卫生部科学研究基金(WKJ2004-2-005)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：陈峰吴德沛常伟荣陈晓晨朱子玲更多>>
- 相关机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：卫生部科学研究基金江苏省医学重点人才培养基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- mIL-10重组复制缺陷型腺病毒载体的构建及制备被引量：1
- 2006年
- 目的构建小鼠白介素-10(mIL-10)重组腺病毒真核表达载体,为其体外表达及动物体内试验研究提供依据。方法以pORF5-mIL-10质粒为模板通过PCR方法扩增回收mIL-10,将其定向连接到腺病毒载体pSGCMV中,构建pSGCMV-mIL10质粒。此质粒与5型腺病毒质粒pBGHE3通过Lipofectamine 2000共转染至293细胞,经同源重组产生重组复制缺陷型腺病毒Ad5-mIL-10。纯化后Ad5-mIL-10在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化,测定其滴度。结果扩增所得mIL-10经酶切鉴定、PCR扩增、DNA测序均证实为小鼠白介素-10,重组腺病毒Ad5-mIL-10经PCR鉴定正确,滴度达2.5×1010pfu/ml。结论成功构建了Ad5-mIL-10重组腺病毒载体系统,为研究IL-10在临床移植中的免疫学作用及基因治疗奠定基础。
- 陈峰吴德沛符粤文常伟荣朱子玲冯宇锋
- 关键词：白介素-10腺病毒
- 亚砷酸对人骨髓间充质干细胞增殖及凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的:研究亚砷酸(ATO)对人骨髓间充质干细胞(MSC)增殖及凋亡的影响。方法:通过正常志愿者髂后上棘穿刺获得MSC,体外培养传代,取第3代细胞鉴定后进行实验。纯化的MSC与1、5、10μmol/L的ATO共孵育,分别在24、48、72h时采用HE染色观察细胞形态学变化,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡情况。结果:ATO可引起MSC形态明显改变;抑制MSC增殖,不同浓度(1、5、10μmol/L)ATO对MSC作用72h时的细胞增殖抑制率分别为(66.3±2.2)%、(81.1±1.7)%、(90.0±2.2)%;FCM检测表明ATO可诱导MSC凋亡,10μmol/L的ATO处理72h时引起(68.37±2.93)%的凋亡率。这3种作用均随ATO浓度及作用时间的增加而增强。结论:ATO可在体外抑制MSC增殖,并促进其凋亡。
- 陈晓晨吴德沛陈峰常伟荣
- 关键词：亚砷酸间充质干细胞细胞增殖细胞凋亡
- 亚砷酸诱导人骨髓间充质干细胞凋亡的研究
- 2007年
- 目的研究亚砷酸(ATO)体外对人骨髓间充质干细胞(MSC)凋亡的影响。方法在正常人髂后上棘穿刺获得MSC,体外培养传代,取第3代细胞鉴定后进行实验。纯化的MSC与1、5、10μmol/L的ATO共孵育,分别在6、12、24 h用HE染色观察细胞形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构,流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡情况。结果ATO可致MSC形态明显改变;不同浓度ATO对MSC作用24 h可见不同阶段的凋亡细胞;FCM检测表明,ATO可诱导MSC凋亡,该作用随ATO浓度和作用时间增加而增强。结论ATO可在体外诱导MSC凋亡,并呈时间和浓度依赖性。
- 陈晓晨吴德沛陈峰常伟荣
- 关键词：亚砷酸盐类骨髓间充质干细胞凋亡
