFIB单次暴露后,早期血管壁和支气管壁胶原严重破坏,但后期无肺纤维化发生。
- 孟革王和枚赵建丁日高张宪成黄春倩
- 关键词：全氟异丁烯胶原血气屏障
- 全氟异丁烯Wistar大鼠动态吸入急性毒性观察被引量：3
- 2011年
- 目的观察Wistar大鼠吸入全氟异丁烯（PFIB）的急性毒性。方法大鼠分9组分别吸入不同质量浓度（114.2、128.3、149.3、155.8、165.7、177.9、189.6、200.5、219.6 mg/m3）的PFIB 5 min,记录染毒前及染毒后第1、2、7、14天动物体质量,染毒后动物的死亡数,平均每只动物每天摄食量和饮水量。采用Bliss氏法计算半数致死浓时积（LCT50）并比较性别差异;染毒后第14天处死存活动物,进行大体病理观察,取114.2、149.3、200.5、219.6 mg/m3组存活动物肺组织测定肺系数。结果雌、雄性大鼠LCT50分别为921.3 mg.m-3.min-1、943.5 mg.m-3.min-1;95%置信区间（CI）分别为828.9~1 124.0 mg.m-3.min-1、844.0~1 211.0 mg.m-3.min-1,两者差异无统计学意义。两者合并计算的LCT50为932.1 mg.m-3.min-1,95%CI为863.9~1 049.0 mg.m-3.min-1。在染毒后第14天大体病理检查发现,除219.6 mg/m3组的2只雄性大鼠有较严重的肺水肿,其他各组动物的肺水肿有较好的恢复。但肺部的瘀血、出血点,肠出血、肿胀、灰白色斑块等病理症状随PFIB染毒水平的增加逐渐加重。大鼠吸入PFIB后2 d内体质量缓慢下降,而后雌性动物的体质量缓慢上升,而雄性动物的体质量与雌性动物相比上升较快。平均摄食量和饮水量与动物体质量的变化趋势一致。结论 PFIB急性毒性较强,肺是其主要损伤器官,但后期仍伴随其他组织器官的损伤。
- 孟革孙晓红黄春倩张宪成赵建丁日高
- 关键词：全氟异丁烯急性毒性吸入
- 清醒大鼠肺功能检测系统在全氟异丁烯吸入毒理研究中的应用被引量：3
- 2011年
- 目的考察在全氟异丁烯(PFIB)吸入毒理实验中引进清醒动物肺功能检测系统是否有助于PFIB中毒的诊断和治疗。方法利用清醒动物肺功能检测系统,检测PFIB吸入中毒大鼠中毒前后不同时间的呼吸功能指标(吸气时间、呼气时间、呼吸频率、吸气流量峰值、呼气流量峰值、潮气量和呼气量)。结果Wistar大鼠给予PFIB 150 mg/m3暴露吸入8 min,4 h后即观察到吸气时间、呼气时间明显缩短,8 h后两者分别降至129 ms和215 ms,并持续至24 h;在染毒后8 h吸气流量峰值和呼气流量峰值显著升高,呼吸频率明显加快,潮气量和呼气量明显降低。结论清醒大鼠肺功能检测系统操作简便快捷,数据稳定,灵敏度高,可及时有效检测出PFIB吸入中毒大鼠呼吸功能指标的变化,可广泛应用于吸入毒理药理实验研究中。
- 孙晓红张宪成黄春倩孟革付荦援赵建苏瑞斌
- 关键词：全氟异丁烯
- 大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离、纯化、原代培养及鉴定被引量：4
- 2010年
- 目的建立大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cell,AT-Ⅱ)分离、纯化、原代培养及鉴定方法。方法取Wistar大鼠肺脏,采用胰蛋白酶消化法分离AT-Ⅱ,通过差速离心法、红细胞裂解法、贴壁选择法、免疫黏附选择法纯化AT-Ⅱ,倒置相差显微镜下观察细胞形态,鞣酸染色法进行细胞鉴定。结果与结论AT-Ⅱ呈单个或岛状生长,细胞呈圆形或椭圆形,细胞浆内有大量的反差明显的细胞小颗粒,细胞核明显。鞣酸染色法鉴定阳性。通过改进的酶消化法获得的AT-Ⅱ生长状态良好,纯度高,符合体外实验要求。
- 孟革赵建吕新怀丁日高
- 关键词：纯化原代培养
