上海市科委中药现代化专项基金(07DZ19724)
- 作品数：3 被引量：18H指数：3
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- 产紫杉醇内生真菌EFY-21的鉴定与生物学特性研究被引量：10
- 2010年
- 利用PCR技术克隆了产紫杉醇内生真菌EFY-21的18S rDNA序列,通过同源性分析,初步确定该菌与拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)有较高的同源性,相似性为99%。为了进一步了解EFY-21的有关生物学特性,分别选用PDA、PSA、查氏、玉米粉琼胶、牛肉膏蛋白胨5种培养基,按照常规方法培养,用十字法测量菌落直径;同时选用查氏培养基为基本培养基,分别观察不同碳源葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、果糖、可溶性淀粉,不同氮源KNO3、Ca(N03)2、(NH4)2SO4、NH4N03、(NH4)2HPO4、蛋白胨、尿素,不同培养温度10,15,20,25,28,30,37℃,不同pH值4,5,6,7,8,9对内生真菌菌丝的影响。试验结果表明:EFY-21在PDA培养基上生长最快,生长状况最好;供试的碳氮源中,对EFY-21菌丝生长影响的大小顺序为葡萄糖>甘露醇>果糖>麦芽糖>可溶性淀粉;蛋白胨>KNO3>Ca(N03)2>NH4N03>(NH4)2HPO4>(NH4)2SO4>尿素;最适培养温度为25～30℃;最适pH为5～7。
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- 关键词：紫杉醇内生真菌RDNA生物学特性
- 三种红豆杉属植物中紫杉烷类化合物含量的检测与分析被引量：4
- 2010年
- 优化色谱条件,利用高效液相对天然生长的南方红豆杉、中国红豆杉和东北红豆杉枝条中的3种紫杉烷类物质含量进行了检测和分析。结果表明:3种红豆杉中,紫杉烷类化合物总含量的高低依次为:东北红豆杉为0.427mg·g-1、南方红豆杉为0.396mg·g-1、中国红豆杉为0.350mg·g-1;紫杉醇含量的高低依次为:南方红豆杉为0.153mg·g-1、东北红豆杉为0.142mg·g-1、中国红豆杉为0.0102mg·g-1。该方法把3种紫杉烷类化合物:10-脱乙酰巴卡亭III(10-deacetyl-baccatinIII)、巴卡亭III(baccatinIII)和紫杉醇(Taxol)置于同一色谱条件下检测,以比较不同种类紫杉烷类化合物的含量,为红豆杉资源的开发和利用奠定了基础。
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- 关键词：红豆杉紫杉烷类化合物高效液相色谱
- 一株产巴卡亭Ⅲ红豆杉内生真菌的分离与鉴定被引量：4
- 2010年
- [目的]分离鉴定产巴卡亭Ⅲ红豆杉内生真菌。[方法]采用常规分离方法,从东北红豆杉(TaxuscuspidataSieb.etZucc.)树皮中分离并筛选内生真菌35株;通过高效液相色谱(HPLC)技术对菌株发酵物进行检测,并结合选择性离子质谱(MS)进行确认,从中获得1株能产紫杉醇前体物质巴卡亭Ⅲ的菌株Z-1;利用ITSrDNA通用引物对产紫杉烷类物质的内生真菌进行分子生物学鉴定,并结合菌落特征、孢子与分生孢子梗的形态特征进行分类鉴定。[结果]在未经诱导的情况下,Z-1产巴卡亭Ⅲ的量约为39μg/L;形态和分子鉴定分析判定Z-1属于木霉属(Trichoderma sp.)真菌。[结论]该研究可为植物内生真菌产紫杉烷类化合物的种类多样性和产紫杉烷类内生真菌的生物多样性提供依据。
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- 关键词：木霉属ITS高效液相色谱质谱
