国家自然科学基金(30872207)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 高通量测序技术在寄生虫学中的应用
- 2013年
- 高通量测序技术具有读长较短和能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定等特征。与传统Sanger测序技术相比，高通量测序技术具有高通量、高分辨率、低成本等优点，极大地促进了测序技术在生命科学研究中的应用。该文对高通量测序技术及其在寄生虫基因组学、转录组学及蛋白组学方面的应用进行综述．讨论高通量测序技术在寄生虫学应用中的发展前景和存在问题。
- 曾书瑞李雅杰
- 关键词：高通量测序寄生虫基因组学转录组学微小RNA
- 中国人源蓝氏贾第鞭毛虫ppdk基因的克隆及其表达产物的鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的获取中国人源性蓝氏贾第鞭毛虫ppdk基因及相关基因产物方法以中国人源性贾第虫基因组DNA为模板,设计引物进行PCR扩增,获取ppdk基因并进行测序分析。筛选得到的阳性克隆连接至原核表达载体pET28a(+),构建重组表达载体,并转化宿主菌大肠埃希菌感受态细胞E.coliBL21(DE3),进行重组蛋白的IPTG诱导表达。收集重组表达产物进行亲和层析纯化,再用Western blot进行免疫学分析鉴定。结果序列测定分析可知,获得的阳性克隆插入片段包含一个2 655 bp的开放阅读框架;比对其基因序列发现,其与ATCC 50803(美国WB虫株C6株)的同源性可高达99%。该基因片段编码884个氨基酸,预测其表达蛋白的分子质量单位大小约为97.6 ku。Western blot显示该基因序列的原核表达产物能够被抗6个组氨酸标签的特异性抗体识别,提示重组表达产物为实验预期的目的蛋白。结论对贾第虫ppdk基因进行了克隆及原核表达,并对表达产物进行了纯化和免疫学初步鉴定,为贾第虫病治疗的高通量药物筛选等的研究奠定了基础。
- 张永轻滕美君王云华李雅杰
- 关键词：蓝氏贾第鞭毛虫PPDK克隆原核表达
