山东省农业良种产业化开发项目(620902) 作品数:14 被引量:119 H指数:8 相关作者: 戴洪义 柏素花 张玉刚 孙晓红 刘春晓 更多>> 相关机构: 青岛农业大学 湖南农业大学 南京农业大学 更多>> 发文基金: 山东省农业良种产业化开发项目 国家苹果产业技术体系建设专项 青岛市科技发展计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 更多>>
苹果丙二烯氧化物合酶MdAOS的克隆和表达分析 被引量:6 2014年 丙二烯氧化物合酶(allene oxide synthase,AOS)是茉莉酸合成途径中第一个特异性的酶。本研究从"嘎啦"苹果中克隆了一个AOS的基因序列,将其命名为MdAOS,并对其进行了结构和表达分析。MdAOS基因编码区共有1 605 bp碱基,编码531个氨基酸,等电点为4.92,分子量为134.9 kD。MdAOS属于细胞色素P450基因家族的CYP74A亚类,并具有典型的P450成员特征,其编码的蛋白包含4个保守区域,分别为:Heme-Binding结构域、Ⅰ-Helix区、ETLR基序和PEEF基序。MdAOS蛋白的N末端有典型叶绿体信号肽。同源性分析表明MdAOS与碧桃(Amygdalus persica var.persica f.duplex.)AOS基因的同源性很高,且聚类结果也与双子叶植物聚为一类。实时荧光定量PCR分析结果显示,MdAOS在苹果各组织中均有表达且在茎中表达量最高。MdAOS能响应茉莉酸、水杨酸、脱落酸和乙烯的诱导,并在机械伤处理时表达上调。 曹晏彬 柏素花 戴洪义关键词:苹果 茉莉酸 基因克隆 基因表达 苹果对炭疽菌叶枯病抗性遗传的研究及其分子标记筛选 被引量:13 2015年 利用两个对炭疽菌叶枯病高抗的苹果品种(系)‘富士'和‘QF-2'及两个高感品种‘金冠'和‘嘎拉'为亲本配制了4个杂交群体‘富士'ב金冠',‘金冠'ב富士',‘嘎拉'ב富士',‘富士'בQF-2'。以F_1群体植株为试验材料,对苹果炭疽菌叶枯病的抗性进行鉴定评价和遗传分析。结果表明,4个群体中抗、感植株的分离比分别符合1:1,1:1,0:1和1:0的理论比值,初步推测苹果抗炭疽菌叶枯病性状受隐性单基因控制,抗病基因型为rr,感病基因型为RR和Rr。以‘金冠'ב富士'F_1群体为试材,采用分离群体分组分析(BSA)方法,通过对均匀覆盖苹果染色体组的500对SSR引物的筛选,获得了一个与抗病性状相关的分子标记S0506206-24,该标记与抗性基因位点的连锁距离为9.8 cM. 刘源霞 李保华 王彩虹 刘春晓 孔祥华 祝军 戴洪义关键词:苹果 抗性遗传 SSR标记 苹果NBS-LRR1基因的鉴定与表达分析 被引量:9 2013年 NBS-LRR蛋白是植物细胞内普遍存在的主要抗性蛋白家族,该家族的蛋白包含有NBS结构域和LRR结构基序,在植物抵御各种病原物的侵袭中发挥重要作用。从‘嘎啦’苹果中鉴定了一个NBS-LRR类基因,命名为MdNBS-LRR1,(GenBank登录号:JX126858)。该基因全长为3116bp,包含一个2826bp的开放读码框,编码包含941个氨基酸残基的蛋白质;其氨基酸序列含有典型的NBS-LRR类抗病基因所具有的NB-ARC结构域。Blast分析发现MdNBS-LRR1与大豆NBS-LRR类抗性蛋白具有较高的氨基酸序列一致性(60%)。RT-PCR分析结果表明,MdNBS-LRR1在‘嘎啦’苹果的幼叶、茎、功能叶、芽、皮和花等组织中均有表达,在幼叶中的表达量最高,茎中最低。苹果轮纹病病原菌侵染可促进MdNBS-LRR1基因表达上调,接种后24d表达量最高,是对照的10.6倍左右,另外,在‘嘎啦’苹果幼苗叶片中,SA、MeJA和ACC均可诱导该基因的表达,表明MdNBS-LRR1基因的表达受到与抗病相关信号转导途径的调控。 宋霄 柏素花 戴洪义关键词:苹果 NBS-LRR 水杨酸 茉莉酸甲酯 ACC BOTRYOSPHAERIA 苹果SSR和SNP标记开发及在遗传图谱构建和品种鉴定中的应用 苹果(Malus domestica Borkh.)是全球温带地区广泛种植的重要果树作物之一,在我国果树生产中占有重要地位。苹果商业化种植模式的发展对新品种的栽培性状提出了更高的要求。目前,苹果新品种的培育手段主要有常规... 刘更森关键词:苹果 基因组 SNP SSR 苹果酒、醋中香气物质分析 被引量:7 2013年 采用GC-MS法对'95-54'、'95-117'苹果酒、醋中的香气物质的种类与含量进行检测分析。95-54苹果酒中检测出48种香气物质,占总峰面积的90.36%。95-54苹果醋中检测出42种香气物质,占总峰面积的98.66%。95-117苹果酒中检测出43种香气类物质,占总峰面积的86.59%。95-117苹果醋中检测出49种香气物质,占总峰面积的99.37%。这些香气物质主要是醇类、醛类、酮类、酸类、酯类、缩醛类和萜烯类。分析得出不同品种的苹果酒和苹果醋都存在一定的共性和差异,苹果酒和醋之间的香气差异也均符合酒醋基本特征。 宋静 陈平 王玉莹 张玉刚 戴洪义关键词:香气 苹果酒 苹果醋 红肉苹果果实发育过程中花青苷含量变化及其合成相关基因表达分析 被引量:16 2017年 本试验以白肉苹果(Malus pumila)‘澳洲青苹’为对照,研究了4个红肉苹果(M.sieversii f.neidzwetzkyana)品种(系)贵妃、‘红勋1号’、红勋5号、新疆1号在果实发育5个时期果肉花青苷含量,利用实时荧光定量PCR检测了花青苷合成相关结构基因和转录因子的表达水平。结果表明:(1)红肉苹果果肉中的花青苷含量在花后30 d最高,随后下降,红勋5号和新疆1号在花后120和150 d又有明显提高。(2)苹果花青苷合成的酶基因CHS、F3H和DFR在所有品种(系)果实发育的各个时期相对表达量相差不大;ANS基因在新疆1号和红勋5号的前3个发育时期表达量是‘澳洲青苹’的约9倍至约18倍,在后两个发育时期表达量降低;UFGT基因在‘红勋1号’、新疆1号和红勋5号果肉发育的各个时期中表达量均较高;MYB10转录因子在新疆1号和红勋5号盛花后30和60 d时的表达量为‘澳洲青苹’的约70倍至约90倍;TTG1、b HLH33在新疆1号和红勋5号中相对表达量高于b HLH3。(3)贵妃和‘红勋1号’MYB10启动子基因型为R1R6,红勋5号和新疆1号启动子基因型为R6R6,‘澳洲青苹’启动子基因型为R1R1。研究结果为红肉苹果分子育种提供理论参考。 孙晓红 刘源霞 孙欣 柏素花 孙欣 张玉刚 柏素花 戴洪义关键词:红肉苹果 花青苷 基因表达 野生黑枸杞与普通红枸杞营养成分和相关活性物质的分析与评价 被引量:29 2016年 黑果枸杞(Lycium ruthenicum Murr.)和红果枸杞(Lycium barbarum L.)均为茄科(Solanaceae)枸杞属(Lycium L.)多年生落叶或半落叶灌木。前者主要分布于宁夏、甘肃、青海、新疆和西藏等西北荒漠地区,耐干旱,耐盐碱,对盐渍土壤有很强的适应性。其成熟浆果紫黑色,藏药称‘旁玛’,味甘、性平,清心热. 孙晓红 王潼 吕康文 戴洪义关键词:黑果枸杞 营养成分 活性物质 营养评价 苹果酰基辅酶A结合蛋白2编码基因MdACBP2的克隆和表达分析 被引量:8 2012年 酰基辅酶A结合蛋白(ACBP)是一个保守的蛋白家族,在酰基酯辅酶A的转运过程中发挥重要作用。在水稻和拟南芥中鉴定的ACBP除了参与长链酰基辅酶A的转运以外,还参与了植物对生物和非生物胁迫的反应。为了探讨在苹果树中是否也存在参与植物对逆境反应的ACBP,并可用于改良苹果品种,以提高抗逆能力,从苹果品种‘鸡冠’中克隆、鉴定了一个ACBP基因,命名为MdACBP2。MdACBP2包含一个378bp的开放阅读框,编码包含125个氨基酸残基的蛋白质;推定的氨基酸序列中包含有一个ACB结构域,无信号肽序列。序列和结构特征表明该基因是ACBP家族ClassⅠ亚族的成员。利用荧光定量PCR技术检测MdACBP2的表达,发现在苹果的根、叶、花、幼果、枝皮、芽等组织中均有表达,在叶中的表达量最高,在幼果中的表达量最低,这一表达模式暗示MdACBP2可能参与多种生理途径。不同胁迫处理的时序表达分析表明,MdACBP2的表达能被轮纹病病原菌Botryosphaeria dothidea侵染和10%PEG渗透胁迫所抑制,低温胁迫则能诱导MdACBP2的表达,1mmol·L-1Pb(NO3)2处理对MdACBP2的表达没有显著影响。推测MdACBP2可能参与了苹果对低温胁迫的防御反应。 柏素花 祝军 戴洪义关键词:苹果 轮纹病菌 低温胁迫 渗透胁迫 苹果抗炭疽菌叶枯病基因相关的4个分子标记的准确性验证 被引量:5 2017年 利用50个苹果栽培品种(系)对与抗炭疽菌叶枯病基因(R_(gls))位点紧密连锁的4个分子标记S0405127(SSR)、S0304673(SSR)、SNP4236和In Del4254的准确性进行验证。室内离体接种表型鉴定及分子标记基因型鉴定的结果表明,4个分子标记验证苹果炭疽菌叶枯病抗性的准确率分别为90%、94%、96%和92%。 刘春晓 兰进好 侯鸿敏 张玉刚 戴洪义 刘源霞关键词:苹果 分子标记 苹果丙二烯氧化物环化酶基因MdAOC1的克隆与表达分析 被引量:10 2013年 丙二烯氧化物环化酶(AOC)是茉莉酸生物合成途径中一个关键酶,在植物抗逆境反应中发挥重要作用。用电子克隆结合RACE技术,从苹果‘嘎拉’中克隆并鉴定1个AOC编码基因,命名为MdAOC1。MdAOC1基因开放阅读框长759 bp,编码1个由252个氨基酸组成的蛋白,该蛋白包含1个保守的Allene_ox_cyc结构域,并带有1个N-末端叶绿体前导肽。同源性分析表明,MdAOC1蛋白与水稻、拟南芥等AOC蛋白具有高度的氨基酸序列相似性,其三级结构模型是由3条链组成的疏水结合空穴,同拟南芥AOC2的蛋白三级结构相似。利用实时荧光定量RT-PCR方法测定MdAOC1基因的表达情况,发现MdAOC1具有组织特异性,在茎中表达最高;MdAOC1不仅能被机械伤所诱导,而且能被外源激素MeJA、SA处理所诱导。结果暗示MdAOC1基因可能参与苹果对生物或非生物胁迫的防御反应。 曹晏彬 柏素花 戴洪义关键词:苹果 茉莉酸 基因克隆 基因表达