国家自然科学基金(30671573)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：王春凤杨桂连叶丽萍陈晓雷何佳雪更多>>
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- 猪A组轮状病毒pW425et-Vp4基因工程乳酸菌的构建及表达被引量：3
- 2012年
- 以嗜酸乳杆菌为受体菌株,将pW425et-Vp4重组质粒电转化入嗜酸乳杆菌,构建猪源A组轮状病毒Vp4基因工程乳酸菌,对影响电转化效率的主要因素进行研究,并对构建的乳酸菌进行表达分析。结果表明,在MRS培养基中加入1%甘氨酸+0.3mol/L蔗糖,电场强度为11kV/cm,脉冲时间为3.8ms,电击后细胞复苏3～4h等条件时,得到较高的转化效率,最高可达3.8×104 CFU/μg DNA。pW425et-Vp4乳酸菌阳性克隆经Western-blot分析表明,其蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性。
- 叶丽萍王春玲王春凤
- 关键词：乳酸菌电转化
- 绿色荧光蛋白标记穿梭表达载体构建及重组乳酸菌制备被引量：6
- 2009年
- 以红霉素耐药性基因/thyA基因双筛选压力大肠杆菌—乳酸杆菌穿梭表达载体pW425et为基本骨架,将绿色荧光蛋白(GFP)基因插入该载体,构建GFP标记的穿梭表达载体pW425et-GFP。通过连续的荧光强度检测,验证gfp基因能否在重组菌中得到稳定表达。重组表达质粒pW425et-GFP酶切和PCR鉴定结果与预期片段大小相符,SDS-PAGE显示27 kD的绿色荧光蛋白获得表达,在蓝光的激发下,可见明显的绿色荧光,且荧光稳定性强,连续传代30次仍可见荧光。结果表明已成功构建了GFP标记穿梭表达载体pW425et-GFP,为乳酸菌作为益生生理菌载体进行体内定植规律研究和食品级、疫苗级乳酸菌产品的开发奠定了基础。
- 陈晓雷杨桂连王春凤
- 关键词：绿色荧光蛋白穿梭表达载体大肠杆菌乳酸菌
- 乳酸菌在ACE抑制肽(降血压肽)研究中的地位与作用
- 高血压是一种慢性的心脑血管疾病,己成为人类健康的第一杀手。通用的降压药物,在治疗时往往会出现疼痛、发烧、恶心等副作用。所以,寻找天然的、安全的、食品来源的降压物质来治疗高血压病成为共同关注的焦点.研究表明乳酸菌发酵制品中...
- 秦守涛杨桂连
- 关键词：乳酸菌血管紧张素转换酶
- 文献传递
- 食品级乳酸菌高效表达载体系统的研究进展
- 本文在乳酸菌表达载体构建的以往研究基础上,本文综述了食品级乳酸菌高效表达载体系统的研究进展。
- 郝凤奇王春凤
- 关键词：食品级乳酸菌
- 文献传递
- 牛乳中乳酸乳球菌nisRK基因的克隆与序列分析被引量：4
- 2010年
- 以一株分离自牛乳中乳酸乳球菌染色体DNA为模板,采用PCR技术扩增出乳链菌肽生物合成的双组分调控元件(nisRK基因)。试剂盒回收纯化nisRK基因后将其克隆入以氨苄青霉素为选择压力的pGEM-T克隆载体中,再转化E.coliDH5α感受态细胞,筛选阳性克隆,提取重组体,进行酶切鉴定和PCR鉴定,并对nisRK基因进行序列测定,与已知序列进行同源性比较。结果表明成功地克隆出nisRK基因,全长为2 035 bp,与国外报道的nisRK基因同源性高达99.9%。
- 郝凤奇王春凤杨桂连叶丽萍杨中娜
- 关键词：乳酸乳球菌克隆
- 嗜酸乳杆菌S-层蛋白表面展示系统的构建
- 【目的】旨在克隆和表达嗜酸乳杆菌 S-层蛋白,用其构建能承载外源抗原表位的乳酸菌细胞表面展示系统。【方法】运用 PCR 技术克隆出表达 S-层蛋白 SlpA 基因序列全长1335bp,其中包括 N- 末端的信号肽和可变区...
- 刘琼王春凤杨桂连秦守涛刘曼
- 关键词：嗜酸乳杆菌S-层蛋白
- 文献传递
- 猪肠道内乳酸菌数量和分布规律
- 猪肠道内分布着大量的正常菌群,乳酸菌作为益生菌在调节胃肠道正常菌群、维持微生态平衡,提高免疫力等方面发挥着重要作用。在益生乳酸菌的众多种类中,与动物关系最密切的是乳酸杆菌属、双歧杆菌属和肠球菌属。本文就乳酸杆菌、双歧杆菌...
- 马坤王春凤
- 关键词：肠道乳酸菌
- 文献传递
- 乳酸菌免疫调节功能研究进展
- 本文综述了乳酸菌对机体免疫调节功能的研究进展,并对乳酸菌在免疫方面的应用作了展望。
- 刘琼王春凤
- 关键词：乳酸菌
- 文献传递
- 鹅细小病毒VP2结构蛋白基因重组植物乳杆菌的制备及表达产物检测
- 以鹅细小病毒染色体DNA为模板,PCR扩增GPV主要结构蛋白VP2基因,试剂盒回收纯化VP2基因后将其克隆入以氨苄青霉素为选择压力的pGEM-T克隆载体中,再转化E.coli JM109感受态细胞,筛选阳性克隆,提取重组...
- 李亚杰王春凤杨桂连郝凤奇袁起伟
- 关键词：鹅细小病毒VP2基因植物乳杆菌
- 文献传递
- 鸡白痢沙门氏菌外膜蛋白C基因(OmpC)的克隆与表达被引量：5
- 2009年
- 以鸡白痢沙门氏菌基因组DNA为模板,采用PCR技术扩增得到1026bp的OmpC基因片段。将扩增的OmpC基因克隆至大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et中,构建原核表达重组质粒pW425et-OmpC。将pW425et-OmpC转化至thyA基因缺陷型大肠杆菌感受态E.coliX13中。SDS-PAGE分析可见1条约36ku的融合蛋白。Western blot分析表明,该重组蛋白具有反应原性,本研究结果为pW425et-OmpC在乳酸菌中的表达提供了实验依据。
- 刘曼杨桂连王春凤刘琼何佳雪李颖
- 关键词：鸡白痢沙门氏菌
