博士科研启动基金(SWUB2006)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体的制备及特性被引量：4
- 2012年
- 采用PEG沉淀结合Sepharose-4B柱层析法分离纯化了健康非免疫状态下南方鲇血清免疫球蛋白,在SDS-PAGE电泳条件下血清免疫球蛋白重链和轻链的分子量分别约为77 kD和27 kD。应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了4个南方鲇免疫球蛋白特异性的单克隆抗体细胞株,并对这些单克隆抗体的特性进行了分析。经抗体亚级份测定,其中IgG1有2株,IgG2a有1株,IgG2b有1株;抗体滴度为104—106,有三株单抗具有Western-blot反应特性,识别南方鲇免疫球蛋白的重链。4株单抗都能特异地识别南方鲇、鲇的免疫球蛋白,而与鲫、草鱼、罗非鱼、斑点叉尾、光泽黄颡鱼血清以及水产动物常见病原菌如气单胞菌、爱德华氏菌、弧菌、柱状屈桡杆菌、沙门氏菌及大肠杆菌等无任何交叉反应。单克隆抗体F4-A12对纯化的南方鲇免疫球蛋白的检测灵敏度为31 ng。实验结果证明这些单抗具有高度特异、高度灵敏等特点,可用于南方鲇免疫球蛋白的结构分析、免疫应答水平监测和病原诊断,具有广阔的应用前景。
- 张小萍魏静邱艳
- 关键词：南方鲇免疫球蛋白单克隆抗体
- 优球蛋白法纯化南方鮎血清免疫球蛋白及多克隆抗体制备
- 2011年
- 采用优球蛋白法和Sepharose-4B柱层析纯化南方鮎血清免疫球蛋白,SDS-PAGE结果表明,重链相对分子质量约为7.4×104,轻链相对分子质量约为2.6×104;用纯化蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA测定多克隆抗体效价高达1∶216;Western-blotting结果显示多克隆抗体与免疫球蛋白重链和轻链都有反应,与不同科的沟鮎血清和不同目的草鱼血清无交叉反应.利用优球蛋白法和Sepharose-4B柱层析首次纯化南方鮎血清免疫球蛋白,与Sepharose-4B柱层析相比优球蛋白法更简单、快速;制备的多克隆抗体具有特异性,可做为以后进一步研究南方鮎的免疫系统和免疫防治的工具.
- 邱艳张小萍魏静梁筱燕
- 关键词：免疫球蛋白
