浙江省重点科技计划(030823010)
- 作品数：3 被引量：31H指数：3
- 相关作者：郑红英陈剑平陈炯沈嘉乐蔡健和更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院浙江大学广西农业科学院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省重点科技计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 三种百合线状病毒的外壳蛋白抗血清制备被引量：6
- 2007年
- 设计3对表达引物分别扩增侵染了百合无症病毒(lily symptomless virus,LSV),百合斑驳病毒(lily mottle virus,LMoV)和百合X病毒(lily virus X,LVX)的外壳蛋白基因,并在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中原核表达。目的蛋白切胶后免疫小鼠制备多克隆抗体。Western blot检测表明3种病毒抗血清分别与目的蛋白起特异性反应,但与阴性对照无反应。3种病毒间无交叉血清学反应。对田间栽种的百合样品间接ELISA检测表明,LMoV和LSV均有发生,但没有检测到LVX。
- 沈嘉乐郑红英陈炯黎昊雁郭方其陈剑平
- 关键词：百合无症病毒百合斑驳病毒抗血清
- 侵染广西罗汉果的小西葫芦黄花叶病毒的鉴定及抗血清制备被引量：21
- 2005年
- 在广西临桂罗汉果花叶畸形病株上获得了一个线状病毒分离物LGL-1,寄主范围、蚜传能力测定、病毒粒子形态和细胞病理特征研究表明,它是马铃薯Y病毒科成员。采用马铃薯Y病毒科特异性简并引物做PCR扩增,并测定了分离物LGL-1的基因组3′-末端序列,序列分析表明它是小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)。系统进化树分析揭示,世界范围内的ZYMV分离物主要可分为3大群体,分离物LGL-1为中国特有群体Group III成员。原核表达制备了分离物LGL-1的外壳蛋白抗血清,明确了ZYMV是引起广西罗汉果病害的主要病毒,并且比较了原核表达法和提纯病毒法制备的抗血清,在病样的间接ELISA法检测中结果的差异。
- 秦碧霞郑红英蔡健和陈炯刘志明陈剑平
- 关键词：生物学鉴定系统进化树小西葫芦黄花叶病毒间接ELISA
- 洋葱黄矮病毒和韭葱黄条病毒外壳蛋白基因的原核表达及抗血清制备被引量：6
- 2006年
- 根据已报道的洋葱黄矮病毒(OYDV)和韭葱黄条病毒(LYSV)序列设计特异引物,分别扩增OYDV和LYSV的全长外壳蛋白(CP)基因,插入原核表达载体pSBET后在大肠杆菌BL21(DE3)plysS中诱导表达。通过12%SDS-PAGE和5%～20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳纯化诱导产物,免疫小鼠,获得高纯度的抗CP血清。Westernblot分析表明,OYDV与LYSV血清学远缘相关。对大蒜田间样品的间接ELISA检测表明,OYDV和LYSV在田间普遍发生,且通常为复合侵染。两者间微弱的血清学交叉反应对ELISA检测结果影响极小,可用于样品检测。
- 鲁宇文沈嘉乐韦传宝郑红英陈炯陈剑平
- 关键词：原核表达抗血清制备间接ELISA
