福建省发展和改革委员会资助项目([2003]170)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：陈建秋林彬辉潘菲郭玉春潘大仁更多>>
- 相关机构：福建农林大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目福建省发展和改革委员会资助项目福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：环境科学与工程更多>>
- TeiR融合蛋白分离及多克隆抗体的制备
- 2009年
- 提取睾丸酮丛毛单胞菌(Comamonas testosteroni)基因组DNA,PCR扩增teiR基因,将扩增产物克隆到pET28a中,经酶切验证后获得teiR基因表达载体pET28a-teiR.将重组质粒转化大肠杆菌(Escherichia coli)BL21,添加终浓度为1 mmol.L-1的IPTG进行诱导,提取细菌总蛋白进行蛋白的SDS-PAGE电泳.并根据融合蛋白特性,利用Ni-NTA Spin Column对TeiR融合蛋白进行分离纯化,经分离纯化后的重组蛋白在SDS-PAGE上呈现出单一条带.进一步以获得的TeiR融合蛋白为抗原,制备兔抗TeiR多克隆抗体,经ELISA测定该抗体的效价为1∶10000,该抗体与睾丸酮丛毛单胞菌天然TeiR蛋白反应良好,说明该抗体特异性良好.
- 陈建秋艾育芳潘大仁周以飞潘菲林彬辉郭玉春
- 关键词：睾丸酮丛毛单胞菌多克隆抗体
