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雌激素通过上调S1P／S1PR信号通路促进内皮细胞鞘氨醇-1-磷酸生成和分泌: 2013年; 动脉粥样硬化性心血管病是全球范围内发病率和死亡率最高的慢性炎症性疾病，而保护内皮系统则是防治动脉粥样硬化的重要策略之一。上世纪90年代人们试图使用雌激素替代治疗遏制女性心血管病，10多年后发现并未出现预期效果。其原因可能与人们在实验中所发现的雌激素抗动脉粥样硬化分子机制存在重要缺陷有关。因此，重新审视雌激素的血管保护机制和分子靶点有可能为雌激素替代治疗提供新的思路。鞘氨醇-1-磷酸（SIP）是目前研究发现的最重要的活性鞘脂类分子之一，其具有促进细胞生长、增殖和抗炎症等多种生物学功能。在细胞膜上分布有5种s1P受体（s1PR），命名为S1PRl—5，其中S1PRl—3广泛分布于血管内皮系统。已有研究表明S1P／S1PR信号通路在内皮系统功能方面扮演着重要角色。; 郭守东翟雷于杨崔英杰秦树存; 关键词：雌激素鞘氨醇激酶

microRNA过表达载体构建技术的实验研究: 2014年; 目的:构建microRNA的表达载体,再转染生物体细胞观察该microRNA的转录或表达情况,以获知它的作用机理及对生物体的影响。方法:以microRNA-21(简化为miR-21)为例说明构建表达载体的方法。根据microRNA的成熟序列以及附近约200多碱基共约470个碱基序列,设计PCR引物,PCR扩增,PCR产物和pcDNA3.1(+)质粒双酶切后,用T4连接酶进行连接反应,并转化入感受态细胞,筛选后对重组质粒进行双酶切、琼脂糖凝胶电泳鉴定及测序分析,并将其转染Hela细胞,经RT-PCR实验检测其表达情况。结果:pcDNA3.1(+)/miR-21过表达载体转染细胞后使得miR-21在细胞中过表达。结论:成功构建了miR-21的真核表达载体,为进一步研究miR-21功能及作用机制奠定实验基础。; 姜彬; 关键词：微小RNA MIR-21 PCDNA3

磷脂转运蛋白在高密度脂蛋白代谢和胆固醇逆向转运中的生物学作用被引量：10: 2015年; 磷脂转运蛋白(PLTP)活性与糖尿病、肥胖、动脉粥样硬化等疾病明显相关的作用机制主要与其参与脂蛋白代谢有关。其中最引人注目的是PLTP在高密度脂蛋白(HDL)代谢和胆固醇逆向转运(RCT)中发挥的复杂生物学作用。PLTP可否通过影响HDL和RCT而发挥对动脉粥样硬化的作用?本文通过近年的文献复习并结合我们的相关工作与读者一同寻找答案和线索。; 秦树存于杨赵亚南吴云; 关键词：高密度脂蛋白胆固醇逆向转运动脉粥样硬化

磷脂转运蛋白对中枢神经脑组织代谢的可能作用及其生物学意义: 2014年; 众所周知，中枢神经系统中富含脂类，其中占体重2％的脑组织包含了机体20％以上的脂类，接近脑干重的一半，脂质种类主要为磷脂和胆固醇。磷脂转运蛋白（PLTP）是染色体20q12～13．1编码广泛表达的脂质转运蛋白，对于血浆脂质代谢具有重要意义，可参与磷脂、未酯化胆固醇、酰基甘油酯、特定载脂蛋白（apo）、维生素E的转运等。; 王浩于杨秦树存; 关键词：中枢神经系统小神经胶质细胞唐氏综合征

磷脂转运蛋白基因缺陷对50周龄小鼠学习记忆能力的影响及其机制: 2013年; 目的阿尔茨海默病（AD）是一种中枢神经系统退行性疾病，其确切的发病机制不明。本研究探讨了磷脂转运蛋白基因缺陷（PLTP-／-）后小鼠学习记忆能力的改变及其可能的机制。方法选取50周龄的PLTP-／-及具有相同遗传背景的C57BL／6J小鼠，通过水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力，ELISA检测皮质及海马Ap40、A1342水平；刚果红及银染色检测p淀粉样蛋白的沉积及老年斑；Westernblot检测皮质及海马B淀粉样蛋白前体蛋白（APP）、β-分泌酶（BACEl）、早老素蛋白（Ps）的表达；荧光法检测皮质和海马BACEI活性。; 王浩于杨陈伟崔英杰罗甜马健秦树存; 关键词：阿尔茨海默病学习记忆

磷脂转运蛋白作为动脉粥样硬化性疾病治疗靶点的研究从实验室走向临床: 2011年; 磷脂转运蛋白（phospholipid transfer protein,PLTP）的研究始于1970年美国康奈尔大学的两位学者Wirtz和Zilversmit,他们发现这个蛋白可以介导磷脂在细胞器、细胞膜和血浆脂蛋白之间的交换。但其对动脉粥样硬化的影响一直争论不休,直至30年后的2001年作者所在美国哥伦比亚大学的Jiang、Qin和Tall等学者发现该蛋白在三个动脉粥样硬化模型鼠的表达缺陷可导致动脉斑块形成明显减少，从此掀开该蛋白影响动脉硬化研究的新篇章。; 秦树存; 关键词：动脉粥样硬化治疗靶点

载脂蛋白E缺陷增加小鼠血浆鞘氨醇-1-磷酸含量: 2013年; 目的循环中鞘磷脂信号分子鞘氨醇．1．磷酸（SIP）主要富集于高密度脂蛋白（HDL）颗粒并对HDL的内皮保护功能产生重要影响。动脉粥样硬化性疾病时，血浆S1P含量在极低密度脂蛋白（VLDL）和低密度脂蛋白（LDL）等非HDL（non—HDL）上增高，其机制未明。本研究以C57BL／6小鼠（WT）和相同遗传背景下能自发动脉粥样硬化的载脂蛋白E缺陷（ApoE-）小鼠为模型，检测血浆S1P含量，并尝试分析其发生改变的机制。方法选取20周龄雄性WT和ApoE-/-小鼠继续普通饲料喂养12周后，超速离心法分离non．HDL、HDL与乏脂血浆（LDP），采用液相一串联质谱（LC-MS／MS）方法对血浆、脂蛋白和LDP进行SIP定量。酶学法检测血脂水平，Westernblot检测血浆、肝脏和肾脏SIP特异性载体载脂蛋白M（ApoM）的表达。; 于杨郭守东崔英杰宋国华冯营刘帅罗甜秦树存; 关键词：载脂蛋白M 脂蛋白

重组HDL—S1P颗粒对巨噬细胞胆固醇转运子表达的影响: 2013年; 目的循环中鞘磷脂信号分子鞘氨醇-1-磷酸（S1P）主要富集于高密度脂蛋白（HDL）颗粒并对HDL的内皮保护功能产生重要影响。重组HDL颗粒是研究与治疗动脉粥样硬化性疾病的重要手段，其成分和含量决定其功能。以载脂蛋白AI（ApoAl）和S1P为主要成分的重组HDL对内皮细胞保护功能已有报道。但对胆固醇流出机制作用如何尚未见报道，本研究采用含有不同比例S1P的重组HDL，观察其对巨噬细胞胆固醇流出重要的转运子的作用。方法将含有重组ApoAI、合成磷脂（POPC）和不同含量的S1P混匀，氮气吹干后通过胆酸钠透析法得到重组HDL．S1P颗粒。制备得到的5种重组HDL颗粒内成分最终摩尔浓度比为POPC：S1P：ApoAI=100／0／0、99／0／1、94／6／1、88／12／1、76／24／1。非变性条件下凝胶电泳检测重组HDL颗粒大小以判断效果。透析后于72h内用于干预巨噬细胞系RAW264．7，观察其胆固醇转运子的表达变化。结果给予重组HDL分别干预0、6、12及24h后，ATP结合盒转运子A1（ABCAl）、G1（ABCGl）和清道夫受体BI（sR．BI）mRNA表达无明显变化，Westernblot结果进一步证实各组间ABCAl、ABCGl和sR-BI表达无明显差异。结论含有不同S1P比例的重组HDL对RAW264．7的胆固醇转运子ABCAl、ABCGl和SR．BI表达无明显作用。; 于杨崔英杰冯蕾罗甜刘帅秦树存; 关键词：载脂蛋白AI 巨噬细胞

氧化应激诱导的细胞衰老过程中细胞生长相关基因的表达被引量：6: 2012年; 应激诱导的细胞早衰与复制性细胞衰老有相似的细胞表型,但其机制不尽相同.分析二者的衰老相关基因表达特点对了解应激因素诱导细胞衰老的机制有重要意义.本文对过氧化氢诱导的HeLa细胞早衰过程中的关键衰老相关基因及其转录后调控因子的表达做了分析.结果发现,在复制性衰老过程中明显降低的cyclin A、cyclin B1c、-fos及HuR,在温和过氧化氢诱导的细胞早衰过程中并无明显改变;在氧化应激诱导的细胞早衰过程中,p21与p16表达升高,AUF1则降低,与复制性衰老过程一致;p21 mRNA半衰期在复制性衰老过程中无明显变化,但在氧化应激诱导的细胞早衰过程中则显著延长.上述结果提示,尽管氧化应激诱导的细胞早衰与复制性衰老存在相似基因表达变化,调控机制则不尽相同.; 余明蔚王文恭; 关键词：氧化应激细胞衰老细胞生长基因表达

磷脂转运蛋白介导鞘氨醇-1-磷酸在血浆脂蛋白颗粒间转运: 目的:循环中鞘磷脂信号分子鞘氨醇-1-磷酸(Sphingosine-1-phosphate,SIP)主要富集于高密度脂蛋白(High density lipoprotein,HDL)颗粒并对HDL功能产生重要影响。HDL...; 郭守东于杨刘帅冯蕾罗甜崔英杰秦树存

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