“十五”国家科技攻关计划(2004BA717B-3)
- 作品数：12 被引量：38H指数：4
- 相关作者：魏泓商海涛杨家大曾本华刘宇更多>>
- 相关机构：第三军医大学四川农业大学井冈山大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 巴马香猪CYP3A29mRNA组织分布的TaqManRT-PCR分析
- 2008年
- 为探讨巴马香猪CYP3A29 mRNA的组织分布特征,全面比较其与人CYP3A4 mRNA组织分布规律,利用TaqMan RT-PCR技术对巴马香猪主要组织CYP3A29 mRNA进行定量。结果表明,巴马香猪CYP3A29 mRNA的组织分布特征与报道的人CYP3A4相似,且均以肝脏最高,从转录水平提示巴马香猪及其肝脏均可以用作人CYP3A4的药物代谢研究模型。
- 杨家大邱效武商海涛魏泓杨婉身孙新明
- 巴马香猪CYP2D25 mRNA水平的TaqMan分析被引量：4
- 2010年
- 为探索巴马香猪CYP2D25 mRNA的组织分布特征及其水平与人CYP2D6的相似性,本研究应用TaqMan法对巴马香猪主要组织CYP2D25 mRNA进行了定量。结果表明,该酶主要分布于肝脏,与报道的人CYP2D6相似,但其水平却高于人CYP2D6,从转录水平提示巴马香猪用于人CYP2D6介导的药物代谢动物模型研究存在一定的局限性。
- 杨家大吴声榕商海涛魏泓杨婉身
- 关键词：TAQMAN
- 巴马香猪、人和大鼠洛伐他汀体外代谢的比较被引量：2
- 2007年
- 目的体外研究巴马香猪、人和大鼠肝微粒体中洛伐他汀代谢的酶动力学差异,并用人体肝微粒体细胞色素P450 3A(CYP3A)酶特异性抑制剂酮康唑(KCZ)进行抑制,观察抑制活性反应的差异,评估巴马香猪作为人体CYP3A酶代谢药物研究实验动物模型的可行性。方法制备巴马香猪、人和大鼠的肝微粒体,构建肝微粒体与洛伐他汀的反应体系以及抑制剂抑制反应体系,利用RP-HPLC测定洛伐他汀代谢的变化,并对其相应活性值进行比较。结果巴马香猪肝微粒体代谢洛伐他汀的酶动力学变化比大鼠更为与人体相似。人体CYP3A特异性抑制剂均可以显著抑制三者的代谢,但是巴马香猪代谢速率下降程度与人体接近。结论巴马香猪与大鼠相比,更适用于作为人CYP3A酶代谢的相关药物研究的良好动物模型。
- 刘宇曾本华魏泓
- 关键词：洛伐他汀细胞色素P450酶动力学微粒体
- 巴马香猪CYP3A29 mRNA表达的TaqMan定量方法学建立
- 2008年
- 目的建立巴马香猪CYP3A29 mRNA表达的TaqMan定量方法。方法通过RT-PCR、TA克隆等技术制备CYP3A29-pMD18-T和β-actin-pMD18-T实时荧光定量标准品,并以CYP3A29-pMD18-T标准品为模板,对不同浓度Mg2+与探针组合的TaqMan反应体系进行筛选,TaqMan PCR方法,并对其有效性及重复性进行评价。结果筛选到的TaqMan PCR方法为:PCR总体积10μL,其中含1×Buffer、5.5 mmol/L Mg2+、0.8 mmol/L dNTPmix、0.3μmol/L上下游引物、0.2 U/μL rTaq、0.1μmol/L探针、1μL模板,热循环条件为94℃5 min→40cycles(94℃15 s→60℃45 s→读板)。结论建立了有效测定巴马香猪CYP3A29 mRNA拷贝数浓度的TaqMan PCR方法,通过该方法分别定量CYP3A29和β-actin mRNA的拷贝数浓度,即可求出CYP3A29 mRNA的表达水平。
- 杨家大商海涛魏泓杨婉身
- 关键词：TAQMAN
- 洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄被引量：1
- 2007年
- 目的研究洛伐他汀在巴马香猪体内的分布和排泄特点。方法以抗动脉粥样硬化药物洛伐他汀为模型药,选择健康6月龄雄性巴马香猪为实验对象,经灌胃途径给药(45 mg/kg或2.4 mg/kg),采用RP-HPLC方法测定各组织及体液中的药物浓度,并对其分布和排泄过程进行研究。血浆蛋白结合率通过透析法测定。结果给药后,洛伐他汀快速分布到贲门、胃、小肠、肝、大肠、胰、前列腺、肺、肾、心、肌肉、睾丸、肾上腺、膀胱、脑和脾。以胃、肠、肝组织中药物浓度较高。单次给药4h后,贲门、胃、小肠、肝、心、肾上腺、膀胱药物浓度同给药后1h相比略有下降,其余组织均高于1 h。血浆蛋白结合率为95%以上,同正常人血浆非常一致。96 h尿中累积排泄量为给药量的7.4%,原形药经胆汁及粪排泄量达到80%以上。结论洛伐他汀在巴马香猪体内同人的分布排泄和血浆蛋白结合率相似,均在组织中广泛分布,血浆结合率达到95%以上,主要经胆汁和粪排泄。
- 刘宇曾本华商海涛魏泓
- 关键词：洛伐他汀排泄
- 洛伐他汀在巴马小型香猪体内毒动学研究被引量：6
- 2006年
- 目的研究洛伐他汀在巴马小型香猪体内的毒动学特点。方法选健康雄性巴马小型香猪4头,灌胃给予洛伐他汀1.25 g.kg-1,采用反相高效液相色谱法测定不同时间的血药浓度,用3P97实用药动学程序计算毒动学参数。结果洛伐他汀分布相半衰期t1/2(α)为0.807 h,消除相半衰期t1/2(β)为18.376 h,浓度-时间曲线下面积(AUC)为95.964μg.h.mL-1。结论洛伐他汀在巴马小型香猪体内毒动学行为符合具一级消除的二室血管外给药模型,在巴马小型香猪体内清除较快。
- 黄亚琴岑彦艳曾本华刘宇魏泓
- 关键词：洛伐他汀
- 五指山小型猪冠状动脉球囊损伤术被引量：2
- 2008年
- 目的通过实施冠状动脉内皮损伤术，加速小型猪在高胆固醇饮食条件下的动脉粥样硬化进程，建立小型猪定位冠状动脉硬化技术，为心血管疾病研究提供理想的动物模型。方法采用8头五指山小型猪进行冠状动脉内皮损伤术，术前饲喂3．0％高胆固醇饲料20—25d，在冠状动脉前降支中段进行球囊扩张，压力为6—10atm，扩张次数3次。结果除1头小型猪，在经过扩张压力10个大气压，扩张3次手术后存活外，其余小型猪在术后6—24h内死亡。结论五指山小型猪冠状动脉扩张后，极易出现室颤，推测该品种小型猪对这种手术的耐受力较差。
- 谢忠忱黄广勇尹明苟鹏贾琳黄丽洁陈华
- 关键词：五指山小型猪冠状动脉
- 洛伐他汀在巴马香猪体内的长期毒性试验
- 2007年
- 为研究洛伐他汀在巴马香猪体内为期42d的长期毒性特点，以抗动脉粥样硬化药物洛伐他汀为模型药，选择健康6月龄雄性巴马香猪为实验对象，经灌胃途径给药（12mg·kg^-1和135nag·kg^-1），观察给药后的临床表现、血液学、血生化、脏器系数和组织病理学等指标进行药物毒性的评价。结果主要毒性反应在135mg·kg^-1组，给药后巴马香猪出现了竖毛、腹泻等症状，总采食量和体重减轻；血液血检查显示白细胞总数有所增加，红细胞总数、血红蛋白含量和血小板计数明显下降；血液生化检查显示ALT、AST、ALP和cK升高2—10倍，肌酐和尿素有所升高。同时，组织病理学分析结果显示，巴马香猪出现了与人相似的肝肾病理改变。可见洛伐他汀给药后，巴马香猪在高剂量组可大部分呈现洛伐他汀在人临床出现的毒理反应，表明巴马香猪能敏感的反映洛伐他汀的潜在毒性。
- 刘宇曾本华黄亚琴岑彦艳魏泓
- 关键词：洛伐他汀长期毒性试验
- 应用TaqMan定量方法研究巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA表达被引量：5
- 2011年
- 目的巴马香猪是我国具有特色和优势的实验用小型猪资源品系,用于药物评价具有广阔前景。方法 以β-actin作校正,利用TaqMan定量技术对巴马香猪肝、肾、肾上腺、小肠、皮肤、脑、肺、睾丸、前列腺、子宫和卵巢等组织中CYP1A1、2A19和2E1 mRNA的表达水平进行检测,检测结果与报道的人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1进行比较。结果巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均以肝脏中最高,肝外组织明显较低,并且巴马香猪肝脏CYP1A1、2A19、2E1 mRNA均低于报道的人肝对应酶。结论巴马香猪CYP1A1、2A19、2E1与人体对应酶CYP1A2、2A6、2E1的mRNA组织表达存在一定差异,提示在其作为相应CYP亚型代谢的药物评价时应考虑这种种属差异对实验结果推广到人的影响。
- 杨家大商海涛魏泓
- 关键词：CYP1A1CYP2E1TAQMAN
- 贵州小型香猪与人五种CYP酶活性的比较被引量：21
- 2006年
- 目的对比测定贵州小型香猪与人肝微粒体细胞色素CYP酶的五个主要亚型的活性,并对二者活性相似的亚型以特异性抑制剂进行抑制,观察抑制活性反应的相似性,比较二者的CYP酶特性,评估贵州小型香猪作为人体外药物代谢动力学研究实验动物模型的可行性及其可应用的药物代谢反应类型。方法制备贵州小型香猪和人的肝微粒体,构建肝微粒体和探针底物的反应体系以及抑制剂抑制反应的体系,利用HPLC测定CYP3A,CYP1A,CYP2A,CYP2D和CYP2E酶的探针底物与肝微粒体反应的活性,并对贵州小型香猪和人的相应活性值进行比较,选择活性最为相近的亚型进行特异性抑制。结果贵州小型香猪肝微粒体具有CYP酶的五个主要亚型的反应活性,其中CYP3A酶的两个特异反应即硝苯地平氧化反应,睾酮6β-羟化反应的活性值和人肝的相应活性接近。同时,二者的CYP3A酶的特异性抑制反应相似。结论贵州小型香猪适用于作为人的CYP3A酶及其相关药物代谢研究的良好动物模型。鉴于CYP3A酶是人体内Ⅰ相反应最主要的药物代谢酶,因此贵州小型香猪作为人体药代动物模型具有一定前景。
- 李健刘勇张江伟魏泓杨凌
- 关键词：肝微粒体
