广东省卫生厅资助课题(A2009193)
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 相关作者:李朝霞陈馨袁青陈忠城黄建华更多>>
- 相关机构:中山大学附属第三医院广东医学院中山大学更多>>
- 发文基金:广东省卫生厅资助课题更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 利用大肠埃希菌分泌表达乙型肝炎病毒核心抗原
- 2011年
- 目的:研究乙型肝炎病毒核心(C)基因在大肠埃希菌(E.coli)中的表达,以期获得分泌表达的具有良好免疫反应性和特异性的HBcAg。方法:构建重组质粒pET-3c-cAg、pET-30a-cAg、pGEX-4T-1-cAg,转入E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达HBcAg。SDS-PAGE、ELISA和Western blot对表达产物进行分析。结果:限制性内切酶酶切和DNA序列分析证实HBV C基因正确克隆到E.coli各表达载体中。ELISA和Western blot分析表明,以pET-3c和pET-30a为表达载体能在E.coli分泌表达HBcAg,而以pGEX-4T-1为载体只能胞内表达,其中以pET-3c为载体的分泌表达量最高,培养上清中其效价为1∶128;用分泌表达的HBcAg作为诊断抗原检测抗-HBc阴阳性血清及国家参考品,符合率为100%。结论:成功获得HBcAg在E.coli的分泌表达,且其具有较高的特异性和免疫反应性。
- 吴宗华胡波李朝霞祝中一
- 关键词:乙型肝炎核心抗原大肠埃希菌基因
- EB病毒LMP-1、BALF_4及BARF_1片段的B细胞表位预测被引量:2
- 2012年
- 目的:预测EB病毒LMP-1、BALF4及BARF1片段的B细胞表位。方法:采用Protean软件分析EBV的LMP1、BALF4及BARF1三个氨基酸片段的亲水性、表面可能性、抗原指数及其二级结构中的柔性区域,并结合吴玉章的抗原指数预测法预测其B细胞表位。结果:B细胞表位可能位于LMP-1 N端第356-358,2-19,249-314区段,BARF1N端第8-11,18-25,41-49,203-211区段,BALF4N端第385-387,833-845,398-415,427-435,453-458,23-32,466-473,234-250,642-652区段;另外LMP-1第185-223、BARF1第265-272,132-135以及BALF4第827-832区段内或附近也可能存在B细胞表位。结论:用多参数同时预测LMP-1、BALF4及BARF1的B细胞表位,为制备高效的鼻咽癌血清学诊断试剂和表位疫苗奠定了理论基础。
- 袁青陈忠城李朝霞陈馨
- 关键词:EB病毒LMP-1B细胞表位
- EB病毒潜伏膜蛋白1的B细胞表位预测被引量:1
- 2011年
- 目的预测EB病毒潜伏膜蛋白1(Latent Membrane Protein1,LMP1)的B细胞表位。方法基于EB病毒基因组序列,采用DNAStar Lasergene软件包中的Protean软件,对LMP1的亲水性,表面可能性,抗原指数及其二级结构中的柔性区域进行分析,并结合吴玉章的抗原指数预测法预测其B细胞表位。结果 B细胞表位最有可能位于潜伏膜蛋白N端第356-358,2-19,249-314区段或其附近,而潜伏膜蛋白N端第185-223区段内或附近也可能存在B细胞表位。结论用多参数预测EB病毒LMP1的B细胞表位,为鼻咽癌的筛查及抗肿瘤转移靶向治疗的分子免疫学研究奠定基础。
- 黄建华叶少雄李朝霞彭海山
- 关键词:EB病毒潜伏膜蛋白1B细胞表位