南京市教育科学“十一五”规划课题(L09002)
- 作品数：6 被引量：23H指数：3
- 相关作者：张志成陈钟鸣戴鼎震张大淦陆静静更多>>
- 相关机构：金陵科技学院南京农业大学更多>>
- 发文基金：南京市教育科学“十一五”规划课题江苏省高等教育教改立项研究课题更多>>
- 相关领域：文化科学农业科学更多>>
- 多重RT-PCR区分PRRSV变异株和经典株方法的建立被引量：1
- 2010年
- 根据GenBank发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒经典株和变异株基因序列,设计合成了2对引物,分别扩增NSP2和N SP 9部分基因片段,建立了一种一次反转录后多重PCR鉴定区分PRRSV变异株和经典株的方法。该方法扩增PRRSV变异株时可获得380 bp的特异性片段,扩增PRRSV经典株时则获得380 bp和680 bp两条特异性片段,根据RT-PCR产物可将两者区分开来。试验证明该方法具有敏感性高、特异性好的特点,是一种快速准确检测PRRSV的方法。
- 张志成范红结陈钟鸣戴鼎震何小明
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株
- 羊痘病毒PCR检测方法的建立和试剂盒的研制被引量：8
- 2011年
- 根据GenBank上已发表的羊痘病毒(CPV)的全基因序列,设计并合成了一对能特异性扩增羊痘病毒的引物,扩增产物大小约为445bp。通过对PCR方法的优化,建立了检测羊痘病毒的PCR方法,并研制出检测试剂盒。同时对试剂盒的敏感性,特异性和稳定性进行了研究。实验结果表明,该试剂盒具有良好的敏感性和特异性,稳定性在-20℃至少可以保存一年。
- 张志成陈丽华陆静静张大淦戴薇陈钟鸣
- 关键词：羊痘病毒敏感性特异性
- 羊痘病毒江苏株P32基因的克隆与序列分析被引量：2
- 2010年
- 根据GenBank中羊痘病毒基因（CPV）的核苷酸序列,设计了1对特异性检测引物。采用此引物检测来自于江苏丹阳的24份发病羊的皮肤痂皮。参考已发表的P32全基因的特异性引物,随机选择4份阳性DNA进行P32片段的扩增。将扩增产物纯化后连接pMD18-T载体,转化DH5α大肠埃希氏菌,选择阳性克隆送基因公司测序。应用DNAStar等分子生物学软件,对所测P32序列与GenBank中的国内外CPV毒株进行了同源性比较和遗传进化树分析。结果发现,24份疑似病料检测全是阳性;4个P32基因扩增产物均为1 023 bp,且样品间P32基因的核苷酸同源性为100%,与GenBank上已发表的的P32基因序列的相似性为97.7%~100%,且中国分离株在进化上属于同一分支。
- 张志成陈琼庞银芳陆静静戴薇张大淦陈钟鸣
- 关键词：羊痘病毒P32基因克隆
