国家林业局948项目(2011-G5-7)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：屠康桑宏庆王丽王耘张霄更多>>
- 相关机构：南京农业大学安徽科技学院更多>>
- 发文基金：引进国际先进农业科技计划江苏省农业科技自主创新基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：理学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 时间分辨荧光免疫法测定土壤中Cry1Ac毒素被引量：2
- 2012年
- 为了建立快速监测土壤中Cry1Ac毒素的方法,本试验利用Cry1Ac多克隆抗体和铕标记的羊抗兔IgG,采用时间分辨荧光免疫分析技术(Time-resolved fluorescence immunoassay,TRFIA)法快速检测5种典型土壤(黑土、黄壤、红壤、紫色土、潮土)中Cry1Ac毒素的回收率。结果表明,该方法最低检出限为0.3μg/L,线性检测范围为0.3～500.0μg/L,批内和批间变异系数均小于10.00%。5种土壤中Cry1Ac毒素的平均添加回收率为75.03%,其中有机质含量最高的黑土的添加回收率最低,且随着不同土壤中有机质含量的降低,添加回收率逐渐升高。间接时间分辨荧光免疫分析技术(TRFIA)法与酶联免疫吸附(ELISA)法的测定结果高度相关,相关系数为0.996 7。因此,本试验建立的TRFIA方法可为土壤中Cry1Ac残留检测提供一个新的平台。
- 王耘刘贤进刘媛张存政张霄徐重新
- 关键词：土壤时间分辨荧光免疫分析
- 基于分子信标的有机磷农药适配体活性位点分析及改造被引量：8
- 2012年
- 设计了一个长度为20个核苷酸的分子信标,建立了有机磷农药和分子信标竞争结合适配体鉴定其活性的方法,对前期筛选的两条适配体进行了活性位点分析和改造。结果表明,分子信标设计合理,性能稳定,其发夹结构在室温下既可成功闭合也可成功打开,最佳的活性鉴定条件为分子信标与适配体添加比例1.25∶1,孵育时间50 min,孵育温度为室温。活性位点分析表明Loop2-4是4种有机磷农药共有的活性位点,Loop2-3及SS4-54适配体5'端和3'端残余的核苷酸是甲拌磷重要的活性位点,Loop2-2和Loop4-2是丙溴磷和水胺硫磷共有的活性位点,Loop4-3是丙溴磷和氧化乐果共有的活性位点,Loop2-1和Loop4-1是水胺硫磷重要的活性位点。通过基因拼接改造的SS24-PJ-35适配体对丙溴磷和水胺硫磷的结合活性明显提高。
- 王丽张存政刘媛屠康桑宏庆刘贤进
- 关键词：分子信标适配体有机磷农药
