河南省教育厅自然科学基金(2008A320011)
- 作品数：8 被引量：29H指数：3
- 相关作者：潘莹杨君夏永华秦海霞华方方更多>>
- 相关机构：新乡医学院第一附属医院新乡医学院第三附属医院新乡医学院更多>>
- 发文基金：河南省教育厅自然科学基金河南省卫生厅医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- miR-143通过靶向调控K—ras基因的表达抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖被引量：8
- 2016年
- 目的探讨miR－143靶向K－ras基因对宫颈癌细胞HeLa增殖的调控作用机制。方法选取宫颈癌细胞系HeLa，分别转染miR－143模拟物和模拟物对照，采用实时荧光PCR法检测HeLa细胞中miR－143的表达。将荧光素酶报告载体与miR－143模拟物共转染，采用荧光素酶活性实验验证miR－143对HeLa细胞的靶向作用。以miR－143模拟物、miR－143模拟物对照以及miR－143模拟物＋K－ras基因分别转染HeLa细胞，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞的增殖活性，采用Western blot法检测各组细胞中K－ras蛋白的表达。选取5例人宫颈癌组织标本和宫颈上皮内瘤变组织样本，采用实时荧光PCR法检测miR－143的表达，采用Western blot法检测K－ras蛋白的表达。结果实时荧光PCR检测结果显示，转染miR－143模拟物组宫颈癌HeLa细胞中miR－143的表达水平为3.31±0.45，明显高于阴性对照组（0.97±0.22, P〈0.05）。双荧光素酶活性检测结果显示，miR－143模拟物可明显抑制野生型K－ras报告载体的荧光素酶活性，但对突变型K－ras报告载体的荧光素酶活性并无明显的抑制作用。MTT法检测结果显示，转染miR－143模拟物后，宫颈癌HeLa细胞的增殖活性较阴性对照组明显降低（P〈0.05）；而转染miR－143模拟物＋K－ras基因后，宫颈癌HeLa细胞的增殖活性较单纯转染miR－143模拟物组明显提高（P〈0.05），但仍明显低于阴性对照组（P〈0.05）。Western blot法检测结果显示，阴性对照组、miR－143模拟物组、miR－143模拟物＋K－ras组K－ras蛋白的表达水平分别为521.36±41.89、115.27±34.08和706.52±89.44，miR－143模拟物组K－ras蛋白的表达较阴性对照组明显降低（P〈0.05）；miR－143模拟物＋K－ras组K－ras蛋白的表达较miR－143模拟物组和阴性对照组明显增高（P〈0.05）。实时荧光PCR检测结果显示，人宫颈癌组织中miR－143的表达水平（0.32±0.06
- 秦海霞崔红凯潘莹户瑞丽朱利红王世进
- 关键词：宫颈肿瘤HELA细胞
- HDAC6小分子RNA对子宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制
- 2012年
- 宫颈癌的发生位居女性肿瘤的第3位，每年全球范围大约有371200例新病例被诊断，由于其高达51％的病死率而成为公众关注的健康问题。然而，目前对于宫颈癌的治疗主要是基于铂类药物为基础的化疗以及手术和放疗，这些治疗的效果十分有限。
- 秦海霞任艳芳杨君华方方梁武凤陈友国潘莹
- 关键词：HELA细胞增殖小分子RNA分子机制女性肿瘤铂类药物
- 组蛋白去乙酰化酶6在宫颈癌组织中的表达及其临床意义被引量：3
- 2012年
- 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)在宫颈癌组织中的表达及其临床价值。方法:采用免疫组织化学染色法检测63例宫颈癌组织、38例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和63例正常宫颈上皮组织中HDAC6蛋白的表达,并分析其与宫颈癌患者临床病理参数之间的关系。采用Western blotting随机检测4例宫颈癌组织及自身相对应正常宫颈上皮组织中HDAC6蛋白的表达。结果:宫颈癌组织中HDAC6蛋白表达的阳性率显著高于CIN组织和正常宫颈上皮组织(P<0.05)。HDAC6蛋白表达与宫颈癌患者年龄和组织学分化无关(P>0.05),但与临床分期、浸润深度和淋巴结转移密切相关(P<0.01或P<0.05)。进一步的Western blotting结果表明宫颈癌组织中HDAC6蛋白的表达均显著高于正常宫颈上皮组织(P<0.05)。结论:HDAC6有望成为评价宫颈癌恶性程度和预后的指标。
- 华方方夏永华陈瑞香王玉红潘莹杨君梁武风
- 关键词：宫颈肿瘤预后
- 组蛋白去乙酰化酶2表达下调对宫颈癌细胞增殖和细胞周期的影响被引量：2
- 2012年
- 目的探讨组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）表达下调对宫颈癌细胞增殖和细胞周期的影响，并分析其可能的分子机制。方法将HI）AC2小干扰RNA（siRNA）和对照siRNA转染宫颈癌HeLa细胞，采用细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）分析转染前后细胞增殖的变化，利用流式细胞术检测转染前后细胞周期分布的变化，采用Westernblot方法分析与细胞增殖和细胞周期相关蛋白表达的变化。结果HDAC2 siRNA能明显下调宫颈癌细胞中HDAC2蛋白的表达，其表达下调能明显抑制宫颈癌细胞的增殖。HDAC2 siRNA组中HeLa细胞在G0／G1期的细胞比率为63．3％±2．0％，显著高于未处理组（29．3％±1．7％）和对照siRNA组（29．4％±1．7％），F=354．181，P=0．000。Westernblot结果显示，HDAC2表达下调能明显抑制cyclin D1、cyclin E和CDK2蛋白的表达，增加p21蛋白的表达。结论HDAC2表达下调介导的细胞增殖抑制和周期阻滞可能与cyclin D1、cyclin E和CDK2蛋白表达的下调和p21蛋白表达的升高密切相关。
- 华方方夏永华吴大鹏陈瑞香王玉红潘莹杨君梁武风
- 关键词：宫颈肿瘤细胞增殖细胞周期细胞周期蛋白类肿瘤
- 宫颈癌术前动脉介入栓塞化学治疗和静脉化学治疗疗效比较
- 2013年
- 目的比较2种新辅助化学治疗方法对Ⅰb2～Ⅱb期宫颈癌患者的疗效及化学治疗不良反应。方法回顾性分析136例Ⅰb2～Ⅱb期宫颈鳞状细胞癌患者的临床资料,其中术前行动脉介入栓塞化学治疗(介入组)58例,静脉化学治疗(全身化学治疗组)78例,比较2组的临床疗效、化学治疗不良反应、可手术率、化学治疗后至手术实施间隔时间。结果介入组有效率为84.48%,全身化学治疗组有效率为80.77%,2组有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);介入组手术率为96.55%,全身化学治疗组手术率为93.59%,2组手术率比较差异无统计学意义(P>0.05)。介入组术前住院时间、化学治疗不良反应、化学治疗后至手术时间均明显少于全身化学治疗组(P<0.01),住院总费用介入组明显高于全身化学治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 2种新辅助化学治疗方法对Ⅰb2～Ⅱb期宫颈癌的治疗均安全有效;动脉介入化学治疗疗程短,不良作用小,见效快,对于经济条件较好的宫颈癌患者术前辅助治疗更为适合。
- 秦海霞夏永华杨君任艳芳华方方崔红凯潘莹
- 关键词：宫颈癌新辅助化学治疗
- 白细胞介素-4在油酸性急性肺损伤家兔的表达被引量：2
- 2012年
- 目的观察白细胞介素-4(IL-4)在油酸性急性肺损伤(ALI)家兔的表达,探讨IL-4在家兔油酸性ALI发病机制中的作用。方法 20只新西兰家兔随机分为油酸性ALI模型组(实验组)和对照组,每组10只。检测2组家兔动脉血氧分压(PaO2)、肺组织IL-4表达情况和髓过氧化物酶(MPO)活性、外周血和支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4表达水平,并进行比较。结果实验组家兔肺组织、外周血和BALF中IL-4的表达水平显著高于对照组(P<0.05),实验组家兔PaO2显著低于对照组(P<0.05);实验组家兔肺组织中MPO活性显著高于对照组(P<0.01);实验组家兔PaO2水平与IL-4的表达呈负相关(r=-0.412 5,P<0.05)。结论 IL-4表达上调与家兔ALI的发生发展有关。
- 姚朝阳姬明丽王煜霞王建刚付素珍
- 关键词：急性肺损伤白细胞介素-4髓过氧化物酶
- miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1对卵巢癌细胞增殖的影响被引量：3
- 2016年
- 目的:探讨miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(rho associated coiled-coil forming protein kinase 1,ROCK1)对卵巢癌细胞系SKOV3增殖的调控作用。方法:(1)选取卵巢癌细胞系SKOV3及人正常卵巢上皮细胞系IOSE80,采用RT-PCR检测各组细胞中miR-335表达;采用Western blot检测各组细胞中ROCK1蛋白表达;(2)选取卵巢癌细胞系SKOV3,分别转染miR-335 mimic及mimic control,采用RT-PCR检测细胞中miR-335表达;(3)选取卵巢癌细胞系SKOV3,将SKOV3荧光素酶报告载体与miR-335 mimic共转染,采用荧光素酶活性实验验证miR-335对SKOV3的靶向作用;(4)选取卵巢癌细胞系SKOV3,分为3组,即SKOV3组(转染mimic control)、miR-335 mimic组(转染miR-335 mimic)及miR-335 mimic+ROCK1组(共转染miR-335mimic+ROCK1),采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用Western blot检测各组细胞中ROCK1蛋白表达,采用RT-PCR检测细胞中Cyclin D1表达。结果:(1)RT-PCR结果显示,卵巢癌细胞SKOV3中miR-335表达显著低于人正常卵巢上皮细胞IOSE80(P<0.05);Western blot结果显示,卵巢癌细胞SKOV3中ROCK1蛋白表达显著高于人正常卵巢上皮细胞IOSE80(P<0.05);(2)RT-PCR结果显示,转染miR-335 mimic可使卵巢癌细胞SKOV3中miR-335表达上调,与转染mimic control相比较差异具有统计学意义(P<0.05);(3)双荧光素酶活性检测结果显示,miR-335 mimic可显著抑制野生型ROCK1-Wt报告载体的荧光素酶活性,但对突变型ROCK1-Mut报告载体的荧光素酶活性并无显著抑制作用;(4)转染miR-335mimic后,卵巢癌细胞SKOV3增殖活性及Cyclin D1表达较阴性对照组显著降低(P<0.05);而转染miR-335 mimic+ROCK1后,卵巢癌细胞SKOV3增殖活性及Cyclin D1表达较单纯转染miR-335 mimic组显著提高(P<0.05),但仍显著低于阴性对照组(P<0.05)。Western blot检测结果显示,转染miR-335mimic后,卵巢癌细胞SKOV3中ROCK1蛋白表达较阴性对照组显著降低(P<0.05);而转染miR-335 mimic+ROCK1后,ROCK1蛋白表达较单纯转染miR-335mimic�
- 秦海霞崔红凯潘莹户瑞丽朱利红王世进
- 关键词：卵巢癌靶向细胞增殖
- AEG-1表达下调对人宫颈癌细胞细胞周期和侵袭能力的影响及其机制被引量：11
- 2013年
- 目的:研究星形细胞上调基因1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)在人宫颈鳞癌细胞和组织中的表达,探讨AEG-1表达下调对宫颈癌SiHa细胞细胞周期和侵袭能力的影响,并分析其可能的分子机制。方法:采用Western blotting检测正常宫颈组织、宫颈鳞癌组织、HeLa、SiHa和CaSki细胞中AEG-1蛋白的表达。将对照siR-NA和AEG-1 siRNA分别转染SiHa细胞,利用Western blotting检测SiHa细胞中AEG-1蛋白的表达,采用流式细胞术检测细胞周期分布的变化,采用Boyden小室检测细胞侵袭能力的变化,最后采用Western blotting检测cyclin D1、细胞周期素依赖性激酶2(CDK2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达的变化。结果:宫颈鳞癌组织中AEG-1蛋白表达显著高于正常宫颈组织(P<0.05),同时3株宫颈癌细胞中AEG-1蛋白表达均显著高于正常宫颈组织,其中SiHa细胞中AEG-1蛋白表达最高(P<0.05)。此外,AEG-1 siRNA能显著下调SiHa细胞中AEG-1蛋白的表达(P<0.05),其表达下调能明显促使SiHa细胞在G0/G1期的比例增加和降低其侵袭能力。Western blotting结果表明,AEG-1 siRNA组中cyclin D1、CDK2和MMP-9蛋白的表达均显著低于未处理组和对照siRNA组(P<0.05)。结论:AEG-1在宫颈癌中的高表达可能与宫颈癌的发生发展密切相关,其表达下调介导的细胞周期静止和侵袭能力降低可能与cyclin D1、CDK2和MMP-9蛋白表达下调密切相关。
- 秦瑞英夏永华任艳芳潘莹杨君王慧玲王玉红
- 关键词：小干扰RNA细胞周期肿瘤侵袭
