国家自然科学基金(30671688) 作品数:6 被引量:39 H指数:4 相关作者: 王玉珠 张永安 曲良建 杨忠岐 段彦丽 更多>> 相关机构: 中国林业科学研究院 北京市林业保护站 西北农林科技大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技支撑计划 北京市科委项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
光肩星天牛幼虫脂肪体原代培养方法的研究 2009年 以光肩星天牛幼虫脂肪体组织为实验材料进行原代细胞培养,研究原代培养过程中,取材的虫龄、脂肪体组织块大小、组织块是否贴壁及培养表面等因素对原代培养及其细胞在体外分离和增殖的影响。结果表明,较高龄的光肩星天牛幼虫(4龄或8龄)的较完整的脂肪体组织,在同培养表面紧密贴附的情况下,原代培养的成功率较高,其细胞在体外从组织块中游离出来并增殖的几率较大。 张寰 李瑄 张永安 秦启联 苗麟 王玉珠 曲良建 温发园 张爱君 杨青关键词:昆虫细胞培养 光肩星天牛 原代培养 细胞增殖 美国白蛾核型多角体病毒多角体蛋白的SDS-PAGE分析 被引量:6 2009年 Hyphantria cuea nucleopolyhedrovirus(HcNPV) and several other nucleopolyhedrosis was extracted by differential centrifugation,and purified with sucrose gradient centrifugation method.Polyhedrin was gotten and analysed by SDS-PAGE.It indicated that most of those proteins had 32 KD protein band,and with 64 KD protein,and might be the main protein dimer with the structure and found Hyphantria cunea nuclear polyhedrosis virus protein in 18 KD department had a specific band. 薛建杰 曲良建 王玉珠 张永安 唐明 杨唯一关键词:HCNPV 核型多角体病毒 多角体蛋白 SDS-PAGE 美国白蛾核型多角体病毒传播途径及对寄主的持续作用 被引量:19 2009年 用不同浓度的美国白蛾核型多角体病毒亚致死剂量感染美国白蛾4龄和5龄幼虫,并分别收集不同处理的残余带毒试虫进行室内传代饲养。结果表明:病毒对寄主昆虫不仅具有直接致死作用,而且对蛹重和雌虫产卵量均有明显影响,尤其是对亲代、子一代和子二代寄主昆虫。对病毒传播途径的研究证实HcNPV可通过多种途径传播到寄主种群中。 段彦丽 曲良建 王玉珠 张永安 陶万强 关玲 杨忠岐关键词:美国白蛾核型多角体病毒 利用昆虫病毒恢复和构建稳定森林生态系统的理论与实践 被引量:6 2007年 以恢复和构建相对稳定的生态系统实现害虫持续控制为理念,对我国林业生物灾害的现状、生物防治技术的现状及问题进行分析与展望,并从森林生态系统的概念、稳定生态系统的标准、恢复和构建森林生态系统的方法等几个方面进行了探讨。同时,根据4种昆虫病毒杀虫剂的实践结果,分析了昆虫病毒杀虫剂在恢复和构建稳定生态系统中所发挥的作用,说明昆虫病毒是构建和恢复以害虫为核心的稳定生态系统的有效措施之一。 张永安 曲良建 王玉珠关键词:森林生态系统 森林害虫 昆虫病毒 美国白蛾核型多角体病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用 被引量:2 2010年 为了建立对昆虫核型多角体病毒(nucleopolyhedrovirus)进行定量检测方法,本研究选用美国白蛾Hyphantria cunea核型多角体病毒的polyhedrin基因为目的基因,经引物设计、PCR扩增、目的片段与载体连接转化以及重组质粒的鉴定,并对重组质粒标准品和样品DNA进行检测,构建出美国白蛾核型多角体病毒SYBR GreenⅠ荧光定量标准曲线。统计学分析显示标准品浓度的对数值与Ct值之间存在良好的线性关系(R=0.998)。该方法的检测灵敏度为101~102拷贝/μL,线性范围达5个数量级,扩增产物形成单一的特异性熔解峰,组内组间的变异系数均小于3%。根据已建立的方法对不同感染时间段的感病幼虫进行检测,每毫克幼虫样本内病毒polyhedrin基因拷贝数增殖倍数对数值与感染时间(d)呈正相关(R=0.987)。这些结果表明,建立的美国白蛾核型多角体病毒荧光定量PCR检测方法是可靠的,具有灵敏度高、重复性好等特点,可为昆虫核型多角体病毒体内增殖动态研究及昆虫病毒的标准化生产提供参考。 乔鲁芹 曲良建 王玉珠 张永安 杨忠岐 陶万强 关玲关键词:美国白蛾核型多角体病毒 SYBR 荧光定量PCR 基于PCR方法的美国白蛾核型多角体病毒早期检测 被引量:7 2009年 根据美国白蛾核型多角体病毒(Hyphantria cunea nucleopolyhedrovirus,HcNPV)pe38基因设计两对引物,利用PCR法检测HcNPV基因组DNA,分别扩增出长为994和614bp的片段,经测序确定为HcNPV pe38基因片段。应用两对引物分别检测了美国白蛾病虫的总DNA和获得的病毒多角体,其检测最低量分别为1fg病虫总DNA和3~4OBs/mL。用不同浓度的病毒感染试虫后,不同时间取其血淋巴用PCR方法检测。结果表明,接毒量为3.53×109OBs/mL时,24h后可检出病毒DNA;接毒量为3~4OBs/mL时,120h后可检出。病毒可检出时间随接毒浓度的递减而延后。 王文欢 曲良建 王玉珠 张永安关键词:美国白蛾核型多角体病毒 生物防治 PCR