国家自然科学基金(81070198)
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
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- 心力衰竭实验动物模型构建方法研究被引量：6
- 2013年
- 心力衰竭是各种心脏疾病致心功能不全的临床综合征，也是大多数心血管疾病的最终归宿。目前全球心力衰竭患者的数量已高达2250万，并且以每年200万的速度快速递增，在70～80岁的老年人群中，患病率更是高达10％～20％，且5年存活率与恶性肿瘤相仿。另外，据美国最新的调查数据显示，仅于2011年间，用于心力衰竭的医疗费用就高达190亿美元。心力衰竭的高患病率和高死亡率已使它成为一个全球性难题。
- 刘宝辉李明凯罗晓星俞世强
- 关键词：心力衰竭动物模型心肌收缩力
- 褪黑素对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及其机制被引量：1
- 2013年
- 目的:研究不同浓度褪黑素(melatonin,MLT)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力的影响,以及对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及机制。方法:分别用不同浓度(125、250、500μmol/L)的MLT处理体外培养的HUVECs 2 h、4 h和6 h后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的MLT对HUVECs存活率的影响。以300μmol/L的H2O2建立HUVECs损伤模型,用125、250、500μmol/L的MLT与H2O2(300μmol/L)共同处理HU-VECs 2 h、4 h和6 h后,分别用噻唑蓝(MTT)比色法测细胞的存活率、细胞黏附实验评价细胞黏附能力、酶活性测定法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力。用Griess法测定细胞培养液中NO2-的浓度来反映HUVECs的一氧化氮(NO)释放量。结果:以不同浓度的MLT处理内皮细胞2 h、4 h和6 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异。MLT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率、黏附能力及细胞内SOD的活力(P<0.01),增加培养液中NO含量(P<0.01),降低内皮细胞LDH的释放(P<0.01)。以500μmol/L的MLT效果最明显。结论:不同浓度的MLT对HUVECs的存活率均无影响,提示MLT药物浓度的安全范围较大。MLT对H2O2诱导HUVECs损伤的拮抗作用可能与其抗氧化能力和促进内皮细胞合成NO有关。
- 梁振兴杨阳金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：褪黑素人脐静脉内皮细胞乳酸脱氢酶
- 酪氨酸激酶抑制剂AG490抗过氧化氢对血管内皮细胞的保护作用及其机制被引量：2
- 2014年
- 目的探讨酪氨酸激酶（JAK）抑制剂AG490对血管内皮细胞抗过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及其机制。方法分别用不同浓度H2O2（100、200、400μmol/L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）2、4、6h，噻唑蓝（MTT）法测定内皮细胞活力；H2O2（400μmol/L）建立HUVECs损伤模型，实验分4组：对照组、H：O：组、H：02＋AG490（20p,mol／L）组、AG490（20μmol/L）组。各组细胞处理4h，MTr法检测各组细胞存活率；原位末端转移酶标记（TUNEL）法测定各组细胞凋亡率；Westernblot法检测各组细胞中磷酸化酪氨酸蛋白激酶2（p-JAK2）、磷酸化信号传导与转录激活因子-3（p-STAT3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关x蛋白（bax）和B细胞淋巴瘤／白血病-2（bcl-2）的表达。结果经不同浓度的H，O：（100、200、400μmol/L）处理内皮细胞2、4、6h后，内皮细胞的存活率明显降低（P〈0．01）；AG490能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率，降低细胞凋亡率（存活率H202组：0．637±0．030、H202＋AG20μmoL/I。组：0．847±0．030；凋亡率H202组：59．1044-1．572、H202＋AG20μmol/L组：36．454±1．403，P〈0．01）；经AG490和H202共处理的内皮细胞与H：O：损伤组比较，p-JAK2和p-STAT3的表达显著降低（P〈0．01）；凋亡相关蛋白bax的表达显著降低，但是抗凋亡蛋白bel-2的表达显著升高（P〈0．01）。结论AG490对内皮细胞抗过氧化氢损伤有保护作用，其抗氧化能力可能和抑制JAK2/STAT3信号通路及抗凋亡有关。
- 梁振兴杨阳金振晓易定华段维勋陈文生
- 关键词：脐静脉内皮细胞
- 褪黑素减轻心肌缺血/再灌注损伤的作用及机制被引量：5
- 2015年
- 目的：探讨褪黑素（melatonin，Mel）在大鼠心肌缺St／再灌注（MI／R）损伤中的拮抗作用及其机制。方法：80只体质量200—250g雄性SD大鼠随机分为4组：假手术（Sham）组、溶剂对照（MI／R＋V）组、Mel治疗（MI／R＋Mel）组、Mel＋EX527（MI／R＋Mel＋EX）组。常规结扎左冠状动脉前降支行心肌缺St／再灌注手术，缺血30rain，再灌72h后超声心动图法检测各组大鼠心功能，再灌6h后ELISA法检测血清酶学指标，TUNEL法检测心肌细胞凋亡率，Evansblue-TIC双染法测定梗死面积，Westernblot法检测沉默信息转录调控因子1（SIRT1）、乙酰化叉头转录因子1（Ac-Fox01）及凋亡相关蛋白表达水平。结果：Mel治疗可显著改善MIVR损伤后心功能，降低血清肌酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）水平，降低凋亡率及梗死面积，上调SIRT1表达，下调Ac-Foxol水平，降低凋亡相关蛋白表达。而使用EX527阻断SIRT1信号后逆转Mel的上述作用（均P〈0．01）。结论：Mel可发挥抗凋亡作用减轻MI／R损伤并改善心功能，其作用机制可能与其激活SIRT1信号通路并降低Ac-Foxol水平有关。
- 于立明杨阳刘丽君裴海峰金振晓段维勋俞世强
- 关键词：褪黑素心肌缺血再灌注损伤心肌保护
- γ-分泌酶抑制剂对血管内皮细胞抗过氧化氢损伤的保护作用及其机制被引量：6
- 2013年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂DAPT对血管内皮细胞抗过氧化氢（H2O2）损伤的保护作用及机制。方法分别用不同浓度H2O2（100、200、400μmoL／L）处理体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）2、4、8h，噻唑蓝（MTT）比色法测定内皮细胞活力；Western blot法检测Notch信号通路受体Notchl、线粒体凋亡通路相关蛋白bax及抗凋亡蛋白B淋巴细胞／白血病-2（bcl-2）的表达。H2O2（300μmol／L）建立HUVECs损伤模型，不同浓度DAPT（40、20、10μmol／L）与H2O2共同处理HUVECs2、4、6h，分别检测细胞存活率、黏附能力、凋亡率；Western blot法检测过氧化氢和DAPT共处理的内皮细胞中Notchl、bcl-2和bax蛋白的表达。结果经不同浓度的H2O2（100、200、400μmol／L）处理内皮细胞2、4、6h后，内皮细胞的存活率明显降低（P〈0．01）；Notchl和bax的表达升高，抗凋亡蛋白bcl-2的表达降低。DAPT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞存活率和黏附能力，降低凋亡率（P〈0．01）；经DAPT和H2O2共处理的内皮细胞与过氧化氢损伤组比较，Notchl和bax蛋白的表达显著降低，但是bcl-2蛋白的表达显著升高（P〈0．01），其中DAPT浓度为10μmol／L时效果最明显。结论低浓度DAPT对内皮细胞抗过氧化氢损伤有保护作用，可能与其抗氧化能力和抑制Notch信号通路有关。
- 杨阳梁振兴王宁段维勋金振晓易定华
- 关键词：人脐静脉内皮细胞Γ-分泌酶抑制剂NOTCH信号通路
- γ-分泌酶抑制剂对人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨Notch信号特异性阻断剂γ-分泌酶抑制剂(DAPT)对正常人脐静脉内皮细胞系增殖凋亡的影响。方法分别用不同浓度DAPT(15、30、45、60μM/L)处理体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)12h、24h和48h,MTT法测定内皮细胞活力;粘附实验测定处理24h后细胞粘附率;TUNEL法检测处理24h后细胞凋亡率;Western法检测Notch信号通路受体Notch1的表达。结果 MTT检测显示DAPT显著抑制HUVECs存活(P<0.01),并呈浓度时间依赖性;粘附实验结果显示DAPT(24h)可以显著减弱HUVECs粘附能力(P<0.01);TUNEL检测显示DAPT(24h)可以显著增加HUVECs凋亡率(P<0.01);Westernblot结果显示DAPT使HUVECs中Notch1表达显著下降(P<0.01)。结论 DAPT可阻断Notch信号通路,抑制正常人脐静脉内皮细胞的增殖,促进细胞凋亡。
- 梁振兴杨阳李悦金振晓王宁易定华段维勋陈文生
- 关键词：人脐静脉内皮细胞DAPT增殖凋亡NOTCH信号通路
- γ-分泌酶抑制剂对姜黄素后处理心肌保护作用的影响被引量：4
- 2013年
- 目的探讨Notch信号通路在姜黄素(Cur)后处理抗心肌缺血再灌注损伤(IR)中的作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组、IR组、Cur组、Cur+DAPT组、DAPT组各8只。各组均采用离体心脏Langendoff逆行灌注10 min致心肌缺血,停止灌注80 min后除对照组外其余各组均予KH液行再灌注至150 min。Cur组再灌注液中含1μM浓度的Cur,Cur+DAPT组含1μM浓度的Cur和0.5μM浓度的DAPT;DAPT组含0.5μM浓度的DAPT。监测各组缺血前及再灌注后血流动力学指标,包括心率(HR)、左心室发展压(LVDP)、左心室内压最大变化速率(+dp/dtmax)、冠脉流量(CF);氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死(MI)面积;专用试剂盒测定冠脉流出液(CF)中乳酸脱氢酶水平(LDH);Western blot法检测心肌组织Notch1表达。结果与对照组比较,IR组再灌注后各时间点收缩及舒张功能均显著降低(P<0.01),MI面积显著增加(P<0.01),冠脉流出液LDH含量显著升高(P<0.01),Notch1表达下降(P<0.01);与IR组比较,Cur组上述指标显著改善(P<0.01),Notch1表达上升(P<0.01);与Cur组比较,Cur+DAPT组上述指标显著恶化,且Notch1表达下降(P<0.01);与IR组比较,DAPT组各项指标差异无统计学意义。结论 Cur后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤有保护作用,其作用机制可能与活化Notch信号通路有关。
- 王宁段维勋杨阳李悦梁振兴金振晓易定华俞世强
- 关键词：姜黄素后处理DAPTNOTCH信号通路
