海南省自然科学基金(808109)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 红海榄液泡膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆与分析
- 2011年
- 根据液泡膜Na+/H+反转运蛋白基因(NHX1)的保守序列设计引物,通过RT-PCR扩增得到红海榄Na+/H+反转运蛋白基因的cDNA片段,然后采用cDNA末端快速扩增法(RACE)得到RsNHX1基因的全长cDNA序列,GenBank登录号为FJ627273,被命名为RsNHX1。该基因序列的长度为2 094 bp,包含有1个1 614 bp的开放阅读框,编码538个氨基酸。该基因生物信息学分析表明:其氨基酸序列与胡杨PeNHX1(ABY86892)和拟南芥AtNHX1(AAM34759)基因的同源性分别为74%和69%,序列存在较大差异。
- 翟金玲徐远峰马宏伟陈旭峰黄惜
- 关键词：红海榄耐盐
- 红海榄脱水素基因(RsDHN1)的克隆及表达分析被引量：4
- 2010年
- 采用RT-PCR和RACE技术对已获得的红海榄根部其中一个差异表达基因进行克隆,通过Blast分析和序列比对可知,该基因全长cDNA序列包括146bp的5'端非编码区,43bp的3'端非编码区和一个编码241个氨基酸的开放阅读框,命名为RsDHN1基因。该cDNA编码的蛋白具有植物脱水素蛋白的特征性结构,属于SKn类脱水素蛋白,与其它植物的SKn类脱水素蛋白具有43%～55%的氨基酸序列同源性。半定量RT-PCR分析表明,盐胁迫对RsDHN1基因的表达有明显上调作用。
- 马宏伟徐远峰翟金玲翟金玲黄惜
- 关键词：红海榄脱水素RACE耐盐基因
- 利用GATEWAY^(TM)技术快速构建番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体被引量：1
- 2009年
- 通过RT-PCR扩增番木瓜环斑PRSV病毒HC-pro基因,序列比对结果表明,克隆到的该基因片段与已知的海南或华南地区已克隆的HC-pro基因只有约92%的同源性,说明PRSV病毒具有较大的变异性。为了培育番木瓜转基因抗病植株,利用pWATERGATE载体和GATEWAYTM技术,成功构建了番木瓜环斑病毒HC-pro基因的RNAi表达载体。具体步骤如下:①设计带特异性重组序列attB的HC-pro基因PCR的引物;②利用该引物进行RT-PCR扩增HC-pro基因;③通过BP反应,将扩增得到的HC-pro基因序列插入入门载体pDONR201中;④通过LR反应将HC-pro基因序列从pDONR201重组到目标载体pWATERGATE中,得到PRSVHC-pro基因的RNAi表达载体。
- 高艳梅翟金玲黄惜
- 关键词：番木瓜环斑病毒RNAIHC-PRO基因
