国家自然科学基金(30671735)
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
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- 苯并(a)芘对H1299细胞CYP1A1酶活力和相关基因表达的影响被引量：6
- 2010年
- 目的研究BaP对人肺腺癌细胞(H1299)CYP1A1酶活力和CYP1A1及其相关基因表达的影响。方法用不同浓度BaP(8、16、32、64和128μmol/L)处理H1299细胞24 h。实时荧光定量PCR方法检测H1299细胞中CYP1A1、HSP90、AhR和ARNT基因的mRNA表达水平;表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)检测CYP1A1和HSP90蛋白表达水平;荧光分光光度法测定CYP1A1酶活力(7-ethoxyresorufin-o-deethylase,EROD)。结果与溶剂对照组相比,CYP1A1和ARNT基因mRNA水平在BaP为16和64μmol/L时有统计学意义(P<0.01),AhR和HSP90在各染毒组中均有统计学意义(P<0.05)。在16、32和64μmol/L的BaP染毒组中,CYP1A1和HSP90蛋白水平高于对照组。在16、32、64和128μmol/L的BaP染毒组中均可诱导CYP1A1酶活力显著性增强(P<0.01)。结论该试验条件下,在H1299细胞,BaP可通过诱导CYP1A1与其上游转录因子AhR和ARNT的mRNA以及蛋白表达而增强CYP1A1酶活力。
- 姜英陈曦饶凯敏杨光涛汪倩刘爱林袁晶
- 关键词：苯并(A)芘CYP1A1AHRARNT
- p63和p73的表达与苯并(a)芘致H1299和16HBE细胞DNA损伤的关系被引量：4
- 2009年
- 背景与目的:研究p63与p73的mRNA表达与BaP致人肺腺癌细胞(H1299)和人支气管上皮细胞(16HBE)DNA损伤的关系。材料与方法:分别用不同浓度BaP(8、16、32、64和128μmol/L)处理H1299和16HBE两种细胞,在4 h和12 h时,使用相应的生化检测试剂盒分别测定细胞裂解液中MDA的水平和SOD、GSH-Px的活性,用qRT-PCR方法测定处理后细胞的p53、p63、p73、mdm2和mdm4的mRNA水平;用Comet实验评价细胞DNA损伤程度。结果:16、32和64μmol/L BaP处理4 h时,两种细胞MDA水平显著性升高,SOD和GSH-Px活性显著性下降(P<0.05)。用BaP处理H1299和16HBE细胞4 h和12 h时均观察到DNA损伤随浓度增加而加重,且呈剂量-效应关系(P<0.01),mdm2、mdm4mRNA表达水平升高(P<0.01)。不过仅在12 h时p53基因mRNA表达水平较对照组显著增加(P<0.01)。在4 h和12 h时点,仅在H1299细胞的p63和p73mRNA表达增加(P<0.05)。结论:在BaP致p53缺失的H1299细胞的DNA损伤中,BaP可能通过不依赖p53信号通路激活了p63和p73 mRNA的表达。
- 姜英饶凯敏陈曦汪倩刘爱林袁晶
- 关键词：苯并(A)芘P63基因P73基因
- p73在苯并(a)芘致人肺纤维细胞株MRC-5和人肺腺癌细胞株H1299(p53-null)周期阻滞中的作用
- 2009年
- 目的研究p73在苯并(a)芘[B(a)P]致人肺纤维细胞株MRC-5和人肺腺癌细胞株H1299(p53-null)周期阻滞中的作用。方法采用0(溶剂对照)、8、16、32、64和128μmol/L的B(a)P分别处理处于对数生长期的MRC-5和H1299细胞24h。采用MTT比色法检测两种细胞系的生长率,采用流式细胞术检测细胞周期各时相的细胞百分比,采用实时荧光定量PCR方法测定p53、p73、p21和Gadd45的mRNA表达水平。结果与溶剂对照组比较,8、16、32、64μmol/LB(a)P染毒组MRC-5细胞和H1299细胞的增殖活性均升高,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。16μmol/LB(a)P染毒组MRC-5细胞和32μmol/LB(a)P染毒组H1299细胞的增殖活性达到峰值,与溶剂对照组相比,分别增加了40%和30%。与溶剂对照组比较,8、16、32、64和128μmol/L的B(a)P染毒组MRC-5细胞的p53、p73和p21基因mRNA表达水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),细胞阻滞在G1期。与溶剂对照组比较,8μmol/L的B(a)P染毒组H1299细胞p73和p21基因mRNA表达的表达水平上升,差异均有统计学意义(P<0.05),细胞阻滞在G1期;但各处理组Gadd45基因的mRNA表达水平间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论一定浓度B(a)P可通过p53介导引起MRC-5细胞周期G1期阻滞,而对于p53缺失的H1299细胞,其细胞周期G1期阻滞可能依赖于p73参与的细胞信号通路的调节。
- 饶凯敏姜英陈曦杨光涛汪倩刘爱林袁晶
- 关键词：苯并(A)芘P73基因
