广东省医学科学技术研究基金(2001641)
- 作品数：10 被引量：200H指数：7
- 相关作者：吴国光梁延连苏宇清喻琼邓志辉更多>>
- 相关机构：深圳市输血医学研究所深圳市血液中心(深圳市输血医学研究所)深圳市血液中心更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基因分型技术首次应用于类孟买型家系ABO基因的研究被引量：5
- 2003年
- 目的探讨将基因分型技术用于解决临床输注中血型血清学难题。方法报告首次在国内用基因分型技术用于一个类孟买型家系5口人ABO基因多态性的研究。在吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制等血清学试验基础上,采用快速盐析法提取外周血中的DNA,用PCR-SSP法扩增ABO血型等位基因。 结果一家5人中,兄弟3人均为类孟买型,ABO基因分型分别为A102B、A102B、A102O1,而其父母血型基因与血清学血型相符合。结论ABO PCR-SSP基因分型是一种方便、快速、可靠的技术,与血型血清学相比有着显著优势。
- 喻琼吴国光邓志辉梁延连苏宇清赵桐茂
- 关键词：基因分型技术类孟买型家系ABO基因基因多态性PCR-SSP法
- 中国人群ABO血型系统基因分型研究与应用(英文)被引量：3
- 2005年
- 背景:ABO血型是输血医学中最重要的血型系统,血型血清学定型技术具有简单实用的特点已广泛应用于ABO血型中的鉴定中,但是血清学试验存在局限性,而基因技术在某种程度上克服了血清学试验的缺点。目的:研究中国人群ABO基因多态性,并将基因分型技术用于解决临床输注中血型血清学难题。设计:随机选取样品,与常规血型血清学结果相比较,分析基因型结果。单位:一所市级血液中心输血医学研究所。对象:选择2002-03/2002-12在深圳市血液中心参加捐血的无血缘关系的中国汉族无偿献血者个体260人为研究对象,其中男110人,女150人,年龄18～50岁。1例血清学技术正反定型不符的标本来自本血液中心并调查其家系,6例血清学疑为A2型的标本来自第二人民医院等4个本市医院输血科。方法:快速盐析法提取外周血中的DNA,采用聚合酶链反应-序列特异性引物基因方法对ABO血型定型,并且在吸收放散试验、唾液血型物质凝集抑制等血清学试验基础上,用聚合酶链反应-序列特异性引物法扩增ABO血型的等位基因。主要观察指标:260人份样品ABO血型系统的基因型及疑难血型样品的血清型与基因型。结果:在中国汉族符合Hardy-Weinberg平衡的随机群体(260人)中,检出O1,B,A1O1(A467C)和A1O2/1O3(A467T)4种等位基因,其基因频率分别为0.5827,0.1846,0.
- 喻琼吴国光梁延连苏宇清
- 关键词：聚合酶链反应ABO血型系统基因频率
- B亚型中Bx新等位基因的鉴定被引量：7
- 2006年
- 目的对ABO血型中B亚型分子遗传背景的研究,发现并鉴定ABO新等位基因。方法对5份血型血清学鉴定为B亚型的样本,采用PCR-SSP、ABO基因第6及第7外显子直接测序方法进行基因定型;并对目的B亚型样本进行RT-PCR、巢式PCR扩增、测序,分析其cDNA结构的差异。结果5份血清学为B亚型的样本中,血清学鉴定为Bx的个体发现了一个新的B等位基因。该等位基因与B101等位基因相比,差异仅在于第7外显子的B基因序列中nt721位C>T突变。其余4份B亚型样本的ABO基因第6、7外显子都未发现新的点突变。结论首次在中国汉族人中发现一个721C>T新变异的B等位基因,该等位基因nt721位由C转变为T,241位氨基酸由精氨酸转变为色氨酸,可导致糖基转移酶活性的降低,表明ABO基因的第241位氨基酸对决定糖基转移酶活性是至关重要的。
- 梁延连喻琼苏宇清吴国光
- 关键词：B亚型
- 6965名汉族骨髓供者HLA多态性分析被引量：103
- 2004年
- 目的 分析中国汉族骨髓供者的人类白细胞抗原 (HLA)多态性 ,并寻找和鉴定新的HLA等位基因。方法 采用序列特异性引物聚合酶链反应、DNA测序技术以及分子克隆等以DNA为基础的HLA基因分型技术。结果 共鉴定 6 96 5人份无关汉族骨髓供者的HLA A、B、DRB1座位上的等位基因 ,其中 4 70 7人份为南方汉族个体 ,2 2 5 8人份为北方汉族个体。在受检群体中共检出 72种HLA特异性 ,包括过去很少在汉族人群中被检测到的HLA A2 5、A34、A74、B4 1、B4 2、B5 3、B73、B81等。HLA A、B、DRB1座位上尚未被检测出的空白基因频率分别小于 0 .2 0 % ,0 .2 5 %和 0 .70 %。发现 3个新等位基因 ,已被WHO命名为HLA A 0 2 5 3N ,HLA A 1114和HLA B 5 6 10。结论 在骨髓供者HLA分型中使用以DNA为基础的基因分型技术 ,可以得到精确可靠的基因频率以及发现新的等位基因。一些HLA基因在南北汉族人群中的分布有明显的差异 ,为了能最大限度地募集到带有不同HLA分型的骨髓供者 。
- 吴国光邓志辉高素青程良红金士正周丹李桢邹红岩张旋魏天莉程曦王大明
- 关键词：骨髓组织相容性试验等位基因基因频率
- Ax新基因的序列分析及其家系的研究被引量：11
- 2006年
- 目的探讨Ax亚型中国汉族家系的ABO基因的分子生物学特点。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应扩增法对血清学定为Ax血型的家系总共5份样本做基因分型,对其中4份样本进行直接测序,发现2份有异常杂合序列,进一步采用单倍体特异性引物进行序列测定。结果这个家系中2份ABO基因序列与ABOA101相比有3个位点发生了突变(467C>T、829G>A,1009A>G),定为Ax新基因,Genbank注册号为DQ092380。结论829位突变导致编码ABO糖基转移酶的277位氨基酸由缬氨酸(Val)转变为甲硫氨酸(Met),很大程度上降低了A2糖基转移酶的活性。推测277位氨基酸处于ABO血型基因编码的转移酶的活性区域。
- 喻琼吴国光梁延连邓志辉苏宇清王大明
- 关键词：ABO血型系统序列特异性引物聚合酶链反应新基因家系ABO基因分子生物学特点ABO血型
- A_3等位基因的分子遗传分析被引量：9
- 2005年
- 为了研究血型血清学鉴定为A3型的 4例样本 ,其中 2例样本为一个家系 ,用血清学方法检定其 3例为A3型 ,1例为A3B型 ,通过PCR SSP与测序分析其Exon 6与Exon 7及部分内含子 ,与A10 1等位基因参比序列进行了比较。结果发现在 2例A3型样本中单倍体分别为常见的A10 2等位基因与O1- 2等位基因 ,1例A3样本中单倍体分别为常见的A10 2等位基因与少见的O1V - 4等位基因 ,1例A3B样本在A基因中发现 838C→T(Leu2 80Phe) ,此研究结果提示血清学表现为A3型的分子遗传背景存在多态性 ,A3B型的 838C→T可能是A3低转移酶活性的分子基础。
- 喻琼梁延连邓志辉吴国光苏宇清张旋程良红
- 关键词：分子遗传学分析
- 一个中国汉族ABO血型B亚型家系中发现新的B等位基因被引量：35
- 2005年
- 目的 研究中国汉族人群ABO血型中B亚型的分子遗传背景,发现并鉴定ABO新等位基因。方法 随机选择10个正常的B型志愿捐血者样本作对照,对6例血型血清学鉴定为B亚型的样本,采用序列特异性引物-聚合酶链反应方法、ABO基因第6及第7外显子PCR产物直接测序,进行基因定型;并对B等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果 2例血清学为Bx、BW的B亚型样本中,发现一个新的B等位基因。该等位基因与B1 0 1 等位基因相比,差异仅在第7外显子nt6 95位T>C突变。进一步对其中一个Bx 血型的个体进行家系调查,结果该家系的11人中,7人带有该新B等位基因。而其余的4例B亚型样本及10例对照样本,ABO基因的第6、7外显子未发现新的点突变。结论 首次发现6 95 T>C变异的新B等位基因,该等位基因nt6 95位由T转变为C,2 32位氨基酸由亮氨酸转变为脯氨酸,可导致糖基转移酶活性的降低,表明ABO基因的第2 32位氨基酸对决定糖基转移酶活性至关重要。
- 喻琼吴国光梁延连邓志辉苏宇清
- 关键词：ABO血型B亚型聚合酶链反应方法ABO基因序列特异性引物基因定型
- A放散型血型分子遗传结构的研究被引量：17
- 2006年
- 目的研究A放散型血型的分子生物学特性。方法对5例血清学定为Ael或AelB的个体,采用4对特异性引物进行PCR扩增后,对其ABO基因的第6、7外显子进行序列测定。且对其中1例表型为AelB样本的ABO基因转录结构进行序列分析。结果1例表型为Ael的样本含已报道的Ael01基因,1例表型为Ael的样本含Ael05基因,2例表型为AelB和1例表型为Ael的样本未测出任何A等位基因,而是含有261G缺乏的O01或O02基因。结论A放散型血型分子结构呈多样性,含261G缺失的O等位基因的样本有弱A抗原表达的机理有待说明。
- 喻琼吴国光梁延连邓志辉苏宇清王大明
- 关键词：ABO血型DNA序列
- 中国汉族人群A_2亚型分子遗传背景的研究被引量：23
- 2004年
- 目的 研究中国汉族人群ABO血型系统A2 亚型的分子遗传背景。方法采用PCR SSP法ABO基因分型试剂盒进行ABO常规基因定型。血清学确定为A2 亚型、PCR SSP法基因定型为A2 0 1或A1 0 2基因的 2 0例样本 ,对其ABO基因的第 6、第 7外显子进行DNA直接测序。结果① 2 6 0个随机的个体 ,经PCR SSP方法ABO基因定型试剂盒检测 ,检出O1、B、A1 0 1 (A4 6 7c)和A1 0 2 /1 0 3(A4 6 7T) 4种等位基因 ,但未检出A2等位基因。②采用血清学方法从 2 4 5 2例A或AB型随机献血者中筛检出的 2 0例A2 亚型样本 ,经PCR SSP基因定型 ,仅 5例为A2 0 1O1或A2 0 1B ,而其余 1 5例为A1 0 2O1或A1 0 2B。经DNA直接测序 ,结果 5例证实为A2 1 ,1 3例为A2 4 ,1例为A1 2 ,1例不能确定 ;A2等位基因中除 1 0 6 1C缺失外 ,还存在 4 6 7C >T、1 0 0 9A >G等点突变。结论中国汉族人群A2基因呈现多样性并存在自身特点 ,各A2等位基因的频率及分布与其它人群的资料存在差异 ,中国汉族人群A 2亚型中以A2 4等位基因 (4 6 7T、1 0 0 9G)
- 喻琼吴国光邓志辉苏宇清梁延连魏天莉
- 关键词：ABO血型DNA直接测序
- ABO血型系统中Aw基因分子遗传背景的研究与分析
- 2005年
- 目的:研究一个含有Aw亚型中国汉族家系的ABO基因的遗传机制。方法:对1例血型血清学鉴定为Aw亚型的样本及有关家系,采用PCR-SSP扩增、DNA测序方法,以A101一致序列进行比对,对其ABO等位基因的第6外显子、第6内含子及第7外显子进行基因克隆和单倍体测序分析。结果:血清学为Aw型样本中ABO基因序列与ABO*A101相比有两个位点发生了突变467C>T,543G>T),文献中未见报道,为一个新的A等(位基因,该样本的家系5人中,2人带有这个新变异的A等位基因。结论:543位突变倒致编码ABO糖基转移酶的156位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸Leu),大大降低了酶活性;这个位点对转移酶的活性(是至关重要的。
- 蓝欲晓孙革
- 关键词：ABO血型系统等位基因
