国家自然科学基金(30671736)
- 作品数：11 被引量：35H指数：5
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- 双酚A对大鼠未成年Leydig细胞睾酮合成的影响及机制被引量：3
- 2011年
- 目的观察双酚A(bisphenol A,BPA)对大鼠未成年Leydig细胞睾酮合成的影响,探讨糖皮质激素受体(GR)、11β羟类固醇脱氢酶(11β-HSD)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)蛋白表达的改变及意义。方法雄性SD大鼠24只,随机均分成4组:正常对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组。低剂量组、中剂量组及高剂量组予出生后第21天起分别给予不同剂量[(2.4μg/(kg.d)、1mg/(kg.d)、200mg/(kg.d)]的双酚A灌胃至出生后第35天。正常对照组给予等容积的玉米油灌胃。实验结束时处死大鼠,测量大鼠体重、睾丸重量,光镜及电镜下观察睾丸Leydig细胞的形态学改变,酶联免疫吸附测定法检测血清睾酮浓度,Western-blotting法检测睾丸Leydig细胞GR、11β-HSD及StAR的蛋白表达。结果高剂量组Leydig细胞线粒体肿胀明显。低剂量组大鼠血清睾酮下降(P<0.05)。低剂量组大鼠睾丸Leydig细胞GR蛋白表达升高(P<0.05),中剂量和高剂量组大鼠睾丸Leydig细胞GR蛋白表达明显降低(P<0.01),高剂量组大鼠睾丸Leydig细胞11β-HSD蛋白及StAR蛋白表达降低(P<0.05)。结论双酚A可以干扰大鼠未成年Leydig细胞的睾酮合成,GR、11β-HSD及StAR的蛋白表达改变可能是其重要机制。
- 张虎祥张海燕陈祥义廖鸿力董磊吴亮陈国荣
- 关键词：双酚ALEYDIG细胞睾酮糖皮质激素受体
- DEHP对宫内仔鼠睾酮水平、IGF-1和StAR mRNA表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨不同剂量的邻苯二甲酸二(乙基)己酯(DEHP)对宫内期仔鼠睾酮水平及胰岛素样生长因子1(IGF-1)、类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)基因表达的影响。方法雌性S-D大鼠24只,随机均分为4组:正常组、低剂量组、中剂量组和高剂量组。后三组给予不同剂量的DEHP灌胃,剂量分别为(1 0mg/kg·d^(-1))、(1 00mg/kg·d^(-1))、和(750mg/kg·d^(-1)),时间自雌鼠怀孕后第一天开始至仔鼠出生后第一天止。正常组给予等剂量的玉米油。测量各组雄仔出生时肛门生殖器距离(AGD)和血清睾酮(T)水平;并用光镜和电镜观察仔鼠睾丸Leydig细胞形态学改变;Real-timePCR检测睾丸组织中IGF-1和StARmRNA表达水平。结果与正常组比较,高剂量组AGD明显缩短,中剂量组AGD呈下降趋势;低剂量组T水平升高、中高剂量组T水平降低;低、中、高剂量组StARmRNA表达下降;低剂量组IGF-1mRNA表达升高,中、高剂量组表达下降。光镜下见随着剂量的升高,睾丸Leydig细胞聚集越明显,高剂量组Leydig细胞呈瘤样聚集;电镜下见低剂量组Leydig细胞线粒体和滑面内质网增多,中、高剂量组均减少,并见脂滴增加。结论 DEHP可以影响宫内仔鼠睾酮的合成,不同剂量具有不同的效应,其机制可能与DEHP影响IGF-1和StARmRNA表达有关。
- 吴亮王蓉蓉苏志涛陈祥义王环陈国荣
- 关键词：仔鼠睾酮莱迪希细胞
- 邻苯二甲酸酯染毒哺乳期母鼠对雄性仔鼠睾丸Leydig细胞形态及功能的影响被引量：5
- 2015年
- 目的:观察邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对哺乳期雄性仔鼠睾丸子Leydig细胞(PLC)形态和功能的影响及作用机制。方法:SD孕鼠20只,随机均分为4组(n=5):正常对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量组。仔鼠出生第1天起分别以0、10、100、750 mg/(kg·d)DEHP灌胃染毒母鼠,直到仔鼠出生后21 d。用化学发光法检测雄性仔鼠血清睾酮(T)水平;测量体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD);光镜及电镜下观察睾丸Leydig细胞形态结构;免疫组化方法检测睾丸类固醇激素合成急性调节蛋白(St AR)表达;Real-time PCR法检测睾丸胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF-Ⅰ)mRNA的表达。结果:与正常组比较,低剂量组T无明显变化,中、高剂量组血清T水平明显降低(P<0.01)。低剂量组睾丸重量增加(P<0.05),高剂量组睾丸重量、仔鼠体重明显下降(P<0.01);中、高剂量组AGD明显缩短(P<0.01)。低剂量组睾丸Leydig细胞明显增生,呈簇状分布;中、高剂量组睾丸Leydig细胞灶区轻度增生,高剂量组部分生精小管生精细胞层次减少、生精细胞凋亡并脱落。电镜观察各给药组Leydig细胞胞浆脂质颗粒减少,线粒体、内质网减少。低剂量组IGF-ⅠmRNA表达增高(P<0.05);中、高剂量组睾丸St AR蛋白表达降低(P<0.05)。结论:哺乳期染毒DEHP可干扰仔鼠PLC的睾酮合成,St AR蛋白的降低和Leydig细胞的损伤可能是其机制。
- 陈涵斌马骏李慧敏牛三强陈显武陈国荣陈三妹王蓉蓉
- 关键词：LEYDIG细胞仔鼠
- 双酚A对大鼠未成熟Leydig细胞类固醇代谢关键酶基因表达的影响被引量：1
- 2013年
- 目的:观察双酚A(bisphenol A,BPA)对大鼠未成熟Leydig细胞睾酮合成及类固醇代谢关键酶表达水平的影响。方法:出生后第21天雄性SD大鼠24只,随机均分成4组:对照组、低剂量组(2.4μg/kg)、中剂量组(1 mg/kg)、高剂量组(200 mg/kg)。实验组每天分别给予不同剂量的BPA灌胃,对照组给予等容积的玉米油灌胃。第35天腹主动脉取血处死大鼠,光镜、透射电镜下观察睾丸Leydig细胞的形态及超微结构的改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测大鼠血清睾酮浓度;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)、3β-羟甾脱氢酶(3β-HSD)、17β-羟甾脱氢酶(17β-HSD)、细胞色素P450侧链裂解酶(P450scc)、细胞色素P45017α-羟化酶(P450c17)和细胞色素P450芳香酶(P450arom)mRNA的表达。结果:低剂量组大鼠血清睾酮浓度下降(P<0.05),睾丸组织P450scc及3β-HSD mRNA的表达下降(P<0.05);中剂量组大鼠血清睾酮维持正常水平,各关键酶mRNA表达未见明显改变;高剂量组大鼠血清睾酮维持正常水平,睾丸Leydig细胞线粒体肿胀明显、线粒体嵴排列紊乱,睾丸组织StAR及17β-HSD mRNA的表达下降(P<0.05),而3β-HSD mRNA的表达升高(P<0.05)。各组大鼠睾丸Leydig细胞光镜下形态均未见明显异常。结论:BPA可能通过Leydig细胞线粒体损伤及类固醇代谢关键酶的变化影响大鼠未成熟Leydig细胞的睾酮合成。
- 姬秀焕鲍方尹晓娜陈玲苏志涛王蓉蓉董磊陈国荣陈三妹
- 关键词：双酚ALEYDIG细胞关键酶逆转录-聚合酶链反应
- 双酚A对SD仔鼠睾丸形态学、CD117及波形蛋白表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察不同剂量双酚A(bisphenol A,BPA)暴露下的21日龄SD仔鼠一般发育参数,睾丸形态学变化及相关蛋白的表达,以探讨妊娠期及哺乳期BPA持续暴露对仔鼠睾丸发育的影响。方法对40只孕鼠持续饲服双酚A饲料,按每组10只随机分为低、中、高剂量组[10、50、100mg/(kg.d)]及对照组。记录分娩后第21天雄性仔鼠发育参数,对所取睾丸标本进行光镜及电镜形态学观察,免疫组化检测睾丸曲细精管上皮CD117和波形蛋白(vimentin)的表达。结果实验组低、中、高BPA剂量组雄性仔鼠体重及睾丸重量呈逐渐下降趋势,显著低于对照组(P均<0.05)。光镜及电镜形态学观察提示实验组睾丸曲细精管及精原细胞均出现受损改变。低、中、高BPA剂量组睾丸精原细胞和支持细胞相关蛋白表达逐渐下降,与对照组比较有统计学意义(P<0.05、P<0.01和P﹤0.01)。结论妊娠期及哺乳期BPA染毒对雄性仔鼠睾丸发育具有一定毒性作用,可能导致睾丸精原细胞发生质和量的变化。此外,精原细胞与支持细胞间的联系受到干扰也许是BPA对睾丸毒性的重要因素。
- 肖维华马海芬李君强陈国荣
- 关键词：双酚A精原细胞CD117波形蛋白
- DEHP对新生雄性仔鼠毒性作用的实验研究被引量：5
- 2012年
- 目的探讨邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对新生雄性仔鼠毒性作用及机制。方法 DEHP分别以低、中、高3组剂量[10、100、750mg/(kg.d)]灌胃作用于怀孕12天到产后21天(GD12～PND21)的SD母鼠,观察DEHP对产后1天(PND1)及产后21天(PND21)雄性仔鼠体重、睾丸重量、肛生殖器距离(AGD)和其对胚胎Leydig细胞形态结构、促黄体生成素受体(LHR)及类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)的蛋白表达水平的影响。结果 PND1中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比较均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比较有显著性差异(P<0.05);中、高剂量组雄仔鼠的AGD均有不同程度缩短,与对照组和低剂量组相比缩短均有显著性差异(P<0.01)。PND21中、高剂量组雄仔鼠的体重下降明显,分别与对照组和低剂量组相比均有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸重量下降明显,与对照组相比有显著性差异(P<0.01);中、高剂量组雄仔鼠的AGD缩短明显,分别与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。光镜下低剂量组可见胚胎Leydig细胞(FLC)聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见胚胎Leydig细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组Leydig细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组Leydig细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞质丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。中、高剂量组睾丸FLC的LHR蛋白表达明显减弱,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);高剂量组睾丸FLC的StAR蛋白表达减弱明显,与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论 DEHP对新生雄性仔鼠具有毒性作用,其可能机制是DEHP宫内暴露后,抑制睾丸FLC的LHR蛋白和StAR蛋白的表达从而影响睾丸的发育。
- 郑海红陈祥义陈玲吴亮陈三妹方周溪葛仁山陈国荣
- 邻苯二甲酸二乙基己基酯对胎鼠肺发育的抑制作用被引量：5
- 2011年
- 目的探讨孕大鼠染毒邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对胎鼠肺发育的抑制作用及其可能机制。方法 Sprague-Dawley大鼠受孕后第12天每天ig给予DEHP0,10,100和750mg.kg-1,至自然分娩。第1天每窝随机取自然分娩仔鼠3只,测定体质量;光镜观察肺组织病理学改变及测定辐射状肺泡计数(RAC)和肺间质比例,免疫组化法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果与正常对照组相比,DEHP组仔鼠体质量明显下降(P<0.01)。光镜下仅DEHP750mg.kg-1组可见肺间质增厚,间质细胞增多,肺泡数目减少,RAC减小,肺间质比例增大(P<0.05)。与正常对照组比较,DEHP组VEGF表达差异无统计学意义;DEHP10,100和750mg.kg-1组MMP-2表达和MMP-2/TIMP-2值明显高于正常对照组〔MMP-2分别为0.099±0.009,0.124±0.008,0.140±0.010vs0.091±0.011(P<0.01);MMP-2/TIMP-2分别为1.079±0.074,1.447±0.077,1.704±0.084vs0.994±0.079(P<0.01)〕。结论孕鼠染毒DEHP后对胚胎生长和肺发育有抑制作用。DEHP抑制胎鼠肺发育的机制可能与MMP-2的过度表达以及MMP-2/TIMP-2平衡失调有关。
- 高原陈金妮陈尚勤蔡晓红陈国荣林振浪
- 关键词：肺发育基质金属蛋白酶-2基质金属蛋白酶组织抑制剂-2血管内皮生长因子
- 邻苯二甲酸二乙基己基酯对子代大鼠肺损伤的作用及其机制
- 2013年
- 目的:研究邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对出生后第21天(PND21)子代大鼠肺脏的损伤作用及其机制。方法:受孕SD大鼠24只,随机均分为正常对照(NC)组、低剂量染毒(L)组、中剂量染毒(M)组和高剂量染毒(H)组,从怀孕第1天至产后PND21,每天给予不同剂量DEHP(0、10、100、750 mg·kg-1·d-1)母鼠灌胃。获取PND21子代大鼠肺泡巨噬细胞(AM)并培养。分别测定AM内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性;Masson染色及光镜、电镜观察肺组织病理学改变;免疫组化和RT-PCR检测肺组织骨桥蛋白(OPN)及其基因表达。结果:H组肺泡隔增厚,肺间质细胞增多,肺泡数目减少;M、H组肺细小动脉以及肺间质胶原纤维沉积较NC组增多,以H组最为显著;超微结构显示M、H组肺泡II型上皮细胞核固缩,板层小体空泡化,线粒体肿胀、变圆,嵴变短;M、H组AM内SOD和GSH-PX酶活性明显低于NC组(P<0.05);M、H组OPN及其mRNA表达较NC组显著上调(P<0.05),L组与NC组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:DEHP对PND21子代大鼠肺损伤主要表现为肺间质纤维化,肺泡II型上皮细胞损伤、AM抗氧化能力的下降及OPN的表达升高可能是其机制。
- 林刻智卢清艺林中民黄卡特余帅帅陈国荣
- 关键词：巨噬细胞骨桥蛋白肺泡II型上皮细胞肺损伤
- DEHP对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞雄激素合成的影响被引量：6
- 2010年
- 目的:研究邻苯二甲酸二乙基己基酯(DEHP)对雄性仔鼠胚胎Leydig细胞(FLC)雄激素合成的影响。方法:DEHP分别以低、中、高3组剂量(10、100、750 mg.kg-1.d-1)灌胃作用于怀孕12 d到产后1 d(GD12-PND1)的SD母鼠,观察DEHP对雄仔鼠血清睾酮(T)水平、睾丸FLC形态结构、睾丸FLC的类固醇激素合成急性调节蛋白(StAR)及胰岛素样生长因子1(IGF-I)mRNA的相对表达量(ΔΔCT法)。结果:低剂量组血清T水平显著高于对照组(P<0.01);而中、高剂量组血清T水平显著低于对照组(P<0.05)。光镜下低剂量组可见间质细胞聚集呈簇分布,中剂量组与高剂量组均可见间质细胞呈瘤样增生。电镜示低剂量组间质细胞椭圆形、长梭形,脂质颗粒减少,线粒体、滑面内质网丰富。中、高剂量组间质细胞呈梭形或椭圆形,大小不一,核大、圆,胞浆丰富,细胞聚集一起,胞质内可见丰富的脂质颗粒,脂质颗粒染色深,滑面内质网及线粒体扩张。高剂量组睾丸FLC的StAR mRNA的相对含量显著低于对照组(P<0.01)。低剂量组睾丸FLC的IGF-Ⅰ mRNA相对含量显著高于对照组(P<0.01)。结论:DEHP对新生雄性仔鼠睾丸FLC有毒性作用,可影响雄性仔鼠睾丸FLC的形态学及其生成类固醇的能力。其可能机制是低剂量DEHP宫内暴露后,促进睾丸FLC的IGF-ⅠmRNA表达从而引起血清睾酮升高,而高剂量DEHP可能通过抑制睾丸FLC StAR mRNA表达从而降低血清睾酮水平。
- 郑海红王维维王晓雅吴亮方周溪葛仁山陈国荣
- 关键词：睾酮
- 17染色体微卫星多态与原发性高血压关系的多因素分析
- 2008年
- 目的 探索D17S1878和D17S932位点多态性是否与原发性高血压存在关联。方法 在高血压高发区收集67个原发性高血压家系的流行病学资料，应用遗传分析仪分析D17S1878、D17S932位点的多态性，进行表型不一致家系同胞的病例对照研究，应用logistic回归方法进行多因素分析。结果 高血压受累同胞与非高血压受累同胞相比，年龄、男性、饮酒、平均收缩压、平均舒张压、BMI、总胆固醇、HI）L—C、LDL—C均显著高于非高血压受累同胞（P〈0．05）。D17S1878多态性位点共有11个等位基因，其等位基因频率在家系高血压者与非高血压者的分布，经Fisher’s确切检验差异具有统计学意义（P=0．017）。D17S932多态性位点共有9个等位基因，其等位基因频率在家系高血压者与非高血压者的分布，经Fisher’s确切检验差异无统计学意义（P=0．559）。logistic多因素分析结果显示，两个位点均没有进入模型，而年龄（0R=1．044，95％CI：1．019～1．069）、饮酒（OR=2．644，95％CI：1．778～3．932）、性格急躁（OR=3．078，95％CI：1．721～5．504）、甘油三酯（OR=1．305，95％CI：1．016～1．676）、LDL—C（OR：1．787，95％CI：1．296～2．646）进入模型，是原发性高血压的危险因素。结论 在原发性高血压家系中，D17S1878、D17S932多态性位点可能与原发性高血压无关联。
- 付凌雨赵彦艳时景璞李春义刘洪周波
- 关键词：原发性高血压微卫星多态遗传易感性
