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人MMP-11原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11的构建及其融合蛋白的表达和纯化被引量：3: 2006年; 目的构建表达人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得人源性MMP-11融合蛋白。方法应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)从正常人子宫内膜组织扩增目的基因片段,利用体外基因重组技术将目的基因片段连接到原核表达载体pGEX-5X-3上构成重组的原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,并通过酶切和测序进行鉴定。将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α后挑选阳性克隆,用异丙基硫代半乳糖苷诱导其融合蛋白的表达并进行纯化。结果RT-PCR获得预期大小的特异性DNA片段,经双酶切鉴定及测序证实已将人基质金属蛋白酶-11N-端肽段的cDNA片段正确插入原核表达载体中。融合表达产物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,证实相对分子量大小为4550。结论成功构建了表达人MMP-11N-端肽段的重组原核表达载体pGEX-5X-3/MMP-11,获得相对分子量为4550的GST-MMP-11融合蛋白,为进一步制备抗人MMP-11抗体及其在临床中进一步推广应用于恶性肿瘤的快速诊断及临床疗效的评价奠定了基础。; 郑晶陆惠玲刘加军陈森吕德坚孙宏钰; 关键词：基因重组原核表达载体

月经血鉴定与基质金属蛋白酶-11被引量：3: 2006年; 月经血鉴定是法医血痕检验的内容之一。本文就月经血鉴定的几种经典方法进行回顾,并分析其应用局限性。基质金属蛋白酶-11是一种能降解细胞外基质的水解蛋白酶,有研究提示基质金属蛋白酶-11以其在月经血中表达的特异性和检测方法的灵敏性有可能成为对月经血鉴定的新一代标志物。本文对基质金属蛋白酶-11的结构、功能、在月经血鉴定中的应用及展望进行综述。; 郑晶陆惠玲陈森; 关键词：法医学

依据共有等位基因数判别叔侄关系被引量：4: 2012年; 【目的】建立基于共有等位基因数(A)的典型判别函数,并探讨其在叔侄鉴定中的应用。【方法】根据119对叔侄、119对无关个体的15个STR基因座的分型结果,计算每对个体的共有等位基因数(A)和叔侄指数(AI),进行统计学处理。【结果】共有等位基因数(A)在叔侄对和无关个体对中均符合正态分布。采用共有等位基因数(A)建立的典型判别函数=0.437A-5.268,判别叔侄和无关个体的平均准确率为80.7%;采用lg AI建立的典型判别函数=1.021 lg AI+0.051,平均准确率为82.8%,两者判别结果无统计学差异(P>0.05)。【结论】依据共有等位基因数建立的典型判别函数的判别效能与ITO法相近,且计算简便、易于掌握,可以应用于叔侄关系鉴定。; 章雅清陆惠玲陈维红吴鸿彬张敏红; 关键词：法医遗传学

增强化学发光法检测基质金属蛋白酶-11鉴定月经血被引量：1: 2012年; 目的探讨增强化学发光法检测人基质金属蛋白酶-11(matrix metalloproteinase-11,MMP-11)鉴定月经血的法医学应用价值。方法运用增强化学发光法检测月经血痕、阴道拭子、外周血痕、唾液斑、尿液斑和精液斑中的MMP-11,考察MMP-11的组织特异性、稳定性及检测方法的灵敏度。结果月经血痕中MMP-11蛋白的检测阳性率为89.47%,阴道拭子、外周血痕、唾液斑、尿液斑和精液斑中均未检出MMP-11。当上样量为25μL时,蛋白质量浓度为1.329μg/μL,可检出MMP-11。4℃放置20个月的MMP-11阳性的月经血痕,检测阳性率为89.58%。结论用增强化学发光法检测MMP-11蛋白的方法灵敏度高、特异性好,能用于月经血与外周血、阴道液等常见斑痕的鉴别。; 章雅清陆惠玲姚亚楠; 关键词：法医遗传学化学发光测定法

MMP-11多克隆抗体的制备及其法医学意义被引量：3: 2007年; 目的制备兔抗人基质金属蛋白酶-11(MMP-11)多克隆抗体,建立用MMP-11抗体检测月经血的可行方法,探讨其法医学意义。方法将用基因工程制备的人MMP-11融合蛋白免疫新西兰白兔,饱和硫酸铵法进行抗体纯化。运用蛋白印迹法检测月经血痕、外周血痕、阴道液斑、精液斑、唾液斑和尿液斑,盲测验证该方法的可靠性。结果高效价的兔抗人MMP-11多克隆抗体检测月经血MMP-11蛋白的阳性率为90.48%(93/105),而外周血痕、精液斑、唾液斑、尿液斑和阴道液斑均未检出MMP-11。结论用自制的抗MMP-11多克隆抗体所建立的蛋白印迹法检测月经血中的MMP-11特异性好,灵敏有效,可用于月经血及外周血的鉴别。; 姚亚楠陆惠玲陈森郑晶章雅清陈丽娴; 关键词：法医物证学多克隆抗体

免疫组织化学检测MMP-11鉴定月经血被引量：9: 2008年; 目的建立用自制兔抗人基质金属蛋白酶-11(matrix metalloproteinase-11,MMP-11)多克隆抗体鉴定月经血的免疫组化方法,探讨MMP-11蛋白酶的细胞定位。方法运用链霉卵白素-碱性磷酸酶(SAP)免疫组化法检测人月经血及外周静脉血涂片、阴道液涂片、子宫内膜石蜡切片和陈旧月经血痕涂片中的MMP-11。结果MMP-11存在于子宫内膜上皮细胞和间质细胞内;外周静脉血和阴道液涂片未见有MMP-11染色;陈旧月经血痕涂片罕见完整子宫内膜细胞,但能检测到微弱特异信号。结论用自制抗MMP-11多克隆抗体采用免疫组化技术能有效地检测MMP-11,区分月经血和静脉血。; 姚亚楠陆惠玲陈森郑晶章雅清; 关键词：免疫组织化学多克隆抗体

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