江苏省教育厅自然科学基金(09KJB530011)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 相关领域：生物学更多>>
- 新型中性植酸酶在大肠杆菌中的高效表达、纯化及酶学性质被引量：3
- 2012年
- 运用基因工程技术,将克隆到的淀粉液化芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061新型中性植酸酶基因(GenBank登录号为HM747163)构建到表达载体pET22b(+)上,并在E.coli BL21(DE3)中进行高效表达。电泳结果表明该酶分子质量约为42kD,目的蛋白占大肠杆菌可溶性蛋白30%左右。利用Ni-NTA琼脂糖凝胶进行亲和纯化,酶学性质研究表明,其最适温度为60℃,最适pH值为7.0,最大酶比活力为15U/mg。60℃时以植酸钠为底物的Km值为0.30mmol/L。
- 路国伟许伟邵荣云志
- 关键词：中性植酸酶酶学性质
- 芽孢杆菌植酸酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2011年
- 采用PCR技术从Bacillus amyloliquefaciens DSM 1061中克隆到植酸酶的全长基因phyC(1152bp),并将该基因成功克隆到表达载体pET22b(+),经PCR鉴定和DNA测序证明,pET22b(+)-phyC重组质粒构建成功。将该酶的氨基酸序列在Swiss-prot数据中进行BLAST比对发现,该序列未见报道,其与来自Bacillus subtilis的植酸酶序列(Swiss-prot ID:O31097)最相似,序列一致性为98.7%。分析可知该氨基酸序列在位点为128、144、153、257和370处分别变异为Ala、Ile、Ser、Pro和Lys。运用SignalP 3.0服务器对其信号肽进行预测,表明该酶N端1～26个残基可能是信号肽序列。运用SWISS-MODEL服务器进行同源建模,经PROCHECK V3.5软件对其Ramachandran plot、G-factor等进行评价,结果显示结构模型中的键长、键角及二面角的分布及结构合理。该基因已在GenBank上登录(登录号为HM747163)。
- 许伟仇明余晓红封功能邵荣
- 关键词：植酸酶基因克隆同源建模
- 中性植酸酶结构与功能关系研究进展被引量：2
- 2010年
- 中性植酸酶是一种新型、绿色环保的饲料用酶。从中性植酸酶的微生物来源、酶学性质、序列结构特点及分子改造研究等方面进行综述,以期为改善中性植酸酶的热稳定性及催化活性提供参考。
- 许伟邵荣余晓红仇明封功能
- 关键词：中性植酸酶
