四川省应用基础研究计划项目(2008JY0014-1)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 相关机构：泸州医学院附属医院西南医科大学附属医院更多>>
- 发文基金：四川省应用基础研究计划项目四川省卫生厅科研基金更多>>
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- RNA干扰HeLa细胞IKCa1基因对中电导钙激活钾通道电流的影响
- 2016年
- 目的:本研究旨在探讨RNA干扰He La细胞IKCa1基因对中电导钙激活钾通道电流(IKCa1)的影响。方法:采用携带IKCa1基因的p Genesil-IKCa1质粒及p Genesil-HK对照质粒分别转染He La细胞。实验分为Control组(无质粒转染组),p Genesil-HK组和p Genesil-IKCa1组。在荧光显微镜下观察报告基因GFP在He La细胞中的表达情况并将GFP阳性率作为转染效率的评价指标,采用RT-PCR技术检测IKCa1基因的表达水平,应用膜片钳电生理技术记录IKCa1。结果:1 p GenesilHK组和p Genesil-IKCa1组转染率分别为75.3%和72.4%,两组之间阳性率差异无统计学意义(P>0.05);2 p Genesil-IKca1组IKCa1基因的m RNA表达水平明显低于Control组及p Genesil-HK组(P<0.01);3在He La细胞能记录到IKCal电流,该电流具有钙离子依赖性且能被Clotrimazole完全阻断,与Control组及p Genesil-HK组相比,p Genesil-IKCa1组的IKCa1电流电压曲线下移,钳制电压为+60 m V时电流密度为(10.05±3.37)p A/p F,明显低于Control组(21.78±5.54)p A/p F和p Genesil-HK组(20.54±5.29)p A/p F(P<0.01)。结论:通过RNA干扰能有效抑制宫颈癌He La细胞IKCa1电流,为今后开展以IKCal为靶点的宫颈癌的基因治疗提供新的靶点和电生理实验依据。
- 范凌晔汪春燕詹平刘玲聂丹毛熙光
- 关键词：RNA干扰膜片钳
- 中电导钙激活钾通道(IK_(Ca)通道)在HeLa细胞中的表达及其对细胞增殖的影响被引量：2
- 2015年
- 目的:本研究旨在探讨中电导钙激活钾通道(IKCa通道)在宫颈癌He La细胞中的表达及其对细胞增殖的作用。方法:以宫颈癌He La细胞株为研究对象,构建包含IKCa通道特异性sh RNA片段的p Genesil-IK质粒;运用荧光定量PCR和Western Blotting比较p Genesil-IK质粒转染干预前后宫颈癌He La细胞中IKCa通道基因和蛋白表达水平的变化;运用WST-1检测技术和流式细胞术观察转染干扰质粒后对He La细胞增殖的影响。结果:1转染p Genesil-IK干扰质粒后He La细胞IKCa通道m RNA及蛋白表达水平较对照组显著降低(P<0.05)。2转染p Genesil-IK1干扰质粒显著抑制He La细胞增殖和细胞周期(P<0.05)。结论 :宫颈癌He La细胞上有较高的IKCa通道表达,抑制宫颈癌He La细胞株IKCa通道表达能有效抑制癌细胞增殖,提示IKCa通道可能是宫颈癌的治疗靶点之一。
- 范凌晔石磊詹平刘玲聂丹毛熙光
- 关键词：RNA干扰细胞增殖
- 阻断钙激活钾通道对宫颈癌细胞增殖及钾通道电流的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察钙激活性中电导钾离子通道(IKCa1)被阻断后对宫颈癌He La细胞增殖及IKCa1膜电位的影响。方法分别用IKCa1阻断剂克霉唑和RNA干扰法阻断He La细胞的IKCa1后,用RT-PCR技术检测He La细胞的IKCal mRNA,MTT法检测细胞OD值,膜片钳技术检测细胞IKCa1电流。结果克霉唑阻断IKCa1后,He La细胞的IKCa1 mRNA表达降低、IKCa1电流减弱、细胞OD值下降,与对照组相比,P均<0.05。RNA干扰法阻断IKCa1后,Hela细胞的IKCa1 mRNA表达下降、IKCa1电流减弱、细胞OD值降低,与空白对照组和阴性转染组相比,P均<0.05。结论阻断IKCa1能有效抑制He La细胞增殖,下调细胞IKCa1 mRNA的表达,降低其IKCa1电流;IKCa1通过调控He La细胞膜电位而影响其信号传递,调控He La细胞的增殖。
- 刘玲聂丹范凌晔詹平钱燕萍毛熙光
- 关键词：离子通道钾离子通道克霉唑
