国家公益性行业科研专项(NYHYZX07-034)
- 作品数：8 被引量：30H指数：4
- 相关作者：李学伟刘海峰张煦李明洲黄德仕更多>>
- 相关机构：四川农业大学学研究院广东恒兴集团更多>>
- 发文基金：国家公益性行业科研专项国家现代农业产业技术体系建设项目长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 罗格列酮对猪脂肪前体细胞分化过程中聚脂相关基因表达模式的影响被引量：7
- 2009年
- 为了解罗格列酮对猪脂肪前体细胞诱导分化过程的影响,利用胶原酶消化法分离猪皮下脂肪前体细胞,采用含50nmol/L胰岛素、100nmol/L地塞米松及0.25mmol/L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤的分化培养液Ⅰ(对照组)和在分化培养液Ⅰ中添加100nmol/L罗格列酮的分化培养液Ⅱ(实验组)两种诱导分化方法对脂肪前体细胞进行诱导分化,借助实时定量RT-PCR方法检测了细胞分化过程中聚脂相关基因的表达。结果显示:罗格列酮对PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN和GPAT基因的表达有显著的上调作用,而对PPARα有一定的下调作用。试验组中PPARα、PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN和GPAT等基因分别于48h、48h、48h、108h、60h和24h达到表达高峰,此时的表达量分别是诱导前的1.7、48、3.3、487.5、5.8和3.6倍,GPAT同PPARα和FASN基因表达量间均达到显著相关(P<0.05);而对照组中PPARα、PPARγ、C/EBPα、FABP4、FASN和GPAT等基因分别于84h、96h、48h、96h、36h和36h达到表达高峰,此时的表达量分别是诱导前的2.1、11、1.6、216.5、3.5和2.8倍,GPAT同PPARα和FASN基因表达量间均达到极显著相关(P<0.01)。本实验结果表明:罗格列酮不仅可以极大的促进PPARγ和C/EBPα基因的表达,还能让其协同达到表达高峰;PPARγ和C/EBPα可能是调控猪脂肪前体细胞分化的关键转录因子;在脂肪形成过程中,甘油脂类的生物合成可能发生较早,同时PPARα可能主要参与甘油脂类生物合成的调控。
- 刘海峰张煦李明洲李学伟
- 关键词：罗格列酮基因表达
- 猪CTSB基因和CSTB基因mRNA表达的发育性变化
- ＜正＞引言Cathepsin B（组织蛋白酶B,简称CTSB）是体内重要的内源蛋白酶,而Cystatin B（胱抑素B,简称CSTB）是一种最重要的胞内组织蛋白酶抑制剂。自2002年Russo等提出将CTSB和CSTB作...
- 陈磊王金勇李学伟
- 关键词：表达量
- 文献传递
- 长白猪和太湖猪不同生长阶段脂肪中肉质和胴体性状相关基因的表达谱分析被引量：4
- 2008年
- 动物个体的皮下脂肪厚度(subcutaneous fat thickness,SFT)和肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量取决于活体内脂肪酸合成与氧化竞争的动态平衡点.利用包含140个与猪脂肪沉积、代谢和肌肉生长密切相关基因的Oligo功能分类基因芯片检测了脂肪型的太湖猪和瘦肉型的长白猪在1,2,3,4和5月龄间背部皮下脂肪中这些基因的动态表达变化,发现长白猪有25个基因在月龄间的表达差异达显著水平(P<0.05),且包含23个基因的"参与脂肪或类固醇代谢的酶和调节蛋白"基因分组在品种间具有极显著意义(P<0.01).提示两猪种脂肪沉积能力的巨大表型差异可能与这些基因的差异表达规律密切相关.STEM聚类分析显示长白猪和太湖猪各有两个表达模式分别具有极显著(P<0.01)和显著性意义(P<0.05),但太湖猪基因表达谱比较分散,占主导优势的表达模式没有长白猪明显.提示太湖猪脂肪细胞内参与相关代谢活动的基因间的调控关系较长白猪复杂.基于动态贝叶斯模型构建的基因调控网络从一定程度上反映了两猪种在脂肪沉积代谢相关生理生化活动方面存在的明显差异,可从中挖掘相关性状潜在的关键特征基因.此外,对5个差异表达基因的荧光定量RT-PCR验证显示两种实验方法结果的相关系数平均高达0.874±0.071.以上结果筛选出了对于猪脂肪相关性状可能具有重要影响并值得深入研究的一些基因,初步揭示了生长发育过程中脂肪细胞基因表达调控的分子互作机制.
- 李明洲朱砺李学伟帅素容滕晓坤肖华胜李强陈磊郭玉姣王金勇
- 关键词：脂肪基因差异表达
- 不同消化能与蛋白质水平对断奶仔猪生长性能的影响被引量：7
- 2009年
- 研究选用288头(23±2)日龄,初始体重(7.12±0.54)kg的健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪,采用2×3因子设计,研究消化能(14.64MJ/kg和14.23MJ/kg)与蛋白质水平(19%、21%和23%)对断奶仔猪生长性能的影响。结果表明:与低消化能水平相比,高消化能显著提高仔猪日增重12.9%(P<0.01),改善饲料转化率18.8%(P<0.01),降低腹泻率27.6%;随着日粮蛋白质水平的提高,日增重(P=0.04)和饲料转化率显著提高(P<0.01),而腹泻率也随之呈增加趋势。由此可见,随着日粮消化能和蛋白质浓度的提高,断奶仔猪的日增重和饲料转化率提高。在本试验条件下,日粮消化能为14.64MJ/kg,CP为21%时可达到最佳的促生长效果和饲料转化率。
- 王华朗申雁滨朴香淑黄德仕李德发
- 关键词：消化能蛋白质断奶仔猪
- 应用抑制消减杂交技术筛选猪前脂肪细胞诱导分化前后的差异表达基因
- 引言前脂肪细胞(Preadipocytes)是脂肪细胞的一种,由多能干细胞或胚胎干细胞分化而来,胞浆内不含脂滴但具有聚脂的潜力,经诱导后能在胞浆内聚积脂滴而分化为成熟的脂肪细胞。目前,对前脂肪细胞诱导分化过
- 刘海峰李学伟朱蛎帅素容
- 关键词：前脂肪细胞抑制消减杂交差异表达基因
- 文献传递
- 不同佐剂H3N2亚型猪流感灭活疫苗的免疫效果比较
- 2012年
- 选用福建分离猪流感A/Swine/Fujian/F1/03(H3N2)毒株为制苗种毒,制成2种不同佐剂灭活疫苗。挑选H3N2亚型猪流感抗体阴性的母猪和断奶仔猪用于检测比较2种灭活疫苗的免疫效果。结果表明:IMS1315佐剂灭活疫苗首免母猪和断奶仔猪7d后均可检测到HI抗体,二免28d后抗体水平最高,其中母猪的抗体均值为11.0Log2,断奶仔猪的抗体均值为10.2Log2,二免150d后仍维持在较高抗体水平,均值在6.5Log2以上;医用白油佐剂灭活疫苗首免母猪和断奶仔猪14d后均可检测到HI抗体,二免28d后抗体水平达最高,其中母猪的抗体均值为10.2Log2,断奶仔猪的抗体均值为10.0Log2,二免150d后抗体水平均值在6.0Log2以上。表明2种不同佐剂灭活疫苗不论免疫母猪还是仔猪,均具有较长的抗体消长期,但IMS1315佐剂灭活疫苗产生抗体略好于医用白油佐剂灭活疫苗。
- 王隆柏庄向生魏宏车勇良陈如敬吴学敏严山刘玉涛周伦江
- 关键词：佐剂灭活疫苗免疫效果
- 猪脂肪前体细胞的原代培养及诱导分化被引量：9
- 2009年
- 以2日龄仔猪皮下脂肪组织为材料，采用胶原酶消化法分离培养出细胞成分均一、增殖旺盛的原代脂肪前体细胞。对所获细胞采用含50nmol／L胰岛素＋100nmol／L地塞米松＋0．25mmol／L3-异丁基-1-甲基黄嘌呤＋100nmol／L罗格列酮的分化培养液进行诱导分化培养，少量细胞第2d开始出现脂滴，大多细胞第3d出现脂滴，分化率达95％以上，第4～7d小脂滴逐步融合为大脂滴。在脂滴出现及汇聚快慢上本实验所采用诱导方法明显快于其他诱导方式。
- 刘海峰王翔李学伟张利娟张煦
- 关键词：细胞培养诱导分化罗格列酮
- 猪CISD1基因电子克隆与验证被引量：1
- 2010年
- 对通过抑制差减杂交技术所筛选的猪前脂肪细胞诱导分化后差异表达的CISD1基因的EST序列为探针进行电子克隆,用克隆序列设计引物,通过RT-PCR、克隆测序、同源比对证实所获序列为猪CISD1基因的mRNA序列,并将序列提交到Genebank,登录号为GQ913654。所获猪CISD1基因的mRNA序列全长为631 bp,CDS包含321 bp,由其编码的CISD1蛋白包含106个氨基酸残基,理论等电点为9.20,属脂溶性不稳定蛋白。猪CISD1蛋白的1~23位氨基酸可能是信号肽,53~91位氨基酸形成CDGSH锌手指域,为该蛋白的重要功能域,猪CISD1蛋白的三级结构与人CISD1蛋白相似度为89.333%。
- 刘海峰董涵阎振鑫毛予龙缪霜李学伟
- 关键词：电子克隆
- 罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- [目的]探讨罗格列酮和血清对猪前脂肪细胞诱导分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的影响。[方法]利用胶原酶消化法分离了猪皮下前脂肪细胞,采用3种不同分化培养液对猪前脂肪细胞进行了诱导分化,借助油红O染色提取法比较了不同分化培养液对分化过程中细胞内脂肪含量变化的影响,并运用实时定量RT-PCR方法检测了不同分化培养液细胞分化过程中PPARα和PPARγ基因表达的变化趋势。[结果]细胞内脂肪聚积以含罗格列酮的MⅡ最快,不含罗格列酮的MⅠ最慢。罗格列酮可极显著上调PPARγ基因的表达(P<0.01),而对PPARα基因的表达存在一定的抑制作用,但不显著。血清对PPARγ基因的表达有极显著的上调作用(P<0.01),而对PPARα基因的表达有极显著下调作用(P<0.01)。[结论]罗格列酮可极大地促进PPARγ基因的表达,继而增进细胞内脂肪沉积;血清中可能存在PPARγ基因的激活剂,同时存在PPARα基因的抑制因子。
- 李芳琼刘海峰朱砺
- 关键词：罗格列酮血清前脂肪细胞基因表达
- 日粮消化能与可消化赖氨酸水平对断奶仔猪生产性能的影响被引量：2
- 2009年
- 本文旨在研究日粮不同消化能与可消化赖氨酸水平对断奶仔猪生产性能的影响。采用2×3因子设计,以消化能(3500kcal/kg与3400kcal/kg)与可消化赖氨酸水平(1.10%、1.25%和1.40%)为两个主效应。选用288头23日龄断奶健康的杜×长×大三元杂交仔猪[初始体重(6.64±0.39)kg],公母各半,随机分为6个处理,每个处理6个重复,每个重复8头猪,试验期14d。结果表明:在本试验条件下,与低消化能水平相比,高消化能组显著提高了仔猪日增重(4.6%)和饲料转化率(8.9%)(P<0.01),降低了日采食量(5%)(P<0.01)。日粮消化能水平对腹泻率无显著影响(P>0.05)。随着日粮赖氨酸水平的提高,断奶仔猪日增重也相应提高(P=0.04),高赖氨酸比低赖氨酸组日增重提高12.4%,饲料转化率也提高5.3%(P<0.01)。日粮赖氨酸水平对日采食量和腹泻率影响并不显著。消化能与赖氨酸互作对试验猪日增重、日采食量、饲料转化率及腹泻率交互作用不明显。综合考虑,日粮消化能水平为3500kcal/kg,可消化赖氨酸水平为1.25%时,断奶仔猪发挥最大的生长性能,日增重最大,饲料转化率最佳。
- 王华朗朴香淑黄德仕李德发
- 关键词：消化能可消化赖氨酸断奶仔猪
