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锌指蛋白185对人胶质瘤细胞迁移的影响被引量：3: 2014年; 目的:探讨锌指蛋白185(zinc finger protein 185,ZNF185)在人胶质瘤细胞迁移中的作用。方法:Western blot检测ZNF185在神经胶质瘤及瘤旁正常组织的蛋白表达,克隆ZNF185基因转染人胶质瘤细胞,免疫荧光染色检测ZNF185的细胞定位,细胞划线和Transwell小室法检测ZNF185蛋白对细胞迁移的影响。结果:与瘤旁正常脑组织相比,ZNF185在人胶质瘤组织和细胞系中的表达显著降低;ZNF185蛋白主要分布于人胶质瘤细胞的细胞质、细胞膜,并与肌动蛋白纤维共定位;过表达ZNF185显著抑制人胶质瘤细胞的迁移。结论:ZNF185通过结合肌动蛋白纤维发挥抑制人胶质瘤细胞迁移的作用。; 陆斌郑全辉; 关键词：锌指蛋白神经胶质瘤细胞迁移

MicroRNA-150通过降低CD122的表达调控NK及NKT细胞的分化被引量：1: 2014年; 目的:探讨microRNA-150缺失对调节性T细胞(Treg)、γδT细胞、NK及NKT细胞产生、发育和自稳的影响。方法:采用microRNA-150基因敲除小鼠;Real-time PCR检测microRNA-150的表达;流式细胞术检测小鼠胸腺和脾脏Treg、γδT细胞、NK及NKT细胞数量变化;采用Annexin V染色法检测细胞凋亡;5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu)掺入法检测细胞增殖。结果:microRNA-150缺失对小鼠Treg和γδT细胞的产生和发育不发挥明显作用,但导致NK和胸腺NKT细胞数量显著降低,而且,microRNA-150缺失导致小鼠NK及NKT细胞中CD122的表达显著降低,细胞发育受阻,凋亡增加,同时NK细胞的增殖能力也显著降低。结论:microRNA-150调控小鼠NK和NKT细胞的发育和自稳,CD122可能在以上调控过程中发挥重要作用。; 张爱红郑全辉郑建兴李娟侯志宏刘亚楠张庆波; 关键词：NK NKT细胞

miR-150基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响被引量：3: 2016年; 目的:探讨miR-150基因缺失对小鼠繁殖和血液学指标的影响。方法:采用miR-150ko小鼠,观察该小鼠的窝产仔数和离乳率及生长曲线,测定其生殖指标;以全自动血球计数仪和自动生化分析仪测定2月龄miR-150ko小鼠和正常对照C57BL/6J小鼠血液细胞学和血清生化参数。结果:miR-150ko小鼠窝产仔数与离乳率与C57BL/6J正常对照小鼠相比均显著下降;miR-150ko小鼠外周血白细胞计数、中间细胞数、中性粒细胞数、中间细胞百分比、中性粒细胞百分比与C57BL/6J小鼠相比显著升高;而血小板计数、淋巴细胞百分比显著下降;miR-150ko小鼠的血清葡萄糖、总胆固醇水平较正常对照小鼠显著增高。结论:miR-150基因缺失可影响到小鼠的繁殖功能,并对某些血液细胞学指标及血糖、胆固醇水平产生影响。; 郑全辉田枫李文婷张秋如王姗; 关键词：基因缺失小鼠繁殖血液学

NKT细胞激活剂α-Galcer对小鼠肺肿瘤细胞生长的影响被引量：2: 2016年; ①目的探讨自然杀伤性T细胞(NKT)特异激活剂α-半乳糖苷神经酰胺(α-Galcer)对小鼠肺肿瘤细胞生长的影响。②方法体外培养小鼠Lewis肺癌细胞(LLC),经腋部皮下注射雌性C57BL/6小鼠制备肺肿瘤模型。将LLC接种小鼠进一步分为实验组和对照组。实验组小鼠腹腔注射α-Galcer,对照组小鼠注射等量溶剂二甲基亚砜(DMSO)。LLC接种两周后处死小鼠,观察肿瘤生长情况及流式细胞仪检测小鼠外周NKT细胞变化。③结果 LLC细胞接种两周后,实验组小鼠肺肿瘤重量明显小于对照组,而实验组小鼠外周NKT细胞数量显著高于对照组。④结论α-Galcer通过促进NKT细胞数量的增加,抑制小鼠肺肿瘤的生长。; 田雨王娜宋天姣曹倩文王姗郑全辉; 关键词：NKT细胞

MicroRNA-150基因敲除小鼠鉴定被引量：2: 2015年; 1目的通过基因组特异PCR扩增鉴定MicroRNA-150基因敲除小鼠。2方法利用碱裂解法提取鼠尾基因组DNA,在小鼠MicroRNA-150基因两端设计特异引物,PCR扩增检测。3结果正常对照小鼠DNA经PCR扩增产生长度为866个碱基对的DNA片段,MicroRNA-150基因敲除小鼠产生长度为262个碱基对的DNA片段。4结论通过碱裂解法提取鼠尾DNA并采用特异引物扩增能够准确鉴定MicroRNA-150基因敲除小鼠。; 曹倩文宋天姣王娜田雨郑全辉; 关键词：基因敲除基因鉴定

肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及传统T细胞变化研究被引量：4: 2016年; 目的探讨肺肿瘤小鼠骨髓源性抑制细胞(MDSC)、调节性T细胞(Treg)和传统T细胞的变化及机制。方法采用配对设计将20只C57BL/6小鼠随机均分为Lewis肺癌细胞注射组(LLC组)和正常对照组(NC组),LLC组采用皮下注射LLC细胞100μL(1×10~6)制备肺肿瘤小鼠模型,对照组注射等量生理盐水。待肿瘤形成后取小鼠脾细胞,采用流式细胞仪检测肺肿瘤小鼠MDSC、Treg及CD4^+和CD8^+T细胞比例和数量变化,膜联蛋白-V(Annexin-Ⅴ)染色检测CD4^+和CD8^+T细胞凋亡变化,5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)染色检测CD4^+和CD8^+T细胞增殖变化。结果与NC组相比,LLC组脾脏MDSC比例和数量明显增加,CD4^+Foxp3^+Treg所占CD4^+T细胞比例和数量明显增加,而CD4^+和CD8^+T细胞所占脾细胞比例和数量明显降低(均P<0.05)。与NC组相比,LLC组CD4^+和CD8^+T细胞增殖明显降低,同时CD8^+T细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论 MDSC和Treg细胞在肺肿瘤小鼠数量增加,同时,MDSC和Treg抑制CD4^+和CD8^+T细胞增殖,并促进CD8^+T细胞凋亡。; 郑爱华郑全辉张爱红; 关键词：肺肿瘤 CD4阳性T淋巴细胞 CD8阳性T淋巴细胞

小鼠皮下及肺转移肿瘤模型制备: 2016年; 1目的经皮下和尾静脉注射,制备小鼠黑色素瘤细胞增殖、转移模型。2方法体外培养黑色素瘤细胞,分别经腋部皮下和尾静脉注射接种C57BL/6小鼠,接种剂量分别为1×106/只和3×105/只,2周后观察黑色素瘤形成及肺部转移情况。3结果黑色素瘤细胞注射2周后,经皮下接种的小鼠腋窝出现明显肿瘤,成瘤率达100%;经尾静脉注射的小鼠肺部出现大量黑色素瘤结节,肿瘤转移率达90%。4结论经皮下和尾静脉注射方法能够成功制备小鼠的肿瘤细胞增殖和转移模型。; 宋天姣曹倩文王娜田雨郑全辉; 关键词：肿瘤细胞黑色素瘤增殖

锌指蛋白185对胶质瘤细胞增殖影响的研究被引量：1: 2015年; 目的：探讨锌指蛋白ZNF185在人脑胶质瘤细胞增殖中的作用。方法标本取自2011年1月—2013年12月于唐山市工人医院就诊，经病理确诊为胶质瘤患者的肿瘤组织，以瘤旁组织作对照。提取不同组织总蛋白， Western-blot检测ZNF185的表达。提取瘤旁组织总RNA，反转录扩增ZNF185编码序列并克隆至pEGFPC2质粒，构建ZNF185表达载体。采用Lipofactamine2000将ZNF185表达载体转染人胶质瘤细胞系SF767，以转染pEGFPC2空载体细胞作为对照。采用流式细胞仪检测细胞周期变化；MTT法检测细胞增殖活性。结果与瘤旁组织相比， ZNF185在人脑胶质瘤组织中表达显著降低（P＜0.01）；转染ZNF185表达载体的胶质瘤细胞与对照细胞相比ZNF185的表达显著增加（P＜0.01）；过表达ZNF185导致SF767细胞G0～G1期细胞比例显著增加（P＜0.05），而S期细胞比例减少（P＜0.05）。同时，过表达ZNF185也导致SF767细胞的增殖速度显著降低（P＜0.05）。结论ZNF185在人脑胶质瘤细胞中发挥抑制细胞增殖的作用。; 陆斌郑全辉; 关键词：神经胶质瘤细胞周期锌指转染

NKT细胞研究进展被引量：12: 2015年; 1 NKT细胞的分化发育NKT细胞的发育来源目前仍在探求阶段,大部分研究显示NKT细胞是胸腺依赖的。在小鼠体内,大多数NKT细胞产生于围产期的胸腺,由CD4＋CD8＋双阳性T细胞（DP）偏离于主流T细胞的发育、分化途径而产生[1]。; 李娟郑全辉; 关键词：NKT细胞分化发育围产期双阳性胸腺

小鼠肺肿瘤发展过程中外周血NKT和MDSC细胞变化被引量：2: 2016年; 目的:探讨小鼠肺癌细胞生长过程中自然杀伤性T细胞(NKT)和骨髓源性抑制细胞(MDSC)变化。方法:采用小鼠Lewis肺癌细胞系(LLC)制备小鼠皮下肿瘤模型,在肿瘤生长不同时间取鼠尾血,提取白细胞进行相关抗体染色,采用流式细胞仪进行NKT和MDSC细胞检测。结果:肺癌小鼠随着肿瘤增大外周血NKT细胞比例逐渐降低,而MDSC细胞比例逐渐增加,与正常对照小鼠相比,二者均存在显著差异。结论:小鼠NKT细胞和MDSC细胞在肺肿瘤发展过程中呈相反趋势变化,二者可作为肺癌发展的潜在监测指标。; 曹倩文田雨宋天姣王娜郝小惠郑全辉; 关键词：自然杀伤性T细胞

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