广东省科技计划工业攻关项目(20088060600032)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李益清聂大年谢双锋吴裕丹尹松梅更多>>
- 相关机构：中山大学孙逸仙纪念医院中山大学附属第二医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
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- 小干扰RNA下调白血病细胞X连锁凋亡抑制蛋白的表达及其对化疗药物敏感性的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨小干扰RNA（siRNA）下调白血病MOLT-4、HL-60、K562细胞的白血病细胞X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）的表达对化疗药物敏感性的影响.方法 采用实时荧光定量PCR和Western免疫印迹检测MOLT-4、HL-60、K562细胞及健康人外周血单个核细胞（PBMC）XIAP mRNA和XIAP蛋白表达水平.用NucleofectorTM核酸转染仪对高表达XIAP的K562细胞转染XIAP siRNA（实验组）,同时以转染无同源性siRNA作阴性对照组,未转染任何siRNA的K562细胞作空白对照组,并检测3组细胞XIAP mRNA和XIAP蛋白表达水平.同时将实验组、阴性及空白对照组细胞暴露于不同浓度的依托泊苷（vp-16,0.01、0.1、1、10、100mg/L）及阿糖胞苷（Ara-c,0.1、1、10、100、1000、10 000mg/L）,用CCK-8法检测细胞抑制率变化.结果 与健康人PBMC比较,MOLT-4、HL-60、K562细胞XIAPmRNA及蛋白表达均增高（均P＜0.05）,其中K562细胞XIAPmRNA及蛋白表达水平最高,与MOLT-4、HL-60细胞比较差异有统计学意义（均P＜0.05）.K562细胞转染XIAP siRNA48 h后,与阴性对照组、空白对照组比较,实验组细胞XIAP mRNA及蛋白表达水平均明显下降（mRNA：0.37±0.10比1.41±0.13比1.00±0.12,蛋白：0.37±0.03比0.99±0.08比0.98±0.07,均P＜0.05）.在给予1 mg/L vp-16、10及100 mg/L的Ara-c后,实验组细胞抑制率与阴性对照组、空白对照组比较,差异有统计学意义（均P＜0.05）;在给予其他浓度vp-16和Ara-c后,3组细胞抑制率差异均无统计学意义（均P＞0.05）.结论 XIAP siRNA能特异性下调K562细胞XIAPmRNA和蛋白质水平的表达,增强K562细胞对化疗药物依托泊苷、阿糖胞苷的敏感性.
- 李丹尹松梅谢双锋聂大年李益清马丽萍王秀菊吴裕丹肖洁
- 关键词：小分子干扰白血病细胞
- 环氧合酶-2抑制剂尼美舒利对白血病HL-60细胞增殖的抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的 探讨选择性环氧合酶-2（COX-2）抑制剂尼美舒利对人类急性髓系白血病HL-60细胞的增殖抑制作用.方法 以不同浓度的尼美舒利体外处理HL-60细胞,采用CCK-8、流式细胞术、Western blotting、ELISA等方法,检测尼美舒利对HL-60细胞增殖的作用及对细胞凋亡、细胞周期、COX-2、前列腺素E2（PGE2）、bax、bcl-2、c-myc的影响.结果 尼美舒利对HL-60细胞增殖的抑制呈剂量、时间依赖性,可诱导细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G0至G1期.尼美舒利作用HL-60细胞48 h后,细胞COX-2表达下调,100、200、400μmol/L尼美舒利处理组与对照组HL-60细胞总凋亡率分别为（24.97±6.36）%、（34.22±5.76）%、（44.59±6.69）%及（4.11±1.26）%,差异有统计学意义（P＜0.05）.HL-60细胞合成PGE2减少,同时bcl-2、c-myc蛋白表达明显减少,bax蛋白表达明显上调.结论 尼美舒利可抑制HL-60细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用与抑制COX-2表达,减少PGE2合成,阻滞细胞周期和调节凋亡相关蛋白bcl-2、c-myc、bax的表达等有关.
- 李益清尹松梅聂大年谢双锋马丽萍王秀菊吴裕丹
- 关键词：尼美舒利环氧合酶2HL-60细胞细胞增殖
