浙江省科技厅基金(2006C33014)
- 作品数：10 被引量：6H指数：1
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- 氟康唑对热带念珠菌活性氧和线粒体膜电位的影响被引量：1
- 2011年
- 为了探讨氟康唑作用机制,观察它对热带念珠菌作用后存活率、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)、线粒体膜电位(Mitochondrial membrane potential,△Ψm)和细胞周期的变化。参照NCCLS M27-A方案的微量稀释法测定氟康唑对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);热带念珠菌与不同浓度氟康唑共同培养后用流式细胞术(Flow cytometry,FCM)分析热带念珠菌存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期的变化。结果表明,氟康唑作用后,热带念珠菌氟康唑耐药株的存活率、ROS、线粒体膜电位△Ψm和细胞周期各期比例均没有明显变化;而热带念珠菌氟康唑敏感株的存活率和线粒体膜电位△Ψm明显下降,ROS明显升高,而且大部分热带念珠菌阻滞于G2/M期,并出现明显凋亡峰,呈一定的时间剂量依赖关系。自由基清除剂谷胱甘肽抑制热带念珠菌ROS的产生,阻止细胞周期G2/M期阻滞和降低凋亡。由此可见,氟康唑可能通过刺激热带念珠菌产生过多ROS,并使线粒体膜电位△Ψm下降,从而诱导热带念珠菌凋亡。
- 邱莲女周永列胡庆丰朱永泽郭伟吕火烊
- 关键词：热带念珠菌氟康唑活性氧线粒体膜电位G2/M期阻滞流式细胞术
- 流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌药物敏感性的评价被引量：1
- 2010年
- 目的比较评介流式细胞术快速药敏试验(FCST)和CLSI M27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUN-GUS3半固体培养基法检测白色假丝酵母菌对常用抗真菌药物敏感性符合率。方法用FCST法和CLSI M27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3同时测定46株临床分离的白色假丝酵母菌对氟康唑(FLC)、酮康唑(KET)、伊曲康唑(ITC)、伏立康唑(VRC)等药物的药敏性并进行比较分析。结果 FCST法与M27-A2比较,FLC、KET、ITC和VTC的符合率分别为91.3%、100.0%、80.4%和93.5%;FCST法与ATBF3比较,FLC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、91.3%、和93.5%。结论 FCST法具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点;FCST法与M27-A2、ATBF3法测定FLC、KET、ITC和VRC对白色假丝酵母菌的敏感性有较高的符合率,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景。
- 周永列胡庆丰朱永泽邱莲女吕火烊
- 关键词：流式细胞术白色假丝酵母菌抗真菌微生物敏感性试验最低抑菌浓度
- 氟康唑诱导热带念珠菌凋亡机制的研究
- 2010年
- 目的观察氟康唑对热带念珠菌作用后存活率、活性氧(ROS)、线粒体膜电位(△Ψm)和细胞周期的变化,初步探讨其作用机制。方法参照CLSIM27A方案中的微量稀释法测定氟康唑对热带念珠菌的最低抑菌浓度(MIC);热带念珠菌在加入不同浓度氟康唑培养后,流式细胞术(FCM)分析荧光探针碘化丙啶(PI)标记存活率、荧光探针双氢罗丹明(DHR)标记ROS、荧光探针四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)标记线粒体△Ψm和DNA-Prep试剂盒标记细胞周期的变化。结果氟康唑作用后,热带念珠菌氟康唑耐药株存活率、ROS、线粒体△ψm和细胞周期各期比例均没有明显变化;而热带念珠菌氟康唑敏感株存活率和线粒体△ψm明显下降,ROS明显升高,而且大部分热带念珠菌阻滞于G2/M期,G01期热带念珠菌减少,呈一定的时间剂量依赖关系;且ROS升高与线粒体△Ψm成正相关(r=0.913,P<0.05)。结论氟康唑可能提高刺激后热带念珠菌产生ROS,导致线粒体△ψm的改变和G2/M阻滞,从而诱导热带念珠菌凋亡。
- 邱莲女周永列胡庆丰朱永泽郭伟吕火祥
- 关键词：热带念珠菌氟康唑活性氧线粒体膜电位G2/M期阻滞流式细胞术
- 流式细胞术与M27-A方案、ATB法对光滑念珠菌药敏试验的比较
- 2010年
- 目的:评价流式细胞术快速药敏试验(FCST)和M27-A方案微量稀释法、ATB FUNGUS3半固体培养基法检测光滑念珠菌对唑类药物敏感性符合率。方法:用FCST法和微量液体稀释法、ATB FUNGUS3法同时检测31株临床分离的光滑念珠菌对康唑(FLC)、酮康唑(KEC)、伏立康唑(VRC)、伊曲康唑(ITC)等的药物敏感试验并进行比较分析。结果:FCST法与微量法比较,FLC、KEC、VRC和ITC的符合率分别为83.9%、90.3%、87.1%和83.9%;FCST法与ATBF3比较,FLC、VRC、和ITC的符合率分别为87.1%、90.3%和87.0%。结论:FCST法具有快速、简便、易于判断MIC值、准确性高等优点;FCST法与微量法、ATBF3法测定FLC、KEC和VRC对光滑念珠菌的敏感性有较高的符合率,在临床真菌药物敏感试验中具有很大的应用前景。
- 李爱娟周永列胡庆丰朱永泽吕火烊邱莲女
- 关键词：流式细胞术光滑念珠菌微生物敏感性试验最小抑菌浓度
- 氟康唑对光滑假丝酵母菌及线粒体膜电位的影响
- 2010年
- 目的观察氟康唑对光滑假丝酵母菌作用后存活率、细胞周期、活性氧(ROS)和线粒体膜电位的变化,初步探讨其作用机制。方法采用NCCLS M27-A微量稀释法和ATBF3法测定临床分离的光滑假丝酵母菌对氟康唑的最低抑菌浓度(MIC)值;光滑假丝酵母菌氟康唑敏感株与光滑假丝酵母菌氟康唑耐药株与不同浓度氟康唑共同培养后,流式细胞术(FCM)分析荧光探针碘化丙啶(PI)标记存活率、DNA-Prepkit试剂盒标记细胞周期、荧光探针双氢罗丹明(DHR)标记ROS和荧光探针四氯四乙基苯并咪唑基羰花青碘化物(JC-1)标记线粒体膜电位的变化。结果氟康唑敏感株MIC在2μg/ml,氟康唑耐药株MIC>128μg/ml;氟康唑作用后,氟康唑耐药株存活率、细胞周期、ROS和线粒体膜电位均无明显变化;而氟康唑敏感株存活率明显下降,ROS和线粒体膜电位明显升高,呈一定的剂量依赖关系;大部分光滑假丝酵母菌阻滞于G2-M期,并出现subG1凋亡峰。结论光滑假丝酵母菌过多ROS的产生和线粒体膜电位去极化可能是氟康唑诱导光滑假丝酵母菌凋亡的重要机制。
- 邱莲女周永列胡庆丰郭伟朱永泽吕火烊
- 关键词：光滑假丝酵母菌氟康唑活性氧线粒体膜电位流式细胞术
- 流式细胞术快速检测白色念珠菌药物敏感性与CLSI M27-A2法、ATB-FUNGUS 3法符合性的比较
- 2010年
- 目的比较评价流式细胞术快速药敏试验(FCST)和CLSI M27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3(ATBF3)半固体培养基法检测白色念珠菌对常用抗真菌药物敏感性符合率。方法用FCST法和CLSIM27-A2常量液体培养基稀释法、ATB FUNGUS3(ATBF3)同时测定46株临床分离的白色念珠菌对氟康唑(FLC)、酮康唑(KEC)、伊曲康唑(ITC)、伏立康唑(VRC)等药物的敏感性并进行比较分析。结果 FCST法与M27-A2比较,FLC、KEC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、100%、80.4%和93.5%;FCST法与ATBF3比较,FLC、ITC和VRC的符合率分别为91.3%、91.3%、和93.5%。结论 FCST法具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点;FCST法与M27-A2、ATBF3法测定对白色念珠菌FLC、KEC、ITC和VRC的敏感性有较高的符合率,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景。
- 周永列胡庆丰朱永泽邱莲女吕火烊张玉霞
- 关键词：流式细胞术白色念珠菌药物敏感性试验最小抑菌浓度
- 流式细胞术快速检测白色念珠菌对伊曲康唑敏感性方法的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:建立流式细胞术快速检测白色念珠菌对伊曲康唑敏感性试验(FCST)的方法。方法:以碘化丙锭(PI)为荧光染料,使用活菌和乙醇处理的死菌在SS/log(FL3)图上进行设门,用流式细胞术检测标准菌株的死菌比率。使用标准菌株对本法与CLSI常量稀释法进行平行测定,得出本法的M IC判断标准。同时用此法对30株临床菌株进行双份平行检测并与NCCLS常量稀释法(M27-A)进行比较。结果:经过调整电压把活菌与死菌在SS/log(FL3)图上分为两群分界清晰的细胞。对30株临床分离菌株的检测发现,本法具有很好的重复性,与M27-A比较,结果无显著性差异(P=0.141)。结论:本法具有快速、敏感、可靠的优势,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景。
- 沈蓓琼胡庆丰吕火祥朱永泽周永列
- 关键词：流式细胞术白色念珠菌伊曲康唑最小抑菌浓度稀释法标准菌株
- 流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性的研究被引量：3
- 2009年
- 目的建立流式细胞术快速检测白色假丝酵母菌对氟康唑敏感性试验(FCST)的方法。方法用FCST法对标准菌株在不同实验条件下检测以探讨最佳实验条件,对FCST法与NCCLS M27-A法进行对比,得出最低抑菌浓度(MIC)判断标准;同时对30株临床菌株进行FCST法双份平行检测并与M27-A进行比较。结果流式细胞术快速检测不同比例死菌与活菌混合液检测值及设定值具有良好的相关性(r=0.999);MIC判断标准为死菌比率在连续系列管中高浓度管比低浓度管出现>50.0%的增长,并且保持稳定或连续增长,则可判定高浓度管药物浓度为该菌的MIC值;对30株临床分离菌株的检测发现,该法具有很好的重复性,与M27-A比较,两者一致率为93.3%,结果差异无统计学意义(P>0.05),并有很好的相关性(r=0.822)。结论FCST具有快速、重复性好、易于判断MIC值、准确性高等优点,在临床抗真菌药物敏感性检测中具有很大的应用前景。
- 胡庆丰周永列吕火烊朱永泽王珍妮邱莲女张玉霞
- 关键词：流式细胞术白色假丝酵母菌氟康唑最低抑菌浓度
- 氟康唑对白色假丝酵母菌活性氧和线粒体膜电位的影响被引量：1
- 2010年
- 近年来随着广谱抗生素、免疫抑制剂和细胞毒药物的广泛使用以及介入治疗、恶性肿瘤和器官移植的增加，深部真菌尤其是念珠菌的感染率迅速上升。氟康唑作为抗念珠菌属的常用药，随着临床使用率增高，白色假丝酵母菌对氟康唑的耐药率有增加的趋势。近年研究发现真菌的凋亡与哺乳动物细胞的凋亡有着许多相似之处，真菌的凋亡过程中，线粒体也发生一系列的生理变化。
- 邱莲女周永列胡庆丰朱永泽郭伟
- 关键词：白色假丝酵母菌线粒体膜电位氟康唑活性氧深部真菌念珠菌属
- 高浓度卡泊芬净对热带假丝酵母菌体外抑菌现象研究
- 2010年
- 目的:探讨高浓度卡泊芬净对热带假丝酵母菌的体外抑菌特性。方法:对临床分离20株具有高浓度抑制现象的热带假丝酵母菌使用微量板稀释法用高药物浓度检测抑菌现象,并且取其中的1株应用时间-杀菌曲线法检测卡泊芬净抗菌活性。结果:低浓度(≤4μg/ml)作用时,细菌生长数随时间变化而急剧降低,而高浓度(8μg/ml、10μg/ml、16μg/ml)时,细菌生长数随时间无显著变化。结论:卡泊芬净对热带假丝酵母菌的卡泊芬净对热带假丝酵母低浓度时有较强杀菌能力,而高浓度时则表现抑菌现象,临床上应予以重视。
- 金高明吕火祥周永列胡庆丰朱永泽沈辉
- 关键词：热带假丝酵母菌卡泊芬净高浓度抑菌作用
