国家自然科学基金(s20635010)
- 作品数：7 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王建华钱小红陈旭伟蔡耘王京兰更多>>
- 相关机构：东北大学军事医学科学院北京蛋白质组研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：理学生物学农业科学航空宇航科学技术更多>>
- 同系物标记结合凝胶电泳和质谱技术用于蛋白质N端肽鉴定及相对定量被引量：1
- 2008年
- 通过酸酐同系物标记蛋白质的N-末端,经过凝胶电泳分离,使用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪进行鉴定,建立了一种基于化学标记和质谱技术的、用于蛋白质的N-末端鉴定和相对定量新方法。标记后的蛋白质的N端肽以相差14 Da的成对峰形式在质谱中出现,而非N-末端肽则是以单峰呈现,从而实现了末端肽的特异性识别;通过端肽的信号强度对3种标记蛋白质的不同比例的混合溶液实现了相对定量分析。
- 赵丽艳周春喜张养军刘新蔡耘钱小红
- 关键词：化学修饰电泳分离蛋白质组学
- 离子液体1，3-二丁基眯唑氯代盐为添加剂在溶菌酶结晶中的表现性能研究
- 2009年
- 离子液体（IL）在有机合成、萃取分离、电化学等领域广泛应用。Garlitz等首次采用离子液体硝酸乙胺作为沉淀剂进行了溶菌酶的结晶实验，发现加入离子液体后溶菌酶在液相中具有更高的稳定性，并且蛋白质的单分散性也得到提高。Hekmat等对烷基胺类离子液体在蛋白质结晶中的表现进行了深入研究，结果表明，采用离子液体为添加剂有助于减少晶体多态性现象的发生。
- 姬燕培陈旭伟王建华
- 关键词：离子液体溶菌酶添加剂蛋白质结晶氯代丁基
- 基于强阳离子交换色谱与等电聚焦的磷酸化蛋白质组学分离策略比较被引量：4
- 2012年
- 比较分析了强阳离子交换(SCX)与等电聚焦(IPG-IEF)技术在磷酸化蛋白质组学中的应用。采用3种标准磷酸化蛋白对SCX与IPG-IEF两种技术对磷酸化肽段富集的有效性进行考察。以HepG2细胞为复杂样本,考察SCX与IPG-IEF在实际样本中的应用情况。对SCX与IPG-IEF技术在18O标记的磷酸化蛋白质组定量研究中的应用情况进行考察。蛋白鉴定采用高准确度、高灵敏度、高分辨率的LTQ-FTICR-MS/MS质谱仪。实验表明:SCX和IPG-IEF在大规模磷酸化肽段分离过程中均有效;在复杂样本中,SCX技术的分离效果优于IPG-IEF;IPG-IEF的重复性好于SCX;在磷酸化蛋白质组定量分析结果表明,IPG-IEF技术的稳定性优于SCX。本研究为根据不同实验目的而选择适当的磷酸化蛋白质组预分离技术提供了有用信息。
- 隋少卉董俊军王京兰蔡耘钱小红
- 关键词：强阳离子交换等电聚焦
- 改进的^18O同位素标记法标记蛋白质多肽被引量：3
- 2010年
- 针对18O同位素标记反应两个重要影响因素——肽段分散度和胰酶灭活方法,进行了标记条件的改进和灭活方法的优化。在H218O中加入RapigestTM SF助溶剂并微波辅助加热,使α-酪蛋白胰酶酶切肽段的标记效率得到明显改进(18O/16O峰面积比值>99%)。标记后,对胰酶进行还原烷基化化学修饰彻底灭活,使标记后的肽段稳定性显著提高,放置6d不发生回交反应。对标准蛋白质甲状腺球蛋白酶切肽段混合物标记后的质谱实验结果表明:优化的标记方法能快速稳定地标记蛋白质酶切多肽。
- 赵焱卢庄贾伟应万涛钱小红
- 关键词：多肽蛋白质组
- 双水相体系选择性分离维生素B12及其测定
- 2009年
- 维生素B12是人体必须的营养物质，可参与体内甲基转换及叶酸代谢，促进神经鞘脂类的合成及维持有鞘神经纤维的完整。维生素B12作为营养强化剂广泛应用于保健食品，但摄入过量可能引起过敏反应，甚至过敏性休克。故建立灵敏度高、特异性强的分析方法十分必要。常见的维生素B12定量分析方法包括微生物分析法、化学发光法、荧光光度法、原子吸收法等。
- 唐仕松陈旭伟王建华
- 关键词：维生素B12双水相体系神经纤维营养强化剂过敏性休克
- PVC固载离子液体选择性分离碱性蛋白的研究
- 2009年
- 近年来，离子液体被广泛应用于生物大分子的萃取分离。对于液液萃取（包括离子液体微乳和双水相萃取），离子液体消耗量比较大，而且离子液体黏度较大造成其定量操作十分困难，因此离子液体的固载化越来越受到人们重视。离子液体的固载主要有化学方法和物理方法。化学方法通常是离子液体的阳离子基团或阴离子基团与固载材料上的基团反应；或者在固定化过程中生成离子液体或离子复合物。本实验利用聚氯乙烯上的氯原子与甲基咪唑生成离子液体实现其固定化，并研究了萃取蛋白质的性能。
- 舒杨陈旭伟王建华
- 关键词：离子液体固载化碱性蛋白PVC萃取分离化学方法
- 蚕丝蛋白用于分离富集细胞色素c的研究被引量：2
- 2009年
- 近年来，固相萃取被广泛用于蛋白质分离富集，萃取剂包括离子交换树脂，纳米材料，印迹材料。蚕丝是一种天然蛋白纤维，表面含氨基、醇羟基、酚羟基等官能团，是分离富集的有效载体。实验研究了蚕丝蛋白与血红素蛋白的相互作用，发现其对血红蛋白和细胞色素c表现完全不同的吸附，即在一定条件下血红蛋白不被吸附，而细胞色素c则被完全吸附。据此建立了选择性分离细胞色素c的新体系。
- 陈明丽颜晓蕊王建华
- 关键词：细胞色素C蚕丝蛋白离子交换树脂纳米材料血红蛋白血红素蛋白
