上海市教育委员会重点学科基金(S3070) 作品数:4 被引量:16 H指数:2 相关作者: 施志仪 靳雨丽 李文娟 郝莹莹 韩健 更多>> 相关机构: 上海海洋大学 更多>> 发文基金: 上海市教育委员会重点学科基金 上海市基础研究重大(重点)项目 上海市博士后科研资助计划资助 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 天文地球 更多>>
甲状腺激素受体在大菱鲆组织细胞中的表达及其与甲状腺激素的关系 2010年 为了探讨甲状腺激素受体在大菱鲆(Scophthalmus maximus)体内的表达情况及在细胞水平三碘甲状腺原氨酸(T3)对甲状腺激素受体(TR)表达量的影响,利用荧光定量PCR法检测了大菱鲆8个组织中甲状腺激素受体TRαA、TRβ的表达量,并设计了0,50,75,100和200 nmol/L 5个不同浓度的T3处理大菱鲆肾细胞(SMKC),采用实时荧光定量PCR法测定T3处理后甲状腺激素受体TRαA、TRβ的表达量。结果表明,甲状腺激素受体TRαA、TRβ在大菱鲆不同组织中的表达量各不相同,但两者均在肾脏组织中表达量最高。在不同浓度T3处理后甲状腺激素受体的表达量存在明显的差异,在低浓度条件下,TRαA、TRβmRNA的表达量增加,当T3浓度达到100 nmol/L时,TRαA、TRβmRNA表达量明显降低,说明50,75 nmol/L的T3能够引起细胞中甲状腺激素受体TRαA、TRβ表达量的增加,而100,200 nmol/L的T3会相对抑制细胞中甲状腺激素受体TRαA、TRβ的表达量。 田娟 施志仪关键词:大菱鲆 牙鲆碱性磷酸酶基因调控序列的功能分析及甲状腺激素对其调节作用 被引量:1 2010年 为分析牙鲆碱性磷酸酶基因5'调控区和第一内含子调控序列的功能,本研究运用DNA重组技术将PCR扩增得到的牙鲆碱性磷酸酶基因的5′调控区序列、第一内含子序列及5′调控区和第一内含子串联序列分别插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pAcGFP1-1中,得到pAcGFP1-5′ALP、pAcGFP1-Intron1和pAcGFP1-AI报告基因表达载体。通过脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)并检测荧光信号。转染后细胞状态良好,24 h后发现,在倒置荧光显微镜下均可看到不同强度的绿色荧光信号,且荧光信号随时间的延长而增强,其中转染pAcGFP1-AI后的荧光信号强度最强。以上结果表明,牙鲆碱性磷酸酶基因5′调控区和第一个内含子序列均具有启动子活性,且第一内含子与5′调控区存在协同效应,两者协同能增强基因的表达。为了解甲状腺激素T3对调控序列启动子活性的调节作用,用不同浓度的T3处理转染的CHO细胞,24 h后发现加入50、75和100 nM的T3都增强了绿色荧光蛋白的表达,而且信号强度随T3浓度的增加而增强。这表明甲状腺激素T3对牙鲆碱性磷酸酶基因调控序列的启动子活性有一定的增强作用。本研究为深入阐明牙鲆碱性磷酸酶基因转录表达的分子机制提供了实验依据。 施志仪 胡燕林 张俊玲 靳雨丽关键词:牙鲆 碱性磷酸酶 第一内含子 甲状腺激素T3 基于高通量测序的三角帆蚌生物矿化形成珍珠的分子基础研究 在中国淡水珍珠养殖产业中,高产低值现象十分严重,急需提高我国淡水珍珠颗粒大小和品质,进而提升珍珠养殖效益,这也符合水产养殖转型升级与绿色高质量发展的要求。 外套膜作为首选的育珠部位,空间小、组织薄,限制了大核珍珠的培育... 轩兴荣关键词:三角帆蚌 高通量测序 基质蛋白 基因筛选 文献传递 运用微电极技术测定三角帆蚌外套膜Ca^(2+)流量的研究 被引量:8 2011年 Ca既是珍珠和贝壳中的主要组成成分(CaCO3占95%以上),又是普遍存在的细胞内第二信使,在生物体内承担着非常重要生理功能。生物矿化的研究表明外套膜细胞在珍珠和贝壳生长中起着非常重要的作用[1,2],并且Ca^2+在外套膜中也保持一个较高的水平^[3]。研究贝类Ca代谢,特别是外套膜组织的Ca^2+跨膜转运,对进一步阐明贝壳以及珍珠形成机理,提高优质珠的产量都有着重要意义。 李文娟 施志仪 郝莹莹 韩健 靳雨丽 叶显峰关键词:三角帆蚌 三角帆蚌Nacrein基因克隆、蛋白提纯及其对珍珠晶体成型的影响 被引量:7 2010年 为研究三角帆蚌Nacrein蛋白对珍珠晶体成型的影响,通过巢式及3′-RACE PCR对三角帆蚌基质蛋白Nacrein基因3′端序列进行克隆,得到850bp碱基片段,分析表明其与合浦珠母贝同源基因序列相似度为56%,与马氏珠母贝相似度为50%。试验通过水提法初步分离出珍珠质水溶性基质蛋白,并采用快速蛋白液相色谱(fast protein liquid chromatography,FPLC)分离出分子量约为60kD的Nacrein蛋白。此外,采用配对试验设计,对试验组外套膜组织培养样品加入Nacrein蛋白,研究Nacrein蛋白对晶体成型的影响,结果显示,加入Nacrein蛋白的试验组结晶成棱形状;而未加Nacrein蛋白的对照组结晶成雪花状,而且在晶体形成的时间上,试验组也较之对照组要早。研究表明,Nacrein蛋白能加速外套膜组织分泌的钙质形成棱状结晶,从而对晶体成型产生影响。本研究为进一步研究基质蛋白对生物矿化的作用提供试验依据,对珍珠培育生产有一定指导意义。 韩健 李文娟 施志仪 郝莹莹 靳雨丽