中山市科技计划项目(20113A002)
- 作品数：10 被引量：50H指数：4
- 相关作者：许晓军何慧清周睿卿牛晓敏郭坤元更多>>
- 相关机构：中山大学南方医科大学广东省中山市人民医院更多>>
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- X射线照射对小鼠辅助性T细胞相关细胞因子的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 观察不同剂量X射线照射对小鼠辅助性T细胞相关细胞因子的影响.方法 100只BALB /c小鼠用随机数字表法分为4组,包括健康对照组和X射线照射组（分别予2、4和6 Gy照射）,每组25只.于照射前、照射后7、14、21和28 d,对小鼠一般情况进行观察,对外周血进行白细胞计数,用蛋白芯片检测血清中辅助性T细胞相关细胞因子含量,并用ELISA确证细胞因子的浓度变化.结果 照射后,小鼠外周血白细胞14d降至最低,同一时间点的下降程度随照射剂量增加而增加（F=86.267,P＜0.05）.芯片法初筛提示,细胞因子IFN-IFTGF-β、IL-6、IL-17上调,IL-5、IL-23、TNF-α下调.ELISA检测可见,IL-17浓度随辐射剂量增高而明显增高,6 Gy组在7、14和21 d均明显高于对照（t=23.743、21.759和17.662,P＜0.05）;IFN-γ/IL-4浓度在2和4 Gy照射后无明显变化,6 Gy照射后在7、14、21和28 d均比健康对照组明显增高（t=8.335、9.982、6.990和3.074,P＜0.05）,呈先升高后降低的变化趋势,14 d达高峰.结论 低于致死剂量的X射线照射可使小鼠血清IFN-γ 、TGF-β、IL-6、IL-17细胞因子浓度升高,呈Thl细胞偏移.
- 周睿卿何慧清郭子文牛晓敏李卫华邱大发许晓军王静
- 关键词：X射线辅助性T细胞细胞因子干扰素-Γ白介素-17
- 三氧化二砷联合阿克拉霉素对急性髓系白血病KG-1a细胞的协同杀伤效应被引量：5
- 2017年
- 目的 探讨三氧化二砷（ATO）联合阿克拉霉素（ACM）对急性髓系白血病细胞株KG-1a的协同细胞杀伤效应及其分子机制。方法 采用克隆形成实验检测不同浓度ATO和ACM对KG-1a细胞增殖的影响，采用Compusyn软件分析两药联合是否具有协同作用，采用瑞氏染色法和流式细胞术分析两药联合对KG-1a细胞诱导凋亡作用，采用Western blot法分析两药联合后凋亡相关蛋白表达的差异。结果 ATO和ACM单药对KG-1a细胞具有生长抑制作用，且呈剂量依赖性增加。流式细胞术检测结果显示，0.4 μmol/L ATO＋10 nmol/L ACM处理48 h后，KG-1a细胞的凋亡率为（34.5±3.1）%，与0.4 μmol/L ATO单药组和10 nmol/L ACM单药组[分别为（7.6±1.1）%和（18.7±2.3）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。1.5 μmol/L ATO＋37.5 nmol/L ACM组KG-1a细胞的凋亡率为（52.5±4.7）%，与1.5 μmol/L ATO单药组和37.5 nmol/L ACM单药组[分别为（19.1±3.2）%和（27.7±2.2）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。3.0 μmol/L ATO＋75 nmol/L ACM组KG-1a细胞的凋亡率为（61.3±4.5）%，与3.0 μmol/L ATO单药组和75 nmol/L ACM单药组[分别为（29.5±2.5）%和（28.6±3.4）%]比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。与单药组比较，联合组KG-1a细胞的细胞质空泡化、细胞皱缩和细胞核收缩等细胞凋亡的形态学变化更明显。Compusyn软件分析结果显示，联合药物处理组的联合指数均〈1，表明两药联合具有协同细胞杀伤作用。结论 ATO联合ACM对急性髓系白血病细胞株KG-1a具有协同细胞杀伤作用，该协同作用可能通过激活凋亡相关信号通路，抑制KG-1a细胞的增殖并诱导凋亡。
- 叶永斌许晓军陈艳红张明宛邱大发郭子文何慧清
- 关键词：砒石
- 肿瘤细胞的糖酵解能量代谢机制被引量：12
- 2012年
- 肿瘤细胞与正常分化细胞对比有着不同的能量代谢表型,其多通过糖酵解途径消耗更多的葡萄糖,并产生大量的乳酸,却很少利用氧化磷酸化(OXPHOS)进行产能。但肿瘤细胞高糖酵解能量代谢表型的具体分子机制目前尚不完全明确。肿瘤细胞高糖酵解活性可能涉及到糖酵解酶和葡萄糖转运蛋白过表达、OXPHOS酶系和转运蛋白的低表达、线粒体含量减低及DNA对氧化应激的高敏性等机制。然而,肿瘤细胞间遗传、生化和形态学上存在异质性,其升高的糖酵解活性均有自己的不同机制。本文对肿瘤细胞高糖酵解活性的基因和生化调节机制进行具体分析,并讨论肿瘤细胞降低的线粒体代谢和OXPHOS功能的机制。提示肿瘤细胞能量代谢的差异可作为高糖酵解肿瘤细胞的一个治疗靶向。
- 宋奎许晓军
- 关键词：糖酵解能量代谢肿瘤
- 白消安联合环磷酰胺诱导小鼠急性移植物抗宿主病模型的建立被引量：1
- 2015年
- 目的以白消安(BS)联合环磷酰胺(CP)作为移植前预处理方案建立稳定的小鼠急性移植物抗宿主病(a GVHD)模型。方法雄性BALB/c(H-2kd)为受体鼠,雌性C57BL/6(H-2kb)为供鼠,受体鼠接受100 mg/kg BS和200 mg/kg CP预处理后,输入2×107个供鼠的骨髓细胞或2×107个骨髓细胞联合2×107个脾细胞。记录移植后小鼠一般情况,观察a GVHD临床表现,HE染色后检查组织病变情况,流式细胞术检测脾脏、骨髓中细胞嵌合度。结果移植骨髓联合脾细胞组小鼠,移植后7 d开始出现典型a GVHD临床表现,肝、脾、肠、皮肤、肺等组织出现GVHD相关病理形态学改变,并达到完全供者嵌合,中位生存期为10 d,30 d内全部死亡;单移植骨髓细胞组小鼠无a GVHD表现,生存期大于45 d。结论成功建立了稳定可靠的a GVHD小鼠模型,可用于a GVHD的发病机制、防治效果的实验性研究。
- 贺信许晓军王静伊文芳叶永斌黄宇贤郭坤元
- 关键词：白消安环磷酰胺骨髓移植急性移植物抗宿主病医用实验动物学
- 糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸对异基因小鼠混合培养脾细胞增殖的影响及其机制初步研究被引量：3
- 2014年
- 目的 研究糖酵解抑制剂3-溴丙酮酸（3-BrPA）对单向混合培养的异基因小鼠脾细胞增殖的影响及其机制.方法 以BALB/c（H-2d）小鼠脾细胞为刺激细胞,以C57BL/6（H-2b）小鼠脾细胞为反应细胞,建立单向混合淋巴细胞培养（MLC）体系,给予不同浓度3-BrPA（0～200 μmol/L）处理后,采用CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性,流式细胞术检测MLC体系中反应细胞CD3、CD4、CD8等表面标志表达,ELISA法检测MLC体系上清中IL-4、IFN-γ等细胞因子水平.结果 CCK-8检测结果显示,高浓度（20 μmol/L以上）3-BrPA可抑制MLC体系中的T细胞增殖,并呈剂量依赖性,培养24、36、48 h的半数抑制浓度（IC50值）分别为48.6、41.2和41.9 μmol/L.50 μmol/L 3-BrPA处理24 h后MLC体系上清中IFN-γ的浓度为（164.25±20.14）ng/L,明显低于对照组[（277.61±18.46）ng/L] （P＜0.05）;IL-4的浓度为（31.06±6.06）ng/L,高于对照组[（28.64±3.97） ng/L],IFN-γ/IL-4比值明显降低.结论 浓度为20和50 μmol/L的3-BrPA对体外异基因MLC体系小鼠T细胞增殖有抑制作用,使Thl/Th2细胞平衡向Th2细胞偏移.
- 周睿卿王静邱大发牛晓敏郭子文何慧清许晓军
- 关键词：白细胞介素4干扰素-Γ
- 急性髓系白血病异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒血症对白血病复发的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 探讨急性髓系白血病（AML）患者异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染对白血病复发的影响.方法 回顾性分析2005年1月至2014年1月中山大学附属中山医院血液内科接受allo-HSCT的62例AML患者（除外急性早幼粒细胞性白血病）,观察患者移植后白血病复发与CMV感染及供受者临床特征的关系.结果 单因素分析显示,初诊时白细胞＞100×10^9/L、疾病高危、移植后环孢素浓度低于200 μg/L的患者复发率高,而移植后CMV阳性及慢性GVHD患者复发率低;Cox多因素分析显示,疾病高危（RR=3.296,95％ CI：1.274～8.530,P＝0.014）、无慢性GVHD（RR =0.167,95％ CI：0.042～0.668,P=0.011）及CMV阴性（RR＝0.285,95％CI：0.084 ～0.973,P=0.045）是移植后复发的独立危险因素.结论 AML患者allo-HSCT后CMV血症是影响复发的有利因素之一.
- 牛晓敏何慧清周睿卿许晓军
- 关键词：巨细胞病毒复发
- 小剂量两性霉素B治疗恶性血液病侵袭性真菌感染的效果观察被引量：3
- 2013年
- 目的探讨小剂量两性霉素B治疗恶性血液病侵袭性真菌感染的有效性及安全性。方法我院2008年1月至2012年6月接受治疗的恶性血液病合并侵袭性真菌感染患者98例，应用计算机随机分为对照组和实验组，对照组47例，两性霉素B维持剂量为50—60mg／d；实验组51例，两性霉素B维持剂量为25—30mg／d。比较两组的疗效和不良反应发生率。结果两性霉素B中位累计剂量对照组为725（175，1595）mg，实验组为735（225，1485）mg，差异无统计学意义（P=0．834）；治疗中位时间对照组为19（8，34）d，实验组为29（11，58）d，差异有统计学意义（P=0．000）。治疗14d对照组与实验组可评估疗效者分别为37例和48例，两组总有效率、无进展率、热退率差异均无统计学意义（P均〉0．05）。因不良反应终止治疗者对照组14例（29．8％），实验组6例（11．8％），差异有统计学意义（P=0．027）；对照组肝肾功能损害发生率高于实验组[27．7％（13／47）与11．8％（6／51），P=0．047]。结论两性霉素B维持剂量25～30mg／d临床疗效不低于维持剂量50～60mg／d，不良反应少，临床可操作性强，具有可实践性。
- 牛晓敏许晓军何慧清宋奎李卫华黎伟超
- 关键词：两性霉素B血液病侵袭性真菌感染
- 伊曲康唑联合多柔比星对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响被引量：7
- 2015年
- 目的 研究伊曲康唑（ITC）单药及联合化疗药多柔比星（ADM）对急性髓系白血病细胞增殖及凋亡的影响.方法 活细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测不同浓度ITC、ADM单药及ITC（2、6、15 μmol/L）联合ADM（0.30、0.75 μmol/L）对人急性髓系白血病细胞株KG1α及急性髓系白血病原代细胞的增殖抑制作用;不同浓度ITC持续处理的KG1 α细胞,分别于7、14、21 d观察对集落克隆形成的影响;ADM 0.75 μmol/L、ITC 6 μmol/L及二者联合作用KG1α细胞48 h后,瑞氏染色法观察细胞形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率、线粒体膜电位及细胞周期阻滞情况,Western印迹检测Sonic Hedgehog（Shh）信号通路相关蛋白Shh和胶质瘤相关癌基因同系物1（Gli1）的表达水平.结果 ITC及ADM对KG1α细胞及急性髓系白血病原代细胞均具有增殖抑制作用,并且ITC可降低KG1α克隆形成能力,均呈剂量依赖.Weeb系数检验,ADM0.75 μmol/L与ITC 6 μmol/L两药联合时,细胞实际存活率≤70％细胞预估存活率,有协同效应;联合组与对照组和单药组相比,KG1 α细胞形态变化更为明显.ADM 0.75 μmol/L与ITC 6μmol/L联合诱导KG1α细胞48 h的凋亡率为31.72％±1.58％,均显著高于对照组、ITC单药组和ADM单药组（4.17％±0.74％、4.33％±1.12％、9.53％±1.15％,均P＜0.01）.线粒体膜电位检测中,联合组的低红色荧光细胞（P3）比例明显高于对照组、ADM和ITC单药组（18.80％±0.96％比5.00％±0.38％、9.70％±0.43％、7.10％±0.77％,均P＜0.01）.ADM 0.75 μmol/L与ITC 6 μmol/L联合组与对照组及单药组比明显阻滞细胞于G2期（P＜0.05）.Western印迹结果显示Shh和Gli1的表达水平随着ITC浓度增大而下降.结论 ITC与ADM合用可明显抑制细胞的增殖,增加KG1 α细胞凋亡率、线粒体的损伤及细胞G2期的阻滞;ITC可以抑制Shh信号通路.
- 王静许晓军周睿卿郭坤元
- 关键词：伊曲康唑多柔比星细胞凋亡
- 吉西他滨应用于非霍奇金淋巴瘤的研究进展被引量：11
- 2014年
- 非霍奇金淋巴瘤（non Hodgkin′s lymphoma,NHL）是一组发生于淋巴结和（或）结外部位淋巴组织的恶性肿瘤,是一种在形态学、遗传学和临床表现上都具有高度异质性的淋巴细胞肿瘤,从免疫学角度分为T细胞和B细胞两型,尽管目前传统化疗方案完全缓解率近70%,但依然有50%-60%的侵袭性NHL尚存在复发难治等问题,近年来很多学者研究针对复发性难治性NHL的补救方案如DHAP（地塞米松,阿糖胞苷,顺铂）、ESHAP（依托泊苷,甲基强的松,阿糖胞苷,和顺铂）和EPIC方案（依托泊苷,泼尼松龙,异环磷酰胺和顺铂）,尽管有效,然而顺铂常常给患者带来严重的肝肾功能损害,依托泊苷易诱发第二肿瘤,致使这些方案作用受限, 因此研究新的药物或联合方案, 实现治疗的高效低毒已是必然。
- 张明宛郭坤元许晓军
- 关键词：非霍奇金淋巴瘤吉西他滨LYMPHOMA依托泊苷肝肾功能损害阿糖胞苷
- 糖酵解与血液肿瘤被引量：2
- 2012年
- 恶性肿瘤与正常组织有许多不同之处，其中，一个显著差异体现在能量代谢方面。人体细胞能量供给主要来自于葡萄糖代谢。糖代谢可通过线粒体氧化磷酸化和糖酵解两种方式供应能量三磷酸腺苷（ATP）。80年前，OttoWarburg发现：与正常细胞相比，肿瘤细胞即使在供氧充足的条件下也多选择将丙酮酸转化成乳酸，而不是在线粒体对丙酮酸进行氧化磷酸化的糖酵解途径作为产能的主要方式，这种现象被称为“Warburg效应”。与线粒体有氧代谢相比，糖酵解代谢是个相对低效的产能过程。肿瘤细胞可不依赖于氧的存在将代谢形式由氧化磷酸化转变为产能低效的糖酵解方式。这种能量代谢的异常在许多肿瘤中都已得到了证实，成为肿瘤细胞的一个重要特征。
- 宋奎许晓军
- 关键词：血液肿瘤线粒体氧化磷酸化葡萄糖代谢能量代谢三磷酸腺苷
