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穿心莲对实验性肝硬化大鼠肠道细菌移位的阻断作用被引量：3: 2007年; 目的探讨穿心莲对实验性肝硬化大鼠肠道细菌移位的作用,为其临床应用提供依据。方法将30只肝硬化模型大鼠随机分为4组:穿心莲(AN)组[n=8,穿心莲0.5g/(kg.d)],诺氟沙星(NF)组[(n=8,诺氟沙星0.3g/(kg.d)],穿心莲+诺氟沙星(AN+NF)组[n=8,穿心莲0.5g/(kg.d)+诺氟沙星0.3g/(kg.d)],肝硬化对照(CN)组[n=6,生理盐水2ml/(kg.d)],治疗2周后结束。比较各组大鼠死亡率,取外周静脉血检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)水平;取肠系膜淋巴结、血液、肝、脾和回肠内容物做细菌培养;采用高压液相色谱法检测肠黏膜通透性;部分肝脏和回肠组织作病理切片检查。结果与CN组相比,AN、NF和AN+NF组的TNF-α、NO浓度显著降低(均P<0.05),回肠细菌计数和细菌移位发生率显著下降(均P<0.05),AN和NF组的肠道通透性显著下降(均P<0.05)。病理检查发现CN组肝硬化大鼠回肠绒毛变短、破坏,炎症细胞浸润增多,而其他3组的肠绒毛结构改变不明显。结论穿心莲能有效阻断肝硬化大鼠的肠道细菌移位。; 吴春明覃慧敏李洪涛宋建新; 关键词：肝硬化穿心莲细菌移位

高效液相色谱用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定被引量：3: 2008年; 目的建立通过双糖吸收试验评价肝硬化大鼠肠道通透性的高效液相色谱法(HPLC)。方法建立四氯化碳诱导大鼠肝硬化模型。采用HPLC检测30例正常大鼠和30例肝硬化大鼠尿液标本中甘露醇和乳果糖排出率比值。以NH2柱(4.6mm×250mm×5mm,Warters)为色谱柱;柱温为室温;流动相为乙腈∶水70∶30(V/V);流速为1.0ml/min;进样量为20μl。示差折光检测器(RID2000)。结果在上述色谱条件下,尿样中甘露醇和乳果糖能得到良好基线分离,甘露醇和乳果糖的出峰时间分别为6.721min和9.242min。该法检测甘露醇和乳果糖的线性范围分别为5～1000μg/ml、2.5～500μg/ml。甘露醇的加样回收率在92.7%～98.0%,乳果糖的加样回收率在91.3%～97.4%。肝硬化大鼠肠道通透性(乳果糖/甘露醇比值:0.03578±0.01245)显著高于正常大鼠(0.02563±0.00871)。结论HPLC检测肠道通透性具有准确性高、重复性好、简便灵敏等特点,可用于肝硬化大鼠肠道通透性的测定和监测。; 覃慧敏吴春明李洪涛李国军宋建新; 关键词：高效液相色谱肝硬化肠道通透性乳果糖甘露醇

穿心莲对肝硬化大鼠肠道细菌过度生长、细菌移位和肠道通透性的作用被引量：10: 2008年; 目的:探讨穿心莲对肝硬化大鼠肠道细菌过度生长、细菌移位和肠道通透性的作用,为其临床应用提供依据。方法:建立大鼠四氯化碳肝硬化模型。将30只肝硬化大鼠随机分为4组:AN组(n=8,穿心莲0.5g·kg-1·d-1)、NF组(n=8,诺氟沙星0.3g·kg-1·d-1)、AN+NF组(n=8,穿心莲0.5g·kg-1·d-1+诺氟沙星0.3g·kg-1·d-1)、CN组(n=6,生理盐水4mL·kg-1·d-1),给药2周。取外周静脉血检测血浆ALT、AST、TP、TNF-α、NO水平,并获取肠系膜淋巴结、血液、肝、脾和回肠内容物做细菌培养。采用高压液相色谱法间接检测肠黏膜通透性,部分肝脏和回肠组织作病理切片。结果:与CN组相比,AN组、NF组和AN+NF组的NO、TNF-α的浓度显著降低(P<0.05,P<0.01),回肠细菌计数和细菌移位发生率显著下降(P<0.01)。AN组和NF组的肠道通透性显著下降(P<0.05)。病理检查发现CN组肝硬化大鼠回肠绒毛变短、破坏,炎症细胞浸润增多。结论:给予肝硬化大鼠穿心莲能抑制肠道细菌过度生长,减少细菌移位的发生率,对肠道黏膜屏障有保护作用,服用穿心莲可能有益于防治肝硬化肠源性细菌感染。; 邢铭友吴春明覃慧敏李洪涛宋建新; 关键词：肝硬化肠道通透性肠道细菌过度生长穿心莲细菌移位

铜绿假单胞菌密度感应信号分子OdDHL对小鼠肥大细胞作用观察: 2009年; 目的通过化学合成铜绿假单胞菌密度感应（quorum sensing，QS）信号分子OdDHL，并观察该分子对小鼠肥大细胞生物学作用。方法通过化学方法合成OdDHL分子，经质谱、磁共振和高效液相色谱确定其结构和纯度，并采用OdDHI．分子感应菌株检测其生物活性。以不同浓度OdDHL分子作用于小鼠肥大细胞系P815，观察不同时间点细胞活力改变、凋亡现象以及胞内钙离子变化。结果成功合成具有生物活性的OdDHL分子，该分子能以时间、剂量依赖方式抑制细胞活力，并能诱导细胞凋亡，同时可卜调胞内钙离子浓度。结论铜绿假单胞菌OdDHL分子可诱导P815细胞凋亡并上调胞内钙离子浓度。; 李洪涛王丽丽叶露毛艳谢旭华宋建新; 关键词：铜绿假单胞菌密度感应系统肥大细胞

穿心莲内酯抑制铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM的作用被引量：16: 2010年; 目的:研究穿心莲内酯对铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM的作用及其机制。方法:采用实时荧光定量PCR分别检测PAO1和MexAB-OprM过度表达株Mex1、Mex2、Mex3培养3h及加入穿心莲内酯0,100,200mg·L-1再培养6h的MexB基因表达量。采用Mueller-Hinton倍比稀释法,检测头孢他啶、头孢匹罗、氯霉素、左氧氟沙星、卡那霉素、依米配能、美罗培南对上述菌株的最小抑菌浓度(MIC)。结果:培养9h与3h相比,PAO1、Mex1、Mex2、Mex3的MexB表达量显著升高,P值分别为0.031,0.027,0.030,0.012。穿心莲内酯100,200mg·L-1组与对照组相比,头孢他啶、头孢匹罗、左氧氟沙星、美罗培南对PAO1、Mex1、Mex2、Mex3株菌的MIC分别降低50%,75%,75%和50%～75%,而对PAO1株QS信号分子C4-HSL的分泌差异无显著性。结论:外排泵MexAB-OprM主要在稳定生长期表达,穿心莲内酯对铜绿假单胞菌外排泵MexAB-OprM转录表达的抑制作用使其可恢复部分抗菌药物的敏感性,而这种作用并非通过抑制C4-HSL的分泌而实现。; 郭威周莹叶露王丽丽吴春明覃慧敏李洪涛宋建新; 关键词：穿心莲内酯铜绿假单胞菌外排泵密度感应

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湖北省卫生厅科研基金(NX200506)