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马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白的抗体制备及免疫性: 2014年; 质型多角体病毒的病毒粒子结构蛋白是由衣壳蛋白VP1(Capsid protein,CP)、塔状蛋白VP3(Turret protein,TP)和大突起蛋白VP5(Large protrusion protein,LPP)组成,这3个蛋白分别由病毒基因组片段S1、S4和S7编码.为了解质型多角体病毒结构蛋白的免疫定位情况,本研究从马尾松毛虫质型多角体病毒湖南株中提取病毒核酸,回收、纯化S1、S4和S7片段,经RT-PCR扩增得到对应片段的ORF全长或抗原区的片段,克隆于原核表达载体上,在大肠杆菌BL21菌株中进行了表达,免疫家兔制备了多克隆抗体.Western blot结果显示DpCPV基因组的S1、S4和S7片段分别编码其结构蛋白VP1、VP3和VP5,与推测的结果一致.免疫胶体金的方法也证明S1、S4和S7编码的蛋白定位于病毒粒子衣壳的外表面.本研究首次通过免疫学方法确定了质型多角体病毒结构蛋白在病毒粒子上的定位,为质型多角体病毒的结构蛋白功能和侵染机制研究提供了免疫学方面的基础,对质型多角体病毒的研究有较重要的意义.; 靳亮王洪秀刘金瑾王金昌张莉莉杨罡张小华郑国华; 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒结构蛋白免疫定位

一种茶尺蠖人工饲料的研制被引量：1: 2016年; 本文研制了一种茶尺蠖人工饲料。饲养试验结果表明:用人工饲料饲养茶尺蠖幼虫的成活率达90%;幼虫历期为17.82d,比用茶树新生枝条饲养茶尺蠖幼虫幼虫历期缩短2d;幼虫体重达0.35g,比用茶树新生枝条饲养的茶尺蠖幼虫体重要大,成蛹率达83%。本试验进行茶尺蠖核型多角体病毒的扩增试验结果显示,每头病死茶尺蠖体内的病毒含量约为3.6×10~8PIB/头,能够满足大规模扩增茶尺蠖核型多角体病毒的需要,该饲料具有很好的开发应用前景。; 王金昌靳亮; 关键词：茶尺蠖茶尺蠖核型多角体病毒人工饲料

美国白蛾核型多角体病毒的研究进展被引量：6: 2014年; 美国白蛾(Hyphantria cunea(Drury))属鳞翅目(Lepidoptera)灯蛾科(Arctiidae),是一种重要的国际性检疫害虫,从1979年入侵以来,对我国林业和园林绿化造成重大危害。美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantria cunea Nucleopolyhedrovirus,HcNPV)生物杀虫剂能有效控制寄主美国白蛾种群的数量,在生物防治中起到了重要的控害作用,具有重要的经济、生态和环保价值,应用前景十分广阔。从侵染特点、致病性、流行病毒学、基因组特点及应用前景等方面综述了美国白蛾核型多角体病毒的研究进展。; 吴立华靳亮王金昌王洪秀; 关键词：美国白蛾核型多角体病毒生物杀虫剂

尕海湖湿地泥炭细菌多样性分析被引量：13: 2016年; 【目的】探讨甘南尕海自然保护区湿地泥炭细菌的多样性和群落结构,通过3个不同地点的随机取样,对尕海自然保护区尕海湖的泥炭资源进行细菌多样性分析。【方法】运用Illumina Mi Seq高通量测序平台,对尕海湖湿地泥炭的细菌群落进行宏观基因组测序分析,检测了泥炭3个样本的细菌群落的差异性。【结果】通过对Silva数据库的比对,总共获得了108 096条优化序列代表。尕海自然保护区湿地泥炭样本的优势细菌群主要为Anawerodineaceae-uncultured(厌氧绳菌目-不可培养)、Micromonospora(小单孢菌属)、Brevundimong(短波单孢菌属)和Nocardioides(诺卡氏菌属),3个样品细菌群落组成差异较大。【结论】首次阐明了尕海湖水陆过渡区泥炭地细菌群落的多样性,为下一步开发和利用泥炭的功能菌群、研究泥炭微生物群落生态网络结构如何响应环境变化提供了基础资料。; 靳亮高学梅杜建华王洪秀关丽梅王金昌魏国汶邱小忠; 关键词：高通量测序

马尾松毛虫质型多角体病毒非结构蛋白p44在Bac-to-Bac系统中的表达和亚细胞定位: 2016年; 为探寻马尾松毛虫质型多角体病毒(DpCPV 1)p44蛋白的功能,构建了DpCPV 1基因组S8片段的原核表达体系,表达纯化蛋白后免疫家兔制备了多克隆抗体。利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建了3种重组的杆状病毒质粒(Bacmid-p44、Bacmid-p44-e GFP和Bacmid-e GFP)。转染昆虫细胞Sf9进行表达,通过Western blot检测和蛋白的亚细胞定位观察。Western blot检测结果显示,Bacmid-S8在昆虫细胞Sf9中表达实际蛋白的大小为35 kD,比在原核系统中表达的蛋白(44 k D)略小;利用激光共聚焦显微镜观察p44-e GFP的融合蛋白的亚细胞定位发现,融合p44的绿色荧光蛋白(eGFP)主要聚集在细胞质中,而未融合的eGFP则分布于整个细胞,说明DpCPV 1的p44蛋白定位于细胞质中。; 彭晗王洪秀王金昌关丽梅靳亮万翠香; 关键词：马尾松毛虫质型多角体病毒真核表达细胞定位

核型多角体病毒生活周期及宿主抗病毒反应的研究进展被引量：2: 2020年; 核型多角体病毒(Nucleopolyhedrovirus,NPV)作为一类重要的昆虫病毒,广泛用作绿色生物农药、蛋白质表达系统和哺乳动物基因递送载体,都有相应的商业化产品,如:作为生物农药,在国内商业化的NPV有4种,共35个产品;表达载体有Ac-Bacmid和Bm-Bacmid。对于NPV的防治及利用,离不开对NPV生活周期(细胞入侵、核衣壳入核、基因组复制和表达、病毒组装、出芽)和宿主抗病毒反应的研究。就NPV的生活周期和宿主抗病毒反应进行讨论,并总结相关领域的最新研究进展。; 况文东占智高王金昌关丽梅李江怀靳亮; 关键词：核型多角体病毒抗病毒反应

苹果蠹蛾颗粒体病毒应用研究进展被引量：1: 2015年; 苹果蠹蛾(Cydia pomonella(L.))属鳞翅目(Lepidoptera),卷叶蛾科(Tortricid),小卷蛾亚科(Olethreutinae),是一种重要的世界性蛀果害虫,严重威胁了我国新疆、甘肃和宁夏等地的苹果主产区的生产安全。苹果蠹蛾颗粒体病毒(Cydia pomonella granulovirus,Cp GV)杀虫剂能够高效、专一的防治苹果蠹蛾种群的数量,在生物防治中起到了主要的控害作用,具有十分重要的经济和生态价值。从侵染过程、分子生物学研究(基因组特征)及防治、开发和应用前景等方面综述了苹果蠹蛾颗粒体病毒的研究进展。; 黄晓萍王洪秀戴陈伟王金昌关丽梅靳亮; 关键词：生物杀虫剂

甘南尕海草原毛虫肠道细菌群落结构分析被引量：2: 2017年; 为探讨了甘南尕海自然保护区草原毛虫(Gynaephora aureate Ghou et Ying)肠道细菌群落结构组成,采集甘南尕海高寒草地3个不同地点的4龄草原毛虫幼虫,通过Illumina Hi Seq高通量测序平台对甘南尕海自然保护区草原毛虫肠道细菌群落结构组成进行分析,总共获得了206 098条序列。甘南尕海草原毛虫中肠的细菌由Proteobacteria(变形菌门)、Bacteroidetes(拟杆菌门)、Firmicutes(厚壁菌门)、Actinobacteria(放线菌门)、Tenericutes(软壁菌门)、Verrucomicrobia(疣微菌门)、Fusobacteria(梭杆菌门)、Acidobacteria(酸杆菌)、Deinococcus-Thermus(异常球菌-栖热菌门)和Planctomycetes(浮霉菌门)等10个门组成,优势菌群为Proteobacteria和Bacteroidetes。在属的水平上,Providencia(普罗威登斯菌)含量最丰富,其次是Brevundimonas(单胞菌属)、Bacteroides(拟杆菌属)和Methylotenera(甲基柔膜菌属)。阐明了甘南尕海草原毛虫肠道细菌群落的组成,为研究草原毛虫肠道微生物和草原毛虫对人畜的危害提供理论基础。; 王金昌曾小琴占智高关丽梅靳亮; 关键词：草原毛虫肠道微生物高通量测序

质型多角体病毒侵染、转录调节机制的研究进展被引量：2: 2014年; 质型多角体病毒(Cytoplasmicpolyhedrosisvirus,CPV)隶属呼肠孤病毒科Reoviridae质型多角体病毒属Cypovirus,通常基因组由10个节段双链RNA构成。根据病毒基因组dsRNA片段在聚丙烯酰胺或琼脂糖凝胶中电泳图谱的差异,目前CPV已被分为20个电泳型。依据已有的研究结果,综述了质型多角体病毒(Cypovirus,简称CPV)侵染、转录调节机制的最新研究进展。重点分析了CPV入侵过程;转录过程中CPV衣壳蛋白VP1和塔状蛋白VP3构象变化,促进mRNA起始转录和加帽的作用;大突起蛋白VP5,作为夹状蛋白起到稳定CPV病毒粒子结构的作用;另外,VP5作为mRNA分子伴侣,促进RNA链的解旋和加速链的退火。这些研究结果将为下一步深入研究CPV入侵、转录机制,提供了重要的理论依据和研究线索。; 靳亮彭晗王金昌张莉莉张婷; 关键词：质型多角体病毒病毒入侵结构蛋白

GrNPV病毒的扩增及与生物农药的复配被引量：2: 2017年; 本试验扩增了草原毛虫核型多角体病毒GrNPV。初步的生测试验表明,1×10~8、5×10~7、1×10~7、5×10~6PIB/m L和1×10~6PIB/mL的GrNPV对草原毛虫的致死中时间KT50都为4d左右。生物农药筛选试验表明,噻虫啉和阿维菌素对草原毛虫的致死率较高,死亡率分别为97.60%和88.60%。GrNPV可减少阿维菌素乳油和噻虫啉的用量,同时提高草原毛虫的死亡率。GrNPV与阿维菌素乳油或噻虫啉复配具有很好的杀虫效果。; 王金昌曾小琴靳亮占智高; 关键词：草原毛虫生物防治

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