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眼用制剂中清凉剂的气相色谱测定方法被引量：4: 2012年; 目的用气相色谱法同时检测眼用制剂中各种清凉剂含量。方法色谱条件:OV-1701石英毛细管柱;进样口温度:220℃;炉温:105℃;FID检测器温度:250℃;载气:氮气,6.0 psi;氢气:45 mL/min;空气:450 mL/min;分流比:10∶1;以乙酸乙酯萃取样本,正十三烷为内标。结果樟脑、异龙脑、薄荷醇、龙脑分离良好,在浓度2.0～250.0μg.mL-1间与内标峰面积之比线性良好,方法学考察结果符合要求。结论该方法定量准确,可用于眼用制剂中清凉剂辅料的研究。; 伍海涛王宁生宓穗卿廖南英; 关键词：眼用制剂冰片气相色谱法

溶血试验替代滴眼液眼刺激性试验的可行性研究被引量：7: 2012年; 目的探索溶血试验替代体内眼刺激性试验(Draize试验)用于检测滴眼液刺激性的可行性。方法采用溶血实验(hemolysis test),对Draize数据库里的15种化学物质进行体外再评价,分析该方法的LogHC5(0HC50为50%红细胞溶血的受试物的浓度)与Draize试验评分(最大平均分值,MAS)的相关性,并采用溶血实验对11种市售滴眼液的刺激性进行体外评价。结果溶血实验的LogHC50与Draize试验评分(MAS)的相关系数为-0.639,spearman’s秩相关系数为-0.888。结论溶血实验可作为筛检滴眼液的眼刺激性的替代方法之一,为眼科制剂的开发提供参考。; 廖南英刘启德宓穗卿徐新华伍海涛; 关键词：滴眼液眼刺激体外试验溶血试验

含冰片眼用制剂的文献调查被引量：3: 2012年; 目的对冰片在眼科制剂中应用状况进行文献调查。方法以冰片、眼等为主题词,对三大中文期刊数据库、Medline及中国知识产权局专利数据库进行网络检索;手工检索2010版药典一部。所得题录导入NoteExpress,建立数据库,手工剔除无关文献。结果检出67篇与冰片有关的眼制剂文章和73项专利,4个列入药典眼用制剂。结论目前眼用冰片存在品种混用,临床剂量超出安全剂量范围等情况。; 伍海涛唐由之王宁生宓穗卿廖南英; 关键词：冰片眼用制剂

冰片与羟苯乙酯合用的体外溶血效应被引量：1: 2014年; 目的观察冰片和羟苯乙酯单用及合用对红细胞的溶血作用。方法兔耳背中动脉取血,制成2%的红细胞悬液,用不同浓度的冰片和羟苯乙酯与其反应,32℃孵育30 min,离心,检测吸光度,给出溶血曲线,并用等辐射分析法和响应面法进行分析。结果冰片的半数溶血浓度（HC50）95%的置信区间为263.39-393.27μg·m L^-1,羟苯乙酯的HC5095%的置信区间为867.93-916.65μg·m L^-1,冰片和羟苯乙酯合用后,溶血曲线左移,合用的HC50点位于两药物单用HC50的95%置信区间内,响应面法验证了其为相加效应。结论冰片和羟苯乙酯合用后溶血效应为相加作用,临床浓度时羟苯乙酯的溶血率很低,溶血效应主要源于冰片。; 梁小雯伍海涛廖南英魏秀芳宓穗卿王宁生; 关键词：冰片羟苯乙酯溶血实验

高效液相色谱法同时测定离体角膜灌流液中8个普萘洛尔衍生物被引量：1: 2012年; 为了解促渗透剂对不同物质的促渗透能力,建立了采用高效液相色谱分离测定8个普萘洛尔衍生物的分析方法。采用盒式给药技术在离体角膜上皮侧给予普萘洛尔衍生物,内皮侧接收灌流液,用甲醇沉淀蛋白、高速离心后进样,采用Agilent Zorbax Extend色谱柱,以乙腈(A)-0.03%(v/v)磷酸水溶液(B)为流动相,在3%A～20%A间梯度洗脱,柱温30℃,检测波长205 nm。结果表明,该方法可在31 min内实现离体角膜灌流液中8个衍生物的完全分离和定量,线性范围为0.2(0.1)～40.0μmol/L,线性关系良好,相关系数均不小于0.997 0。其加样回收率为91.12%～105.73%,日内精密度(相对标准偏差(RSD))为1.00%～11.63%,日间精密度为1.18%～18.58%,样本冻存、冻融稳定性良好。该法适用于离体角膜灌流、细胞小室培养等跨膜吸收研究中普萘洛尔衍生物的检测。; 伍海涛陈传兵王宁生宓穗卿廖南英; 关键词：高效液相色谱普萘洛尔衍生物角膜

冰片与苯扎氯铵合用对兔角膜上皮细胞凋亡的作用: 2015年; 目的观察冰片与苯扎氯铵合用对兔角膜上皮细胞凋亡的作用。方法以200μg·m L-1冰片与不同浓度的苯扎氯铵(2,4μg·m L-1)联合作用于兔角膜上皮细胞,用噻唑蓝(MTT)法检测上皮细胞的活性;Annexin-V/PI染色流式细胞仪法检测上皮细胞的凋亡情况;Real time RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因Fas、Caspase3m RNA的表达;Western Blot法检测Fas、Caspase3蛋白的表达。结果冰片与苯扎氯铵合用可明显增强苯扎氯铵对兔角膜上皮细胞活性的抑制作用(P<0.01);增强苯扎氯铵的促凋亡作用(P<0.01);促进角膜上皮细胞Fas、caspase3的m RNA表达(P<0.01)及蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论冰片与苯扎氯铵合用,可增强苯扎氯铵的细胞毒性,促进兔角膜上皮细胞的凋亡及Fas、caspase3 m RNA和蛋白的表达。; 修春伍海涛王奇梁小雯廖南英魏秀芳宓穗卿王宁生; 关键词：冰片苯扎氯铵上皮细胞 FAS CASPASE

冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用被引量：1: 2015年; 【目的】观察冰片对兔角膜上皮细胞的损伤作用。【方法】以浓度分别为100、200、400μg/m L的冰片作用于兔角膜上皮细胞,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性,Annexin V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;Real-time PCR法检测细胞凋亡相关基因Caspase-3 m RNA的表达。【结果】不同浓度的冰片均可抑制兔角膜上皮细胞的活性;与正常对照组比较,冰片组可增加兔角膜上皮细胞的凋亡率,增强Caspase-3 m RNA的表达(P<0.05或P<0.01)。【结论】冰片能抑制兔角膜上皮细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,其机制与增强凋亡相关基因Caspase-3m RNA的表达有关。; 修春伍海涛王奇梁小雯廖南英魏秀芳宓穗卿王宁生; 关键词：兔角膜上皮细胞细胞凋亡细胞培养基因表达调控

冰片与苯扎氯铵合用对红细胞及角膜上皮细胞的损伤效应被引量：5: 2014年; 目的考察冰片与苯扎氯铵合用对红细胞及角膜上皮细胞的毒性。方法实验分为溶剂对照组、冰片组、苯扎氯铵组、冰片+苯扎氯铵组,分别测定各组红细胞半数溶血浓度(HC50)和角膜上皮细胞半数抑制浓度(IC50),根据等辐射分析法和响应面分析法判断联合作用类型和趋势,并观察二者合用对眼角膜上皮细胞增殖的影响。结果苯扎氯铵对红细胞及角膜上皮细胞的毒性作用呈明显的量效关系,加入冰片后能降低其HC50和IC50值。结论冰片与苯扎氯铵对红细胞的溶血效应表现为协同作用,冰片能增强苯扎氯铵对角膜上皮细胞的毒性作用,受损一定程度内的细胞可恢复。; 廖南英伍海涛梁小雯刘启德宓穗卿王宁生; 关键词：冰片苯扎氯铵体外

3种清凉剂与苯扎氯铵合用的体外溶血效应比较: 2015年; 目的比较薄荷脑、冰片和樟脑3种清凉剂对红细胞的溶血效应及与苯扎氯铵合用后溶血效应的变化。方法以溶血百分率(Hemolysis Rate,HR)、半数溶血浓度(Half Hemolysis Concentration,HC50)为指标,比较薄荷脑、冰片和樟脑的溶血作用;分别考察相同浓度的清凉剂与苯扎氯铵合用后对红细胞的溶血作用,并采用等辐射线法分析合用后相互作用类型。结果薄荷脑、冰片和樟脑的HC50分别为2.59 7,3.59 3,11.36 mmol·L-1;清凉剂与苯扎氯铵合用后,溶血曲线左移,HC50均落在两药单用HC50的95%置信区间内。结论薄荷脑对红细胞的溶血效应最大,冰片次之,樟脑最小;清凉剂均可增强苯扎氯铵的溶血作用。; 魏秀芳梁小雯文勇刘启德伍海涛王宁生宓穗卿祝晨蔯; 关键词：薄荷脑樟脑苯扎氯铵溶血试验

HPLC法测定滴眼液中苯扎氯铵被引量：3: 2013年; 目的建立同时测定含清凉剂滴眼液中苯扎氯铵的3种同系物的高效液相色谱法。方法采用C1 8色谱柱;流动相为乙腈-0.02 mol/L庚烷磺酸钠溶液(含0.1%三乙胺,磷酸调pH3.4±1)(80∶20),检测波长为210 nm,体积流量1.2 mL/min,柱温40℃。结果 3种同系物在各自的线性范围(2.02～129.33μɡ/mL,1.79～114.83μg/mL,1.56～100μɡ/mL)内呈良好的线性关系,相关系数均为0.999 5以上。平均加样回收率分别为104.04%、93.85%、101.05%,RSD均小于2%。结论该方法操作简便、快速、灵敏度高,为滴眼液的常规分析和质量监控提供更加全面、可靠的检测方法。; 廖南英刘启德宓穗卿王宁生伍海涛; 关键词：高效液相色谱法苯扎氯铵滴眼液

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广东省科技计划工业攻关项目(2011B031700069)

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