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国家自然科学基金(30671609)

作品数:6 被引量:19H指数:3
相关作者:王玉凤桂建芳赵占克郭秋红胡炜更多>>
相关机构:华中师范大学中国科学院湖北大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金淡水生态与生物技术国家重点实验室开放谭题基金更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 6篇生物学
  • 1篇农业科学

主题

  • 3篇克隆
  • 2篇银鲫
  • 2篇片段
  • 2篇基因
  • 2篇彩鲫
  • 1篇多克隆
  • 1篇多克隆抗体
  • 1篇荧光
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇组织特异性
  • 1篇稀有
  • 1篇下调
  • 1篇卵子发生
  • 1篇卵子发生过程
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫荧光
  • 1篇免疫荧光定位
  • 1篇抗体
  • 1篇抗体制备

机构

  • 6篇华中师范大学
  • 4篇中国科学院
  • 1篇湖北大学

作者

  • 6篇王玉凤
  • 3篇桂建芳
  • 2篇赵占克
  • 1篇江文波
  • 1篇曾庆韬
  • 1篇陈丽娟
  • 1篇杨玉慧
  • 1篇刘艳玲
  • 1篇赵浩斌
  • 1篇郑雅
  • 1篇曹梦西
  • 1篇杜新征
  • 1篇胡炜
  • 1篇郭秋红
  • 1篇周励

传媒

  • 4篇水生生物学报
  • 1篇Curren...
  • 1篇遗传

年份

  • 2篇2010
  • 1篇2009
  • 2篇2008
  • 1篇2007
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
Hira基因产物在银鲫和彩鲫卵子发生过程中的动态变化被引量:5
2010年
为进一步研究Hira基因在卵子发生和雌核发育过程中的作用,通过原位杂交和免疫荧光定位的方法检测了Hira mRNA和蛋白质在雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫卵子发生过程中的动态变化。结果表明,银鲫和彩鲫卵子发生过程中Hira基因转录产物的变化基本一致,在Ⅰ期卵母细胞的细胞核中大量表达,至Ⅱ期卵母细胞时转至细胞质中均匀分布,在Ⅲ期卵母细胞中,杂交信号逐渐移向细胞的周边,到Ⅳ期时随着卵黄物质大量积累,杂交信号几乎不见。HIRA蛋白在银鲫和彩鲫卵子发生过程中的变化略有差别。HIRA蛋白在银鲫Ⅰ期卵母细胞中没有表达,在Ⅱ期卵母细胞的细胞质中有弱表达,在Ⅲ期早期卵母细胞的周边有强烈表达;而在彩鲫Ⅰ期卵母细胞中就有HIRA蛋白的弱表达,至Ⅱ期时HIRA蛋白在细胞质中大量表达,Ⅲ期早期卵母细胞的细胞质中有弱表达。在银鲫和彩鲫Ⅲ期末和Ⅳ期卵母细胞中都很难观察到荧光信号。Hira mRNA和蛋白质在银鲫和彩鲫早期卵母细胞中有较强表达,且在银鲫和彩鲫卵子发生过程中没有显著差异,说明其可能对于脊椎动物卵子发生和减数分裂没有显著影响,而是在受精和/或胚胎发育过程中起作用。
郭秋红赵占克王玉凤桂建芳
关键词:雌核发育银鲫卵子发生免疫荧光定位
稀有鮈鲫脑芳香化酶cDNA片段的克隆与表达分析被引量:4
2009年
芳香化酶(P450arom)是雌激素合成过程中的关键酶,在性别分化中起重要作用。鱼类存在卵巢性和脑型两种芳香化酶,分别由Cyp19a和Cyp19b编码。稀有鮈鲫作为我国特有的实验动物,尚无其芳香化酶的有关资料,其性别分化机制亦不清楚。本研究采用RT-PCR的方法以简并引物扩增了稀有鮈鲫脑型芳香化酶基因Cyp19b的部分序列,其长度为1070bp,编码357个氨基酸残基,具有典型的芳香化酶结构域。RT-PCR分析发现该基因主要在稀有鮈鲫的脑中表达,在性腺、肠、肾中也有表达;其在雌、雄脑中的表达差异不显著。在胚胎发育阶段,Cyp19b的表达从囊胚期开始,至神经胚期达到较高水平,随后下降,孵化期又有所增强,孵化10d后维持在高水平。这些结果说明Cyp19b以脑中表达为主,可能在稀有鮈鲫神经系统发育和脑的性别分化中有重要作用。
曹梦西杨玉慧江文波王玉凤胡炜赵浩斌
关键词:芳香化酶基因克隆
银鲫HIRA多克隆抗体的制备及组织特异性表达分析被引量:2
2008年
Hir/Hira基因家族的成员广泛存在于多种生物体中,但有关其在生物体发育过程中的具体功能还不甚清楚。对果蝇的研究表明,dHira基因产物可能在受精时精核的解凝过程和雄性原核的正常形成过程中起重要作用。本研究组前期已经分别克隆出雌核发育银鲫和两性生殖彩鲫的Hira基因(cagHira和caHira),本实验在银鲫cagHira基因的特异区域,设计一对引物,以银鲫成熟卵母细胞总RNA逆转录出的cDNA为模板,扩增出cagHira的特异片段。再将该片段克隆到原核表达载体pET-32a上,转化BL21(DE3)菌株,经诱导后表达出融合蛋白。分析表明,该融合蛋白主要以包涵体形式表达。以纯化的融合蛋白作为抗原去免疫小鼠,制备多克隆抗血清,经蛋白质印迹分析检测,该抗血清(稀释到1∶2000)与包涵体蛋白识别反应良好,确定获得了具有高效价的特异性银鲫CAGHIRA多克隆抗体,为进一步研究HIRA在鱼类发育和雌核生殖过程中的作用奠定了基础。对银鲫HIRA蛋白的组织特异性表达分析发现,该蛋白仅在成熟卵巢组织中特异表达,故表明HIRA可能对鱼类卵子发生和/或早期胚胎发育具有重要作用。
周励王玉凤桂建芳
关键词:银鲫抗体制备
彩鲫hira基因片段的克隆及表达分析被引量:3
2007年
hir/hira基因最先作为组蛋白基因表达的一种负调节因子从酵母中被鉴定出来。现已证实,HIRA包含一组保守的蛋白家族,广泛存在于低等真核生物、无脊椎动物和脊椎动物等多种生物体当中,为生命发育所必需。关于hira基因在动物发育过程中的具体作用研究还不是很多,为了进一步探讨hira基因在鱼类发育过程中的作用,作者根据已知hira基因保守序列设计一对简并引物,分别以彩鲫基因组DNA和卵巢cDNA为模板克隆了彩鲫hira基因(Cahira)片段,该片段基因组序列为2181bp,基因组片段含有6个内含子,长度分别为118bp、275bp、372bp、84bp、472bp、86bp;cDNA序列为759bp,编码253个氨基酸,具有5个WD结构域。对其氨基酸序列进行比较,结果表明,彩鲫hira基因的氨基酸序列与河、爪蟾、鸡、小鼠、人的hira基因氨基酸序列具有非常高的同源性,分别高达92%、89%、89%、87%和88%。组织特异性表达分析表明,所检测的彩鲫组织除了精巢和肌肉中未检测到hira基因表达外,其余组织均有表达。其中卵巢和肝脏中表达很强,而在脑、心、脾、肾中表达较弱,说明该基因可能在维持卵巢和肝脏组织的功能方面起一定作用。
杜新征王玉凤桂建芳
关键词:彩鲫克隆
Wolbachia感染导致果蝇dHira基因表达下调被引量:2
2008年
Intracellular Wolbachia bacteria are obligate, maternally-inherited, endosymbionts found frequently in arthropods and other invertebrates. The wide occurrence of Wolbachia may be partially due to their ability to alter host reproduction via mechanisms including cytoplasmic incompatibility (CI), parthenogenesis, feminization and male killing. The molecular mechanisms of Wolbachia/host interaction remain to be elucidated. In this study, Drosophila infected with Wolbachia collected from Wuhan (Hubei province), Liuku (Yunnan Province) and Tianjing, China were treated with tetracycline to delete Wolbachia and the transcriptional expression of dHira was analysed by RT-PCR and quantitative RT-PCR to assay the effect of Wolbachia infection on hosts. The dHira transcript level was significantly increased (P<0.01)after depletion of Wolbachia in D.melanogaster. This indicates that the infection of Wolbachia may down-regulate the transcription of dHira. Considering that dHira is involved in the decondensation of the sperm nucleus after fertilization and the formation of a normal male pronucleus, we suggest that Wolbachia may affect the host reproduction, at least partially, via the dHira pathway .
陈丽娟郑雅王玉凤曾庆韬刘艳玲
关键词:果蝇
组蛋白伴侣在发育过程中的功能被引量:8
2010年
组蛋白伴侣能够协助组蛋白参与染色质的解凝和组装,从而调控基因的表达,对动植物的配子发生、受精、胚胎发育以及生长、衰老等发育过程都具有重要作用。文章主要对目前研究较多的组蛋白伴侣—核质蛋白、CAF-1、HIRA、ASF1/CIA及NAP1在发育过程中的相关功能作一综述。
赵占克王玉凤
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