江苏省教育厅自然科学基金(01KJB310010)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
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- 正常大鼠海马NMDA受体2B亚单位蛋白及其mRNA的平行分布规律被引量：7
- 2006年
- 目的观察正常大鼠海马NMDA受体2B亚单位(NR2B)蛋白质及其mRNA的基础性表达特征及两者在海马不同区域的表达关系。方法正常SD大鼠海马,灌注取脑,连续冰冻切片,ABC免疫组织化学方法染色和原位杂交组织化学染色,光镜下观察NR2B蛋白质及其mRNA的表达。结果NR2B蛋白质在正常大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回的免疫反应强度存在明显差异,CA1区最强,CA3区次之,齿状回着色较弱。NR2B mRNA在正常大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回的原位杂交组织化学反应强度与NR2B蛋白质免疫反应强度存在平行变化,也是CA1区最强,CA3区次之,齿状回着色较弱。结论NR2B蛋白质及其mRNA在正常大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回的表达强度不同,并存在平行表达差异关系,这种基础状态的分布特征可能与海马缺血易损性和耐受性相关。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：NMDA受体原位杂交海马
- NR2B反义寡核苷酸对大鼠海马CA1区NR2B蛋白质表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的观察NMDA受体2B亚单位(NR2B)反义寡核苷酸(ANR2B)对海马CA1区NR2B蛋白质表达的影响,筛选有效的反义寡核苷酸,为探讨针对NR2B的新药物提供形态学基础。方法设计、筛选、合成ANR2B。正常SD大鼠,海马CA1区立体定位注射ANR2B,灌注取脑,连续冰冻切片,ABC免疫组织化学方法染色,光镜下观察NR2B蛋白质的表达变化。结果注射ANR2B后,注射区及其周围NR2B免疫组织化学染色强度明显下降,仅有少量锥体细胞和颗粒细胞散在分布;而在注射NR2B正义寡核苷酸(SNR2B)、生理盐水及生理盐水插针不注射的海马切片上,海马CA1区的染色特征与注射ANR2B者有明显差别,其作用区锥体细胞、颗粒细胞及顶树突的NR2B免疫组织化学染色强度无明显变化。结论ANR2B能够降低NR2B蛋白质在正常大鼠海马CA1区的基础性高表达。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：NMDA受体反义寡聚核苷酸海马
- NR2B反义寡核苷酸对脑缺血海马CA1区NR2BmRNA表达的影响
- 2006年
- 为研究NMDA受体2B亚单位(NR2B)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide to NR2B,ANR2B)对短暂性脑缺血后海马CA1区NR2B mRNA表达的影响,分别向成年SD大鼠海马CA1区内立体定位注射ANR2B、NR2B正义寡核苷酸(SNR2B)、无菌生理盐水(NS),或者插针不注射(NSNO),24h后行四动脉阻断前脑缺血手术(缺血15min、再灌注24h),经心冲灌固定取脑,连续冰冻切片,原位杂交组织化学方法染色,光镜下观察各组每侧鼠脑NR2B mRNA的表达变化,并用LEICAQWin进行图像分析。结果显示,单纯缺血组海马各区的NR2B mRNA显色强度明显增加;缺血再灌组、假手术组和正常组海马CA1区内ANR2B注射点及其周围的NR2B mRNA显色明显下降;而在注射SNR2B、NS或NSNO的各组海马切片上,NR2B mRNA显色均无明显变化。结果表明ANR2B可以特异性地在体局部防止缺血后NR2B mRNA的高水平表达。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：NMDA受体反义寡聚核苷酸脑缺血海马
- NR2B反义寡核苷酸对大鼠海马CA1区NR2BmRNA表达的影响被引量：2
- 2006年
- 目的:观察NMDA受体2B亚单位(NR2B)反义寡核苷酸(ANR2B)对海马CA1区NR2BmRNA表达的影响,筛选有效的ANR2B,探讨改变NR2BmRNA表达的新方法。方法:正常SD大鼠,海马CA1区立体定位注射ANR2B,灌注取脑,连续冰冻切片,原位杂交组织化学方法染色,光镜下观察NR2BmRNA在ANR2B作用下的表达变化。结果:正常大鼠海马CA1区立体定位注射ANR2B后,注射点及其周围NR2BmRNA原位杂交染色强度明显下降,仅有少量锥体细胞和颗粒细胞散在分布;而在注射NR2B正义寡核苷酸(SNR2B)、生理盐水(NS)及NS插针不注射(NS-NO)的海马切片上,海马CA1区的染色特征与注射ANR2B有明显差别,其作用区锥体细胞、颗粒细胞及顶树突的NR2B原位杂交染色强度无明显变化。结论:ANR2B能够降低NR2BmRNA在正常大鼠海马CA1区的基础性高表达。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：NMDA受体反义寡聚核苷酸原位杂交海马
- NR2B反义寡核苷酸对脑缺血海马CA1区NR2B蛋白质表达的影响被引量：1
- 2005年
- 目的:观察前脑缺血后NR2B反义寡核苷酸(ANR2B)对海马CA1区NR2B蛋白质表达的影响,为临床脑血管疾病的防治以及研制特异性新药提供理论基础。方法:正常SD大鼠,脑缺血手术48 h前海马CA1区分别立体定位预注射ANR2B、NR2B 正义寡核苷酸(SNR2B)。后行四动脉阻断全脑缺血手术,免疫组织化学反应,观察NR2B蛋白质在ANR2B的作用下的表达变化。结果:海马CA1区立体定位注射ANR2B后,注射区及其周围NR2B免疫组织化学染色强度明显下降,仅有少量锥体细胞散在分布。结论:ANR2B可以在体局部抑制缺血早期NR2B亚单位蛋白表达上升趋势。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：脑缺血NMDA受体反义寡聚核苷酸免疫组织化学
- 反义寡核苷酸技术及其在NMDA受体亚单位研究中的应用
- 2004年
- 反义寡核苷酸技术是利用碱基互补配对的原则 ,设计一段寡脱氧核苷酸 ,与靶序列特异结合 ,从而抑制基因表达 ,降低mRNA和 /或蛋白质水平 ,影响动物的后续生物效应。反义寡核苷酸技术作为一种快速、特异性阻断基因表达的方法 ,近二十年来取得迅速发展 ,其潜在应用价值巨大。特别是近年来在对NM DA受体领域的反义研究 ,越来越得到人们的重视。本文就反义寡核苷酸技术及当前反义寡核苷酸技术在NMDA受体亚单位研究中的应用进行阐述。
- 滕大才徐铁军张凤真
- 关键词：反义寡核苷酸NMDA受体亚单位基因表达
