国家自然科学基金(81070225)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
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- 细颗粒物致人脐静脉内皮细胞氧化损伤及人参皂甙Rgl对其干预效果的实验研究被引量：5
- 2012年
- 目的从氧化应激角度探讨细颗粒物（PM2.5）对人脐静脉内皮细胞的影响，并探讨人参皂甙Rgl（简称Rgl）对其的干预效果。方法以人脐静脉内皮细胞为研究对象，筛选PM2.5合适的染毒浓度和Rgl的最适浓度。首先设对照组和PM2.5处理组（浓度分别为0．1、0．2、0．4、0．8mg／m1）。再用Rgl进行干预，设对照组、PM2.5,0．8mg／ml组、PM2.5，0．8mg／ml＋Rg10．04mg／ml组和Rg10．04mg,／ml组。各组处理24h后用MTY法测定内皮细胞生长变化的吸光光度值（A值），荧光探针标记法测定内皮细胞活性氧（ROS）水平，RT-PCR法测定血红素氧合酶-1（HO．1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）mRNA表达水平。结果Rgl的最适浓度为0．04mg／ml。PM2.5，各处理组MTT法测定的A值均低于对照组，PM2，0．4和0．8ms／ml组与对照组比较P分别〈0．05和〈0．01。PM2.5各处理组ROS荧光灰度值均高于对照组（P均〈0．01）。PM2.5，各处理组HO-1平均A值均高于对照组，PM2.5，0．8mg／ml组与对照组比较P〈0．01。PM2，各处理组Nrf2平均A值与对照组比较差异均元统计学意义。PM250．8mg／ml十Rg10．04mg／ml组细胞』4值高于PM2．5 0．8mg／ml组（P〈0．01），ROS荧光灰度值低于PM2．50．8mg／ml组（P〈0．01），HO-1平均A值高于PM250．8mg／ml组（P〈0．05），Nrf2平均A值与对照组比较差异无统计学意义。结论氧化应激是PM2.5，损伤内皮细胞的途径之一。Rgl能抑制PM2.5，损伤内皮细胞，抗氧化应激是其机制之一。但在Nrf2-ARE抗氧化通路中Nrf2对抗氧化蛋白HO-1表达的调节发生在其转录后水平。
- 马责晋吕吉元张明升李彩萍秦纲
- 关键词：人参皂甙氧化性应激脐静脉内皮细颗粒物
- 颗粒物污染与动脉粥样硬化研究进展被引量：2
- 2011年
- 环境心脏病学作为一门新型学科，已经引起人们的广泛关注。2010年5月，美国心脏协会（AHA）更新了2004年公布的有关空气污染与心血管疾病相关性的声明[1-2]，提出细颗粒物暴露与心血管疾病发病率和死亡率存在明确的因果关系，细颗粒物暴露应被视为心血管疾病发病和死亡的一种可改变的危险因素，而且颗粒物暴露与动脉粥样硬化、系统炎症、氧化应激、血栓形成倾向、动脉血压、血管功能状态、心率变异性、心肌缺血或复极异常等相关。
- 秦纲吕吉元
- 关键词：动脉粥样硬化疾病发病率血栓形成倾向疾病相关性
- 血红素氧合酶-1在空气细颗粒物PM2.5致人脐静脉内皮细胞损伤过程中作用的实验研究被引量：5
- 2013年
- 目的 通过观察活性氧（reactive oxygen species,ROS）清除剂（钛试剂,Trion）和血红素氧合酶-1 （heme oxygenase,HO-1）抑制剂（锌原卟啉,ZnPP）对空气细颗粒物PM2.5所致人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的生物作用的影响,探讨HO-1在PM2.5致细胞损伤中的作用机制.方法 复苏由上海拜力生物科技有限公司提供的人脐静脉内皮细胞株,37℃、5％ CO2条件下正常培养至细胞形成致密单层时,分别进行干预.实验分组：（1）空白对照组（对照组）：细胞正常培养24 h.（2）PM2.5染毒组（PM2.5组）：不同浓度PM2.5（200、400、800 μg/ml）培养细胞24 h,选择400 μg/ml为其有效干预浓度（后续各组如未特殊注明,默认PM2.5浓度为400 μg/ml）.（3）PM2.5＋Trion组：ROS抑制剂Trion（10μmol/L）干预细胞1h后,加入PM2.5,培养24 h.（4）PM2.5＋ZnPP组：HO-1抑制剂ZnPP（10μmol/L）干预细胞1h后,加入PM2.5,培养24 h.收集干预后的各组细胞,用MTT法比较细胞活性,逆转录聚合酶链反应法和免疫细胞荧光法分析细胞内HO-1 mRNA及蛋白表达情况,荧光探针标记法测定细胞内ROS水平,流式细胞技术测定细胞凋亡率,分光光度法测定caspase-3活性.结果 PM2.5组细胞死亡率和凋亡率均高于对照组（P均＜0.05）.PM2.5＋Tiron组细胞死亡率和凋亡率均低于PM2.5组,PM2.5＋ ZnPP组则均高于PM2.5组（P均＜0.05）.PM2.5组ROS水平高于对照组（P＜0.05）.PM2.5＋Tiron组ROS水平低于PM2.5组,PM2.5＋ZnPP组则高于PM2.5组（P均＜0.05）.PM2.5组HO-1 mRNA和蛋白表达均高于对照组（P分别＜0.05和0.01）.PM2.5＋Tiron组HO-1 mRNA和蛋白表达均低于PM2.5组,PM2.5＋ZnPP组亦均低于PM2.5组（P＜0.05或0.01）.3、6、12和24 h不同时间干预后,PM2.5组细胞caspase-3活性均高于对照组（P均＜0.05）,PM2.5＋Tiron组均低于PM2.5组（P均＜0.05）,PM2.5＋ ZnPP组则均高于PM2.5组（P均＜0.05）.结论 PM2.5可以通过增加ROS损害HUVEC,同时引起HO
- 杨竞路吕吉元张明升秦纲李彩萍
- 关键词：内皮细胞血红素加氧酶-1PM2
