国家自然科学基金(20407011)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
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- 相关机构：华中科技大学暨南大学更多>>
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 改进的PCR在抑癌基因启动子CpG岛甲基化检测中的应用
- 2006年
- 目的改进聚合酶链反应(PCR),并检验改进后的方法在甲基化检测中的可行性。方法培养人乳腺癌细胞株MCF-7,提取基因组DNA,利用亚硫酸氢盐测序法,用常规、降落及改进PCR分别扩增,比较扩增效果,PCR产物纯化回收后,TA克隆入载体pGEM-T,转化大肠杆菌(E.coliDH5α),筛选阳性克隆,经PCR扩增鉴定后获得阳性重组质粒,测序比对。结果改进后PCR与常规、降落PCR相比,扩增效率增高,二聚体及非特异性扩增减少;测序结果显示,MCF-7细胞基因组DNA中,RASSF lA基因启动子CpG岛是高甲基化的,E-cadherin基因启动子CpG岛未呈现高甲基化状态。结论改进后方法提高了以PCR为基础的甲基化分析的可行性,更适用于基因甲基化状态的检测,并为扩增富含CG的基因启动子区域提供参考。
- 张莉君王先良张迟孙晞徐顺清
- 关键词：甲基化聚合酶链反应E-CADHERINRASSF1A
- 改进的亚硫酸氢钠测序法检测HepG2 RASSF1A基因CpG岛甲基化状态被引量：5
- 2006年
- 目的改进亚硫酸氢钠测序法,并检验改进后方法在甲基化检测中的可行性。方法提取人肝癌细胞株HepG2基因组DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后Ras相关家族1A基因(RASSF1A)启动子序列设计特异引物并结合沉降PCR扩增,T-A载体克隆、测序。结果HepG2细胞RASSF1A基因启动子CpG岛的16个CpG位点均被甲基化。结论改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增,提高PCR效率,更适于基因甲基化状态的检测。
- 张莉君王先良孙晞徐顺清
- 关键词：甲基化聚合酶链反应
- 二恶英类化学物质生物检测方法研究进展被引量：11
- 2007年
- 应用生物检测手段(如生物法、免疫测定及体外受体结合实验等)检测环境污染物是环境检测领域一个研究热点,特别在二恶英类化合物的痕量分析中的作用令人瞩目。本文综述了用于二恶英类化合物筛选的几类生物检测方法的原理和优缺点,对各种方法进行了比较,指出建立二恶英两级检测的体系的合理性以及发展方向。
- 孙晞欧仕益彭喜春
- 关键词：二恶英类化合物生物检测
